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LTP4基因超表达载体的构建及其遗传转化被引量：2: 2011年; 将脂质转移蛋白(LTP4)基因插入植物表达载体pBI121—35S,构建超表达载体pBI121—35S∶∶LTP4,通过农杆菌介导法将其转入拟南芥Arabidopsis thalianaColumbia生态型品种中,获得了卡那霉素筛选的抗性植株。PCR扩增验证及RT—PCR分析表明,该基因获得超表达。; 徐刚标申响保鲍时来张照亮; 关键词：拟南芥

珙桐天然种群遗传多样性的ISSR标记分析被引量：18: 2012年; 利用ISSR分子标记分析来自11个天然珙桐种群的遗传多样性。从100条引物中筛选出5条引物能扩增出稳定、清晰且具多态性的条带,共扩增出77个条带。其中74个为多态,多态条带百分率(PPB)为96.10%;各种群PPB值为37.66%～63.64%,平均为54.07%。种内Shannon多样性指数(HSP)为0.4849,种群内Shannon多样性指数(HPOP)为0.1886～0.3274,平均为0.2774。这表明珙桐在物种和种群水平上均维持较高的遗传多样性。分子方差分析显示,种群间与种群内遗传变异分别占总遗传变异的46.22%,53.78%,种群间呈高度遗传分化。种群间遗传距离与对应的地理距离呈显著正相关(r=0.546,P<0.01)。UPGMA法聚类分析将11个珙桐种群分为3组。研究结果为珙桐遗传资源保护策略制定提供有价值的种群遗传学信息。; 张玉梅徐刚标申响保吴雪琴覃建庸陈娟; 关键词：ISSR

杉木ISSR—PCR反应体系的正交优化被引量：6: 2011年; 利用正交设计实验对影响杉木ISSR-PCR扩增的重要因素（Mg^2＋、dNTP、模板DNA、引物、TaqDNA聚合酶）进行优化,以建立杉木ISSR-PCR反应的最佳体系。结果发现杉木ISSR-PCR最佳反应体系（20μL）为：MgCl21.8 mmol/L,dNTPs 0.2 mmol/L,引物0.7μmol/L,模板DNA 90 ng,TaqDNA聚合酶1 U;退火温度为52-55℃。扩增反应程序为：94℃预变性5 min;94℃变性30 s,52℃退火40 s,72℃延伸2 min,40个循环;72℃延伸7 min;4℃保存。该反应体系的建立,为杉木种质资源分类、遗传多样性分析提供了更客观可靠的方法。; 安静徐刚标申响保谷振军张玉梅储秀云; 关键词：杉木 ISSR-PCR

珙桐cpDNA非编码序列引物反应条件优化与筛选被引量：4: 2011年; 实验采用改良CTAB方法提取总DNA,以珙桐及其近缘种基因组DNA为材料,优化cpDNA非编码序列PCR扩增条件,优据优化的PCR扩增条件,首次筛选出适合于珙桐分子谱系地理学研究的cpDNA非编码序列和引物。结果表明:25μL PCR反应体系中含有50 ng DNA,10×Buffer,2.5 mmol MgCl2,0.4 mmol dNTPs,0.2μmolpri mer1,0.2μmol pri mer2,1.25 U Pfu DNA Polymerase。适宜的PCR反应程序为94℃5 min,94℃1 min,退火时间45 s,退火温度和72℃延伸时间依不同的引物和产物而不同,35个循环,72℃总延伸7 min。稳定性好的、扩增条带清晰且单一的trnSGCU和trnGUUC、F71和R1516、rps16—F和rps16—R、atpB—49和rbcL—188四对引物可作为进一步珙桐分子谱系地理学研究的引物。; 张玉梅徐刚标谷振军安静; 关键词：CPDNA 非编码序列引物筛选

种内谱系地理学及在植物遗传多样性保护中的应用被引量：6: 2011年; 谱系地理学是一门研究近缘物种间或种内水平的谱系地理分布原理和过程的新兴交叉学科。介绍了谱系地理学基本理论,讨论了用于植物种内谱系地理学研究的常用叶绿体非编码序列标记,包括rpl16、trnK内含子,trnT-trnF、atpB-rbcL、psbA-trnH间隔序列,综述了种内谱系地理学在珍稀植物遗传多样性保护中应用现状,展望植物谱系地理学研究及其应用前景。; 徐刚标; 关键词：谱系地理学植物遗传多样性

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国家自然科学基金(31070484)