国家自然科学基金(30671830)
- 作品数：8 被引量：28H指数：5
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- 相关机构：天津医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市高等学校科技发展基金计划项目天津市应用基础与前沿技术研究计划更多>>
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- 日本血吸虫感染对OVA诱导的小鼠过敏反应的影响被引量：9
- 2008年
- 目的研究蠕虫感染对过敏性哮喘的影响。方法将15只BALB/c小鼠随机分成3组,每组5只。Ⅰ组为血吸虫感染后OVA致敏组,Ⅱ组为单纯OVA致敏组,Ⅲ组为正常对照组。Ⅰ组小鼠首先建立日本血吸虫感染模型,于感染后第57~84d,与Ⅱ组小鼠一起以OVA(卵清白蛋白)诱导建立过敏性哮喘模型,第85d剖杀全部小鼠,收集脾脏、肺脏和支气管肺泡灌洗液。制备支气管肺泡灌洗液涂片以计数其中各类细胞;制备肺组织切片以检查肺部病理变化;培养脾细胞以检测培养上清中相关细胞因子水平。另外,还要检测支气管肺泡灌洗液中相关细胞因子水平。结果与Ⅱ组相比,Ⅰ组小鼠肺部嗜酸粒细胞数量显著减少(P<0.05),肺部炎症明显减轻(P<0.05),支气管肺泡灌洗液和脾细胞培养上清中IL-4和IL-5水平均降低(P<0.05),而IFN-γ水平无明显改变(P>0.05)。结论日本血吸虫感染对OVA诱导的过敏性哮喘有抑制作用。
- 李健杨秀珍刘金霞吴增强刘霞王世中刘佩梅
- 关键词：日本血吸虫OVA过敏性哮喘
- 蠕虫感染与哮喘关系的研究进展被引量：4
- 2007年
- Strachan提出的卫生学假说认为：卫生条件的改善使人们在儿童期接触感染性疾病的机会减少，使哮喘等过敏性疾病的发病率上升。近年来，蠕虫感染与哮喘之间的关系已引起研究者的广泛关注。该文就蠕虫感染与哮喘之间IgE水平的变化及细胞因子的关系进行综述。
- 刘金霞杨秀珍刘佩梅
- 关键词：哮喘蠕虫IGE细胞因子
- 流式细胞术检测小鼠脾细胞内细胞因子刺激方案的筛选被引量：6
- 2010年
- 目的建立流式细胞术检测小鼠细胞内细胞因子的方法。方法取5只BALB/c小鼠建立哮喘模型,4周后处死,制备脾脏单个核淋巴细胞悬液,分别按A、B、C3个刺激方案培养。A方案组:用25ng/mlPMA、1μg/mlIonomy-cin以及10μg/mlBFA刺激4h;B方案组用50ng/mlPMA、1μg/mlIonomycin以及10μg/mlBFA刺激4h;C方案组用3μg/mlConA刺激2d,加入10μg/mlanti-CD3、2μg/mlanti-CD28和10μg/mlBFA后继续刺激5h。培养后各组细胞悬液根据检测目的分成若干检测管,结合固定破膜处理技术,进行细胞表面抗原CD4及细胞内因子IL-4、IL-5、IL-10和IFN-γ染色,用流式细胞仪分析,比较不同刺激条件下各种细胞内因子的表达情况。实验设未刺激对照、激活对照、胞内染色对照及同型对照。结果 A方案组中5只鼠的细胞内因子表达率IL-4为(5.96±1.199)%,IFN-γ为(7.98±3.939)%,IL-10为(4.78±2.366)%,IL-5表达率均低于1%;B方案组中5只鼠的细胞内因子表达率IL-4为(5.76±1.108)%,IFN-γ为(7.44±2.269)%,IL-10为(4.50±1.560)%,IL-5表达率均低于1%;C方案组5只鼠IL-10、IL-5表达率分别为(3.14±0.288)%和(6.82±1.996)%。结论 25ng/mlPMA、1μg/mlIonomycin及10μg/mlBFA刺激4h的方案较适合小鼠淋巴细胞IL-4、IFN-γ的检测;3μg/mlConA刺激2d,加入10μg/mlanti-CD3、2μg/mlanti-CD28和10μg/mlBFA继续刺激5h的方案适合IL-5、IL-10的检测,并且均是从单个核细胞水平对细胞内因子进行检测。
- 李路远刘俊燕钟岗纪彬张伟然刘佩梅
- 关键词：流式细胞术小鼠刺激剂细胞因子
- CD4^+ CD25^+调节性T细胞在血吸虫可溶性虫卵抗原影响哮喘中的作用研究被引量：8
