武汉市科技攻关计划项目(200860423230)
- 作品数：14 被引量：45H指数：4
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- 埃兹蛋白(ezrin)在肝癌中的表达及其临床意义被引量：3
- 2009年
- 目的研究埃兹蛋白(ezrin)在正常肝、肝硬化组织及肝细胞癌(HCC)的表达情况,并探讨其表达与肝细胞癌侵袭转移的关系及其临床意义。方法用免疫组织化学SP法检测45例肝癌组织、23例癌旁肝硬化组织、12例正常肝组织中ezrin的表达,分析ezrin与肝癌临床病理因素之间关系。结果12例正常肝组织及23例肝硬化组织中未见ezrin表达,而在45例肝癌组织中ezrin阳性表达率为61.3%(27/45),两者差异有统计学意义(P<0.05)。且ezrin表达与肝癌分化程度、肿瘤有无转移相关(P<0.05)。与患者年龄、性别、肝癌大小无相关性(P>0.05)。结论ezrin表达与肝癌的转移及恶性程度有关,有助于预后判断及治疗方法选择,ezrin表达是反映肝癌生物学行为的有价值指标。
- 戴凤姣冯茂辉谢伟余佳莉段丽吴红艳谢辉
- 关键词：肝癌EZRIN免疫组织化学
- 埃兹蛋白在肺癌中的表达及其临床意义被引量：12
- 2009年
- 目的 观察埃兹蛋白（Ezrin）在正常肺、肺良性肿瘤组织及肺癌的表达，探讨其表达与肺癌侵袭转移的关系及其临床意义。方法用免疫组织化学SP法检测45例肺癌组织、23例肺良性肿瘤组织、12例正常肺组织中Ezrin的表达，分析Eznn与肺癌临床病理因素之间关系。结果12例正常肺组织及23例肺良性肿瘤组织中未见Ezfin表达，而在45例肺癌组织中Ezrin阳性表达率为61．3％（27／45），两者差异有统计学意义（P〈0．05）。且Ezrin表达与肺癌分化程度、肿瘤转移相关（P〈0．05）。与患者年龄、性别、肺癌大小无明显相关（P〉0．05）。结论Ezrin表达与肺癌的转移及恶性程度有关，有助于预后判断及治疗方法选择。
- 赵勇刚谢伟冯茂辉余佳莉段丽吴红艳谢辉
- 关键词：肺癌EZRIN免疫组织化学
- 结直癌组织中GP-96肽复合物的提取纯化和体外免疫效应
- 2009年
- 目的建立从人结直癌组织中提取gp-96肽复合物方法，并检测体外免疫效应。方法采取三步蛋白纯化法，即硫酸铵沉淀法、ConA亲和层析法、阴离子交换蛋白亲和层析法，从10例结直癌组织提取、纯化gp-96肽复合物；SDS—PAGE和Westernblot鉴定gp-96肽复合物；检测GP-96肽复合物的体外免疫效应。结果该方法提取的蛋白质经SDS—PAGE和Westernblot鉴定，证实是gp-96肽复合物，蛋白质得率为50μg／g；体外免疫效应分析：肿瘤组中gp96肽复合物组肿瘤坏死因子（r11NF）-α浓度为（801．54±109．25）ng／L，与阳性对照组（509．17±65．34）ng／L、阴性对照组（156．19±32．08）ng／L比较明显升高，差异有统计学意义（P〈0．01）；健康人对照组与肿瘤组比较，gp96肽复合物组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。肿瘤组中gp96肽复合物组IL-10浓度为（95．71±17．55）ng／L，与阳性对照组（334．55±69．00）ng／L、阴性对照组（205．75±42．04）ng／L比较，差异有统计学意义（P〈0．01）；健康人对照组和肿瘤组比较，gp96肽复合物组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论使用该方法提取结直癌组织中gp-96肽复合物具有操作简单、重复性好、获得率高、体外免疫效应强等特点。
- 卢驰冯茂辉谢伟余佳莉段丽吴红艳谢辉汪付兵
- 关键词：免疫结直肠癌
- 人白细胞介素-15与18协同增强肿瘤浸润淋巴细胞体内对结肠癌细胞的杀伤功能被引量：2
- 2010年
- 目的 观察白细胞介素（IL）-15与IL-18体内增强肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）杀伤功能的效果.方法 用IL-15与IL-18共同刺激从结肠癌患者分离得到的TIL,通过测定其分泌转化生长因子（TGF）-β、IL-4、干扰素（IFN）-γ水平以及TIL的杀伤活性.用IL-15与IL-18共同刺激的TIL与结肠癌细胞SW480共孵育后,接种到SCID鼠皮下,测定肿瘤生长的大小、肝脏转移的肿瘤结节多少、血清中IL-4、IFN-γ水平以及腹腔巨噬细胞的吞噬能力.结果 IL-15与IL-18共同作用于TIL,能够抑制TGF-β、IL-4的分泌（P＜0.05）,促进IFN-γ的分泌（P＜0.05）.IL-15与IL-18共同作用于TIL后,能明显提高TIL对结肠癌细胞SW480的杀伤活性（P＜0.05）.肝脏转移的肿瘤结节明显减少,血清中IFN-γ水平明显升高,腹腔巨噬细胞的吞噬能力增强.结论 IL-15与IL-18协同刺激体内能增强TIL对结肠癌细胞的杀伤功能.
