国家自然科学基金(30371575)
- 作品数：19 被引量：56H指数：4
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- 相关机构：南方医科大学济南军区总医院中国人民解放军第一军医大学更多>>
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- 抗内毒素治疗研究进展被引量：8
- 2007年
- 刘宏华王惠珍邹飞
- 关键词：抗内毒素治疗弥漫性血管内凝血病理生理反应免疫细胞凋亡通透性增强
- atRA对新生大鼠纹状体神经干细胞增殖和分化的影响被引量：1
- 2005年
- 目的:研究全反式视黄酸(atRA)对体外培养的NSCs分裂增殖和分化的作用及其机制。方法:分离 培养新生SD大鼠纹状体神经干细胞(NSCs),免疫荧光细胞染色加以鉴定;采用不同组合配方的培养液培养细胞, FCM检测atRA对NSCs细胞周期分布和增殖的影响;利用免疫荧光鉴定和分化细胞的分类计数法,判定atRA对NSCs 分化的影响。结果:细胞周期分析表明,atRA处理组C0／G1期细胞数量显著增加,PI值小于对照组。atRA处理组与 对照组的NSCs,经诱导分化后产生的细胞类型有显著差异,atRA处理组产生的神经元是对照组的2．5倍。结论:a tRA能抑制NSCs细胞增殖,并抵消生长因子对NSCs的促有丝分裂作用,atRA还促进NSCs向神经元方向分化。
- 邓红邹飞郭洪波
- 关键词：全反式视黄酸干细胞细胞增殖细胞分化
- 缺氧对体外培养的大鼠脑星形胶质细胞存活的影响被引量：1
- 2005年
- 目的研究缺氧对体外培养的大鼠星形胶质细胞活性及损伤的影响,确定星形胶质细胞体外培养的最佳缺氧时间点以对其进行深入研究。方法体外培养大鼠大脑皮层星形胶质细胞,纤维酸性蛋白免疫荧光染色鉴定。通以5%CO2+95%N2混合气体造成缺氧,分别观察缺氧不同时间段星形胶质细胞光镜下的形态变化,死亡细胞数目,培养上清液的氧分压、葡萄糖和乳酸盐的浓度及乳酸脱氢酶(LDH)活性的变化。结果星形胶质细胞在缺氧条件下,随着时间延长,细胞逐渐出现肿胀、漂浮和坏死。与对照组相比,缺氧10h组死亡细胞数、葡萄糖和乳酸盐的浓度及乳酸脱氢酶(LDH)活性的变化均有明显差异(P<0.05),且与缺氧时间呈正相关,其中缺氧组细胞培养上清液中葡萄糖浓度比对照组明显降低,而乳酸盐浓度和LDH活性则明显升高,而缺氧8h组虽然葡萄糖和乳酸盐的浓度及LDH活性的变化明显,但星形胶质细胞保存着多突触的形态。结论缺氧可致体外培养的鼠脑星形胶质细胞损伤甚至死亡,缺氧8h可作为以体外培养的鼠脑星形胶质细胞为研究对象的缺氧生物学研究的最佳时间点。
- 颜晓慧陈雪梅邹飞
- 关键词：星形胶质细胞缺氧缺氧时间
- 全反式视黄酸对神经干细胞诱导分化和c-myc基因表达的调控被引量：1
- 2007年
- 目的:观察全反式视黄酸对神经干细胞的诱导分化情况,及其对c-myc基因、蛋白表达的影响。方法:实验于2005-03/06在南方医科大学高温医学研究室完成。①基础培养液:DMEM/F12中含Hepes15mmol/L,NaHCO32g/L,2%B27,100U/mL青霉素,100U/mL链霉素。神经干细胞培养液:基础培养液+碱性成纤维细胞生长因子20μg/L。神经干细胞分化诱导培养液:基础培养液+体积分数为0.01的胎牛血清。