- 2011年
- 目的研究血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)与哮喘发生的关系及其对CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)及相关基因Foxp3表达的影响。方法 BALB/C小鼠腹腔及足垫共注射SEA 50μg/只,每周1次,共4次。对照组注射生理盐水。然后用卵清白蛋白(OVA)诱导小鼠产生过敏性哮喘。剖杀小鼠,取肺组织,做病理学检查;收集支气管肺泡灌洗液(BALF),涂片、染色后进行细胞分类计数;分离脾细胞,用流式细胞仪检测CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)占CD4+T细胞的比例;提取脾脏RNA,以逆转录得到的cDNA为模板扩增Foxp3基因,检测脾脏Foxp3mRNA表达水平。结果 SEA免疫并OVA致哮喘组小鼠肺组织炎症较OVA单纯哮喘对照组轻,只有少量炎性细胞浸润。BALF涂片染色检查SEA免疫组BALF中的细胞密度低于对照组,其中嗜酸粒细胞占总细胞数的(2.22±1.52)%,对照组占(19.93±4.08)%,差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞仪检测SEA免疫组小鼠脾细胞中CD4+CD25+Treg占CD4+T细胞总数的(32.24±2.19)%,对照组占(27.41±2.87)%,差异有统计学意义(P<0.05);PCR检测SEA免疫组脾细胞Foxp3mRNA表达水平高于对照组。结论 SEA对哮喘的发生有一定抑制作用,可能通过CD4+CD25+Treg影响机体的免疫调节机制。
- 朱云娟杨秀珍刘霞吴增强纪伟华安桂珍沈悦云刘金霞李健刘佩梅
- 关键词：调节性T细胞哮喘FOXP3
- 日本血吸虫感染鼠树突状细胞对OVA诱导的CCL-11和IL-13R_(α2)的影响被引量：3
- 2010年
- 目的探讨过继转移血吸虫感染鼠树突状细胞(DC)对卵清蛋白(OVA)诱导的肺组织细胞CCL-11、IL-13Rα2表达和嗜酸性粒细胞浸润的影响。方法 20只BALB/c小鼠随机分成正常对照组(N组)、单纯哮喘组(OVA组)、诱发哮喘后过继转移血吸虫感染鼠DC组(OVA/SJDC组)和诱发哮喘后过继转移正常鼠DC组(OVA/NDC组)。各组最后一次鼻饲后24 h,处死小鼠,取左肺,切片,行HE染色和免疫组化染色,观察炎症变化,检测CCL-11和IL-13Rα2在肺组织中的表达。结果肺组织切片HE染色显示,OVA/SJDC组小鼠炎症较轻;OVA和OVA/NDC组炎症明显,有大量炎细胞浸润。免疫组化染色显示,OVA、OVA/SJDC和OVA/NDC小鼠肺组织CCL-11阳性区域平均吸光密度值分别为0.387 4±0.023 6、0.254 6±0.017 2和0.316 0±0.023 5,IL-13Rα2阳性区域平均光密度值分别为0.401 4±0.0130、0.280 8±0.010 2和0.326 6±0.014 4,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论日本血吸虫感染鼠DC能抑制OVA诱导的CCL-11和IL-13α2表达,从而对哮喘有治疗作用。
- 钟岗刘俊燕李路远王世忠纪伟华安桂珍张伟然刘佩梅
- 关键词：树突状细胞过继转移
- 血吸虫可溶性虫卵抗原对哮喘的抑制作用及机制研究
- 2012年
- 目的研究血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)对哮喘发生的抑制作用及免疫调节机制。方法BALB/C小鼠腹腔及足垫注射SEA 50μg/只,每周1次,共4次。对照组注射生理盐水。然后用卵清白蛋白(OVA)诱导小鼠产生过敏性哮喘,剖杀小鼠,取肺组织进行病理学检查;收集支气管肺泡灌洗液(BALF),涂片、染色后进行细胞分类计数;分离脾细胞,用流式细胞仪检测CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)占CD4+T细胞的比例。结果 SEA免疫并OVA致哮喘组小鼠肺组织炎症明显轻于OVA单纯哮喘对照组,只有少量炎性细胞浸润。