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重庆市自然科学基金(2007BB5069)

作品数:1 被引量:2H指数:1
相关作者:胡川闽李鹏陈安李淑慧臧家涛更多>>
相关机构:第三军医大学更多>>
发文基金:重庆市自然科学基金更多>>
相关领域:生物学更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学

主题

  • 1篇定向进化
  • 1篇移动抑制因子
  • 1篇噬菌体
  • 1篇噬菌体展示
  • 1篇噬菌体展示技...
  • 1篇细胞
  • 1篇细胞移动
  • 1篇巨噬细胞
  • 1篇巨噬细胞移动...
  • 1篇菌体
  • 1篇CD74
  • 1篇MHC
  • 1篇SHUFFL...

机构

  • 1篇第三军医大学

作者

  • 1篇臧家涛
  • 1篇李淑慧
  • 1篇陈安
  • 1篇李鹏
  • 1篇胡川闽

传媒

  • 1篇第三军医大学...

年份

  • 1篇2008
1 条 记 录,以下是 1-1
排序方式:
应用DNA shuffling及T7噬菌体展示技术定向进化并筛选鉴定sCD74突变体被引量:2
2008年
目的利用DNA shuffling技术,结合T7噬菌体表面展示技术,定向进化MIF受体sCD74,以获得高亲和力突变体基因。方法定点突变的牛、小鼠、人CD74胞外同源区基因以DNaseⅠ消化,回收25—50bp片段进行DNA shuffling;将500bp shuffling产物经限制性酶切后与T7噬菌体DNA连接,与T7 package extracts组建噬菌体文库;采用竞争淘洗方法进行5轮筛选,富集得到高亲和力结合MIF的噬菌体;挑取20株噬菌体单克隆进行基因克隆并测序,对测序结果进行生物信息学分析,同时以竞争ELISA初步鉴定进化效果。结果20株噬菌体单克隆具有相同的sCD74突变基因,为相同克隆,将此克隆命名为sHCD74m,其基因命名为sHCD74mD;竞争性ELISA分析显示其MIF结合力提高。结论得到了与MIF高亲和力结合的sCD74突变体基因sHCD74mD。
臧家涛李淑慧李鹏陈安胡川闽
关键词:SHUFFLING巨噬细胞移动抑制因子CD74噬菌体展示技术MHC
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