浙江省科技攻关计划(2005C23005)
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
- 相关作者：潘建平吴茜茜翁跃颂刘琴王圣超更多>>
- 相关机构：浙江大学浙江大学城市学院更多>>
- 发文基金：浙江省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- MHCⅠ类分子-抗原肽单链三聚体的制备及其应用被引量：1
- 2006年
- 主要组织相容性复合物(MHC)Ⅰ类分子-抗原肽单链三聚体(SCT)由MHCⅠ类分子的重链、β_2微球蛋白及抗原肽分子用接头相连接折叠形成。SCT能有效地维持其共价结构,并稳定地在细胞表面表达,能更有效地激活抗原特异性的CD8^+细胞毒性T淋巴细胞,从而能更有效地清除病原体感染和恶性肿瘤细胞。
- 刘琴潘建平
- 关键词：MHC疫苗DNA免疫疗法
- 血管内皮生长因子受体-2胞外区基因修饰树突状细胞的抗实验性肺转移作用被引量：4
- 2006年
- 目的研究血管内皮生长因子受体-2胞外区基因修饰树突状细胞(DC)的抗肿瘤转移作用及其机制。方法电穿孔法基因转染DC,ELISA检测基因转染DC表达sVEGFR-2水平;经尾静脉给C57BL／6小鼠分别注射PBS、DC、pcDNA3．1修饰的DC(DC-vector)、pcDNA3．1／sVEGFR-2修饰的DC(DC-sVEGFR-2),连续3次,每次间隔1周,最后一次免疫注射后10 d,以51Cr释放法检测小鼠脾细胞VEGFR-2特异性CTL活性,藻酸钠小珠法检测肿瘤细胞诱导的新生血管形成,以B16黑色素瘤肺转移模型观察DC-sVEGFR-2免疫的抗肿瘤转移作用。以抗-CD4单抗或抗-CD8单抗分别剔除体内CD4+T细胞及CD8+T细胞,研究DC-sVEGFR-2免疫抗肿瘤转移作用的免疫学机制。结果DC- sVEGFR-2能有效表达sVEGFR-2,而DC-vector和DC不表达sVEGFR-2。DC-sVEGFR-2免疫小鼠脾细胞能有效杀伤VEGFR-2+的靶细胞H5V和3LL-sVEGFR,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0．01),但对VEGFR-2-的同系EL4和3LL细胞无杀伤作用。DC-sVEGFR-2免疫能显著抑制肿瘤诱导的新生血管形成,DC-sVEGFR-2免疫小鼠藻酸钠小珠中FITC-dextran的摄取量仅为对照组的50％,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0．01)。DC-sVEGFR-2免疫组小鼠B16黑色素瘤肺转移灶数目显著减少,瘤灶体积显著小于对照组,与DC-vector免疫组相比,肺表面转移灶数目下降81．9％(49．7±12．7:9．0±3．2,P<0．01)。体内T细胞亚群剔除试验显示,DC-sVEGFR-2免疫的抗肿瘤转移作用由CD8+T细胞介导。结论DC-sVEGFR-2免疫能打破自身免疫耐受,诱导针对VEGFR-2的CTL应答,抑制肿瘤诱导的新生血管形成,显著抑制肿瘤的转移,其抗肿瘤转移作用由CD8+T细胞介导。
- 潘建平翁跃颂吴茜茜
- 关键词：血管内皮生长因子受体-2树突状细胞新生血管形成黑色素瘤
- sflk1-IFN-γ双功能蛋白基因重组质粒的构建和表达及生物学活性鉴定
- 2010年
- 目的:构建表达可溶性血管内皮生长因子受体2(sVEGFR2,在小鼠又称sflk1)与IFN-γ双功能蛋白的重组质粒pcDNA3.1(+)/sflk1-IFN-γ,对表达的sflk1-IFN-γ重组蛋白的生物学活性进行鉴定。方法:以RT-PCR法分别扩增出sflk1与小鼠IFN-γ基因片段,克隆入pcDNA3.1(+)载体,将该重组质粒表达于真核细胞,以ELISA和W estern blotting分别检测胞外及胞内sflk1-IFN-γ双功能重组蛋白的表达,并对该蛋白的生物学活性进行鉴定。结果:构建的pcDNA3.1(+)/sflk1-IFNγ-重组质粒能够在真核细胞中有效表达,且表达的sflk1-IFN-γ重组蛋白兼有sflk1和IFN-γ两者的生物学活性。结论:成功构建和表达了sflk1-IFN-γ双功能蛋白基因重组质粒,为进一步研究该双功能蛋白的抗肿瘤作用打下了基础。
- 吴茜茜陈鸿鹄郭佳王圣超潘建平
- 关键词：基因重组
