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FcγRⅡb缺陷抑制MDSC亚群免疫负向调控功能的初步研究: 髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cell，MDSC)是一群具有很强免疫抑制功能的异质性细胞，与多种肿瘤的预后呈负相关，并降低肿瘤免疫治疗的效果。免疫球蛋白IgG的Fc段受体(FcγR...; 宁晓敏; 关键词：免疫球蛋白IGG 髓源性抑制细胞免疫抑制功能; 文献传递

脂多糖对B细胞的活化作用及机制的初步研究被引量：12: 2011年; 目的观察TLR4配体脂多糖(LPS)对B细胞功能影响及相关的信号转导通路。方法利用免疫磁珠法分选小鼠脾脏CD19+B细胞,体外用LPS刺激后,CBA(cytometric bead array)法检测B细胞分泌的Ig(immunoglobulin)亚型;流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测B细胞表型;CBA法检测培养上清中细胞因子IL-6、IL-10、IL-12p70、TNF浓度。利用ERK、JNK、p38MAPK和NF-κB信号转导抑制剂检测B细胞内细胞因子分泌的信号转导通路。结果 LPS可以诱导B细胞产生IgG1-κ和IgM-κ抗体,上调B细胞表面CD40、CD80、CD86和MHCⅡ类分子的表达,促进IL-6、IL-10和TNF的高分泌。JNK、p38MAPK和NF-κB信号转导通路调控B细胞IL-6、IL-10和TNF的分泌。结论 LPS可以通过诱导抗体产生、上调共刺激分子表达和促进细胞因子分泌等多方面调节B细胞功能。; 钱莉佟大可潘兴元田芳龚卫娟季明春; 关键词：脂多糖类 B淋巴细胞信号转导

分泌IFN-γ的杀伤性树突状细胞的体外诱导培养及鉴定: 2011年; 目的从体外诱导的骨髓来源的树突状细胞(dendritic cells,DC)中分离分泌IFN-γ的杀伤性树突状细胞(IFN-γproducing killer dendritic cells,IKDC).方法取C57BL/6小鼠骨髓细胞,以小鼠重组GM-CSF和IL-4协同诱导下培养.培养第6天,加LPS刺激.培养第7天,收集细胞,通过流式细胞仪(flowcytometer,FCM)分选出CD11clowB220+NK1.1+的细胞,FCM进一步鉴定其表型.并将其与肿瘤细胞系B16F10共培养24 h后,CBA(cytometric bead array)法检测共培养上清中IFN-γ的分泌水平.结果体外培养的骨髓来源的DC中,FCM检测存在CD11clowB220+NK1.1+的细胞,进一步鉴定发现其高表达CD49b,低表达MHC II类分子,不表达Gr-1分子;并且与肿瘤细胞B16F10共培养后可分泌大量IFN-γ.结论通过FCM分选的方法可从体外培养的骨髓来源的DC中获得IKDC.; 钱莉陆家辉潘兴元田芳龚卫娟季明春; 关键词：骨髓细胞培养

构建稳定表达PDL1的B16F10细胞株: 2020年; 目的通过转染及流式细胞仪(flow cytometry,FCM)筛选出稳定表达小鼠细胞程式死亡配体1(Programmed cell death ligand 1,PDL1)的B16F10细胞株。方法将携带PDL1的真核表达质粒通过脂质体法转染到B16F10细胞株中,经FCM进行多次分选,筛选出稳定表达PDL1的B16F10细胞株,将其与抗CD3/抗CD28抗体活化的CD4^+T细胞共培养48 h后,FCM检测CD4^+T细胞表面CD69以及CD25的表达。结果建立了稳定表达PDL1的B16F10细胞株,该细胞株表面的PDL1可诱导CD4^+T细胞高表达CD25。结论成功地得到了稳定表达PDL1的B16F10细胞株,为后续研究奠定了物质基础。; 宁晓敏李冬琨钱莉

小鼠CD_8分子α链在SP2/0细胞中的表达及鉴定: 2011年; 目的构建CD8α真核表达载体,为构建膜型细胞因子提供重要工具。方法采取RT-PCR从磁珠分选的CD8α+T细胞中得到CD8α的cDNA基因,将其克隆入表达载体pVITRO。经测序后转染SP2/0细胞,通过流式细胞仪和激光共聚焦显微镜检测CD8α分子在SP2/0细胞中的表达情况。结果构建的pVITRO/CD8α载体测序后,Genebank比对证实为CD8α的cD-NA分子,流式细胞仪和激光共聚焦显微镜结果均说明CD8α在SP2/0细胞的细胞膜上得到表达。结论 CD8α在真核细胞膜上能成功表达,为进一步构建膜表达型细胞因子奠定了基础。; 钱莉潘兴元龚卫娟季明春; 关键词：CD8Α

共表达膜型IL-15和RAE的细胞克隆的筛选和鉴定: 2011年; 目的筛选能够共表达膜型IL-15和RAE的细胞株,为扩增和活化特定免疫细胞提供有效的实验工具。方法前期工作中已通过潮霉素筛选获得共表达膜型IL-15和RAE的BaF3细胞,但阳性细胞所占的比例较低。本实验通过有限稀释法先筛选高表达RAE的单克隆细胞株,再筛选高表达膜型IL-15的单克隆细胞株,最终获得了1株共表达膜型IL-15和RAE的单细胞克隆。将该细胞株与NK细胞共培养后,通过IFN-γ的分泌验证其生物学活性。结果流式细胞仪证实该细胞株能够高水平共表达膜型IL-15和RAE。并具有很强的活化NK细胞的效应。结论成功地制备了共表达膜型IL-15和RAE的单克隆细胞株,为活化特定免疫细胞,如IKDC和NK细胞提供实验工具。; 钱莉陆家辉潘兴元田芳龚卫娟季明春; 关键词：IL-15 RAE 克隆细胞

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国家自然科学基金(81001308)