全反式视黄酸储备液:以二甲基亚砜为溶剂,配成浓度为1.0×10-3mol/L全反式视黄酸储备液。②出生2～3d SD大鼠6只,麻醉后开颅取出全脑,机械分离结合无血清培养基进行鼠纹状体神经干细胞的分离培养,取生长状态良好的第3代细胞用于实验。③将神经干细胞克隆接种于12孔培养板中,全反式视黄酸组加入神经干细胞分化诱导培养液+不同浓度全反式视黄酸(0.01,0.1,1.0,10.0μmol/L)。二甲基亚砜对照组加入神经干细胞分化诱导培养液+0.01%二甲基亚砜。各组细胞培养7d后进行免疫组织化学染色鉴定,计数神经元样细胞分化率。RT-PCR分析c-myc基因表达情况,Western blots检测c-myc蛋白的表达。结果:①神经干细胞的原代和传代培养与鉴定:来源于新生大鼠纹状体组织的原代克隆和传代克隆,呈巢蛋白抗原阳性。第3代细胞加入含不同浓度全反式视黄酸的神经干细胞分化诱导培养液,呈神经元特异性烯醇化酶、胶质纤维酸性蛋白抗原阳性。②全反式视黄酸对神经干细胞分化的影响:随着全反式视黄酸浓度(0.01,0.1,1.0,10.0μmol/L)升高,神经元样细胞分化率逐渐增加(F=358.59,P=0.000)。全反式视黄酸浓度为1.0,10.0μmol/L时神经元样细胞分化率基本相似[(34.27±0.81)%,(35.27±0.32)%,P=0.163]。③全反式视黄酸对c-myc基因及其蛋白表达的影响:随着全反式视黄酸作用时间的增加,与二甲基亚砜对照组相比,全反式视黄酸组的c-myc mRNA表达下调(F=20.891,P=0.00
- 邓红邹飞罗海吉
- 关键词：干细胞细胞分化MYC全反式视黄酸
- 预适应对氧化应激中HepG2细胞保护作用的初步探讨被引量：2
- 2006年
- 目的:建立HepG2细胞预适应、氧化应激模型。方法:应用不同浓度H2O2作用于HepG2细胞,分别用吖啶橙和溴化乙锭(AO/EB)双染色法、MTT比色法及PI染色流式细胞术检测细胞活力及凋亡情况。结果:各组细胞经AO/EB双染色之后呈现不同的染色状态:对照组细胞为正常梭形,呈均匀绿色荧光染色;预适应组可见少量绿色浓染细胞;氧化应激组可见大量绿色或红色浓染凋亡细胞;预适应后氧化应激组凋亡细胞明显少于氧化应激组。预适应组MTT比色法测定细胞生存活力比较:对照组>预适应组>预适应后氧化应激组>氧化应激组(P<0·05)。PI染色流式细胞术测细胞凋亡率比较:氧化应激组>预适应后氧化应激组>预适应组>对照组(P<0·05)。结论:不同浓度H2O2作用于HepG2细胞发生预适应和氧化应激现象,应用小剂量H2O2作用于细胞可以保护细胞免受更大浓度H2O2带来的损伤。
- 韩雪琳陈雪梅邹飞
- 关键词：H2O2应激HEPG2细胞
- 红细胞生成素(EPO)对脑源性神经干细胞增殖与分化的调控作用被引量：5
- 2005年
- 目的探讨红细胞生成素(EPO)对大鼠海马神经干细胞(NSCs)体外增殖和分化的影响。方法利用无血清培养、单细胞克隆技术,体外培养SD大鼠海马组织源NSCs,在NSCs增殖和分化过程中添加不同剂量EPO,以免疫细胞化学方法对NSCs及其分化后的细胞进行鉴定。结果与对照组相比,不同接种密度条件下的NSCs加入EPO后,增殖期表达Nestin的细胞增加2～4倍,分化期表达Nestin的细胞数明显减少;表达Tuj1和GFAP的细胞出现早,且Tuj1阳性细胞较对照组明显增加(P<0.05),加入antiEPO后Tuj1阳性细胞较对照组明显减少(P<0.01);相同细胞接种密度下,添加不同剂量EPO后Tuj1阳性细胞数呈剂量依赖性增加。结论EPO可促进大鼠海马源NSCs的增殖,并使其呈剂量依赖性的向神经元分化。