BALF涂片染色后发现SEA免疫组BALF中的细胞密度低于对照组,其中嗜酸性粒细胞占总细胞数的比例(2.2±1.5)%明显低于对照组(19.9±4.1)%,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪检测结果发现SEA免疫组小鼠脾细胞中CD4+CD25+Treg占CD4+T细胞总数的(32.2±2.2)%,明显高于对照组(27.4±2.9)%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 SEA对哮喘的发生有一定的抑制作用,其机制可能是通过CD4+CD25+调节性T细胞影响机体的免疫调节机制。
- 朱云娟杨秀珍刘霞吴增强纪伟华安桂珍沈悦云刘金霞刘佩梅
- 关键词：哮喘
- 日本血吸虫感染鼠树突状细胞对哮喘抑制作用的实验研究被引量：9
- 2008年
- 目的通过过继转移日本血吸虫感染鼠树突状细胞(DC),探讨DC在抑制过敏性哮喘中的作用及机制。方法用CD11c+磁珠分离纯化日本血吸虫感染鼠及正常鼠DC亚群CD11c+细胞。将15只BALB/c小鼠随机分为3组,A组为过继转移日本血吸虫感染鼠DC并诱发过敏性哮喘组,B组为过继转移正常鼠DC并诱发过敏性哮喘组,C组为单纯过敏性哮喘组。A、B两组小鼠经尾静脉过继转移1×106DC,2 h后A、B、C 3组均开始诱发哮喘。4周后处死小鼠,收集肺泡灌洗液,检测细胞因子IL-4I、L-5及IFN-γ水平;取小鼠肺组织作病理切片,观察其炎症变化。结果与B、C组比较,A组肺部炎症明显减轻,按Underwood标准,A、B、C 3组总评分分别为5.00±1.58、11.40±2.07和13.20±2.86,差异有统计学意义(P<0.05)。A、B、C组小鼠肺泡灌洗液IL-4水平分别为(23.25±1.57)pg/ml、(40.70±3.28)pg/ml和(65.23±4.84)pg/ml,差异有统计学意义(P<0.05);IL-5水平分别为(16.20±4.11)pg/ml、(41.41±7.14)pg/ml和(64.75±16.96)pg/ml,IFN-γ水平分别为(6.60±2.34)pg/ml(、6.94±2.19)pg/ml和(5.87±2.44)pg/ml,差异无统计学意义(P>0.05)。结论日本血吸虫感染鼠DC通过影响受体鼠Th2细胞因子的分泌明显抑制过敏性哮喘的发生。
- 沈跃云杨秀珍李健王世中吴增强刘金霞钟岗张伟然刘佩梅
- 关键词：过敏性哮喘树突状细胞过继转移
- 日本血吸虫感染对过敏性哮喘影响的实验研究被引量：8
- 2008年
- 目的建立日本血吸虫感染并发过敏性哮喘实验动物模型及探讨日本血吸虫感染对过敏性哮喘的作用。方法取25只BALB/c小鼠,随机分为3组,A组为日本血吸虫感染并发过敏性哮喘组,B组为单纯过敏性哮喘组,C组为健康对照组。A组小鼠经腹部皮肤感染日本血吸虫尾蚴(23±3)条。8周后,以卵白蛋白(OVA)分别对A组、B组小鼠进行致敏激发,建立过敏性哮喘模型。12周后,取小鼠脾脏制成单细胞悬液并培养72 h,收集脾细胞上清液,检测细胞因子IL-4和IFN-γ水平;收集支气管肺泡灌洗液(BALF),观察嗜酸性粒细胞(EOS)所占的百分比;取小鼠肺组织作病理切片,观察小鼠肺组织的炎症变化。结果与B组比较,A组小鼠BALF涂片中EOS数减少(P<0.05),A、B两组EOS百分比分别为(7.30±5.01)%和(43.60±2.53)%,而C组小鼠BALF中仅见少数气管上皮细胞,无炎细胞;ELISA法检测A、B、C组小鼠脾细胞培养上清IL-4水平分别为(96.02±38.54)pg/ml(、414.86±175.12)pg/ml和(13.55±1.66)pg/ml,IFN-γ水平分别为(11.60±4.18)pg/ml、(7.43±3.60)pg/ml和(7.55±1.57)pg/ml。与B组比较,A组小鼠IL-4水平降低(P<0.05),IFN-γ水平无显著性变化(P>0.05),IL-4/IFN-γ比值降低(P<0.05)。肺部病理改变A组小鼠较轻,B组较重,C组无炎症反应。结论日本血吸虫感染对过敏性哮喘的发生有抑制作用。
- 刘金霞杨秀珍刘佩梅李健朱云娟
- 关键词：过敏性哮喘动物模型OVA细胞因子