- 郭洪波邹飞
- 关键词：红细胞生成素神经干细胞细胞培养细胞分化海马
- 热射病治疗的实验研究进展被引量：15
- 2008年
- 热射病为重症中暑,其发生发展与热应激个体体温调节中枢功能障碍、热细胞毒性、个体炎症反应失控以及凝血-抗凝血平衡紊乱密切相关。目前热射病治疗的研究主要集中在降温(物理降温及使用药物降温),阻断炎症瀑布反应(使用促炎介质受体拮抗剂、抗生素、糖皮质激素、细胞赋活感光色素以及纠正内毒素血症),纠正凝血-抗凝血平衡紊乱,使用人脐血细胞、丙三醇、高渗生理盐水等行血容量扩充,高压氧疗,通过锻炼提高耐热性等。
- 林晓静刘宏华邹飞
- 关键词：热射病全身炎症反应综合征
- 4℃预处理对人中性粒细胞膜电流和极性的影响被引量：1
- 2006年
- 对急性分离的人中性粒细胞采用4℃预处理是进行膜片钳实验前经常采取的步骤,但这一步骤对电生理记录结果有何影响尚无文献报道。本实验探讨这一步骤对电生理记录过程和实验结果的影响。结果显示,4℃预处理可以显著提高细胞的封接率,有利于对中性粒细胞进行电生理记录;封接率提高的原因与4℃预处理降低细胞的极性活动有关,但记录到的电压依赖性钾通道全细胞电流和大电导Ca2+依赖性K+单通道电流动力学没有显著的变化。这些结果表明,4℃预处理可能影响到细胞膜上与极性有关的脂膜变化,但对细胞膜上蛋白的功能影响较少。
- 袁春华蔡春青邹飞
- 关键词：中性粒细胞膜片钳技术
- K_(ATP)通道对缺氧海马CA1区神经元损伤保护作用的机制
- 2007年
- 目的:探讨KATP通道在缺氧中对海马CA1区神经元的保护作用机制。方法:比较对照组、单纯缺氧组、KATP通道激动剂+缺氧组、KATP通道阻断剂+缺氧组中神经元p53 mRNA的表达、DNA断裂、以及神经元存活情况。结果:将神经元暴露在氧浓度为0%的缺氧环境中12h,KATP通道的激动剂二氮嗪(diazoxide,100μmol/L)显著降低p53 mRNA的表达量及细胞的凋亡数量。KATP通道的阻断剂甲糖宁(tolbutamide,100μmol/L)使p53mR-NA表达量显著增加,细胞的凋亡数量也随之显著增加。p53的特异性阻断剂曲古抑菌素(trichostatin,TSA)可以逆转甲糖宁(tolbutamide,100μmol/L)的作用。结论:KATP通道可以通过下调p53 mRNA的表达水平,对缺氧中的海马CA1区神经元起到保护作用。
- 黄潋滟李文军李勃兴邹飞
- 关键词：ATP敏感钾通道神经元P53
- 大鼠发育过程中下丘脑神经元钾离子通道温度效应变化的研究被引量：1
- 2006年
- 为了探讨出生后钾离子通道在下丘脑神经元热敏感分化过程中的作用,采用膜片钳技术研究出生一个月内SD大鼠急性分离神经元的温度效应,结果表明IK电流密度在出生后一个月内变化不大(P>0.05),而IA电流密度则呈现为升高趋势(P<0.05).同时升高温度,不同出生日期的钾通道NPo都有不同程度的升高,但相较P1d的神经元来说,温度对P18d的电压依赖性影响更大一些.同时温度对IK和IA的影响是不一样的,IA的Q10>2,所有这些显示IA通道在神经元温度敏感性的发育分化过程中起着重要的作用.
- 蔡春青邹飞
- 关键词：下丘脑钾通道