- 陈志芬邓长生冯茂辉彭艳方喜平汪付兵谢伟李春光
- 关键词：结肠癌IL-15IL-18淋巴细胞
- 唾液酸化路易斯抗原X ssDNA适配子的筛选与鉴定被引量：7
- 2009年
- 目的建立体外获得唾液酸化路易斯抗原X（SLeX）ssDNA适配子（aptamers）的方法。方法构建长度为70m的初始随机单链DNA库，其中含30个随机序列，以溴化氰活化的琼脂糖小球为筛选介质，运用指数富集配体的系统进化技术（SELEX技术）获得SLeX的ssDNA适配子。将适配子库克隆、测序，采用DNAMAN软件对其结构进行分析，通过生物素-亲和素-辣根过氧化物酶显色系统测定适配子与SLeX的亲和力。结果经逐轮筛选，所得富集库与SLeX的亲和力逐步提高（A值从0．145增加到了0．460），大部分适配子克隆测序后与预期相符。结论经9轮筛选获得的ssDNA适配子与SLeX的体外结合有高度的特异性及亲和力。
- 吴红艳谢伟冯茂辉段丽余佳莉陈家宽吴洲清谢辉汪付兵
- 关键词：适配子克隆
- FAP-1在肺癌中的表达及其临床意义被引量：1
- 2009年
- 目的:观察肺癌患者癌组织中Fas相关磷酸酯酶(FAP-1)的表达,初步探讨FAP-1表达在肿瘤发生发展中的作用,并分析其意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测60例肺癌及15例肺良性病变标本中FAP-1蛋白的表达水平,设置10例正常肺组织为对照组。结果:FAP-1蛋白的阳性表达主要定位在细胞质内,少数也可见胞膜着色。FAP-1蛋白在正常肺组织中未见表达,良性病变中的表达率为6.7%,而在恶性肿瘤中的阳性表达率为78.3%,与前两者相比差异有显著性(P<0.01)。FAP-1的表达与肿瘤的分化程度和转移呈显著相关(P<0.05),与年龄和肿瘤大小无明显相关性(P>0.05)。结论:FAP-1在肺癌组织中有广泛表达,在临床有转移、分期晚和病理分级低的组织中表达增高,可能对于肺癌的发病机制及恶变程度具有重要意义。
- 赵勇刚谢伟冯茂辉段丽吴红艳余佳莉谢辉
- 关键词：肺肿瘤凋亡FAS相关磷酸酯酶-1免疫组织化学
- 肝癌患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的变化及其意义被引量：5
- 2009年
- 目的探讨应用流式细胞术检测肝癌患者外周血中CIM＋CD25＋调节性T细胞的变化及意义。方法应用三色免疫荧光流式细胞仪测定37例肝癌患者及30例肝硬化患者外周血T细胞亚群CD4＋CD25＋／CD4＋比值。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测外周血中转化生长因子-β1（TGF-β1）的表达水平。结果肝癌患者外周血CD4＋CD25＋／CD4＋比值较肝硬化患者显著增高，两者比较差异有统计学意义（P〈0．05）；肝癌患者外周血中CD4＋CD25＋T细胞水平与肝癌原发肿瘤的大小、TGF-β1呈正相关（P〈0．05）。结论肝癌患者外周血中CD4＋CD25＋调节性T细胞增多，对肝癌患者具有免疫抑制作用。
- 冯茂辉谢伟王维娜余佳莉段丽李春光程伏林汪付兵
- 关键词：CD4+CD25+调节性T细胞肝癌流式细胞术免疫抑制
- 食管癌患者外周血淋巴细胞热休克蛋白表达及其意义被引量：2
- 2010年
- 目的 观察食管癌患者外周血淋巴细胞热休克蛋白（HSP）27和HSP72的表达,探讨其与临床病理生理特征的关系.方法 采用流式细胞术检测45例食管癌患者外周血淋巴细胞HSP27和HSFP72的表达水平,并以43例健康受试者作为对照.结果 食管癌外周血淋巴细胞HSP27、HSP72的表达量分别为17.32±2.97和19.46±5.91,均低于对照组（P＜0.05）,两者表达量呈正相关（P＜0.01）,食管癌外周血淋巴细胞HSP27的表达量与临床病理生理特征无明显相关（P＞0.05）,而HSP72的表达量与食管癌原发肿瘤的大小、淋巴结转移及临床分期相关（P＜0.05）.结论 食管癌外周血淋巴细胞HSP27、HSP72表达下调,HSP72与食管癌的发生发展及淋巴结转移相关.
- 陈家宽吴洲清彭艳方喜平谢伟冯茂辉张京伟李春光
- 关键词：食管癌HSP27外周血淋巴细胞
- 瘤体内直接注射白细胞介素-7基因抗小鼠乳腺肿瘤免疫效应的研究被引量：2
- 2012年
- 目的观察瘤体内直接注射白细胞介素（IL）-7基因抗小鼠乳腺肿瘤免疫效应。方法构建IL-7真核表达质粒（pcDNA3-IL-7）；建立乳腺癌TM40D细胞BALB／C小鼠移植模型；瘤体内直接注射pcDNA3-IL-7，观察小鼠肿瘤体积变化；酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测外周血干扰素（IFN）-γ含量；流式细胞仪检测胞内IFN-γ的分泌量；局部肿瘤经治疗后行常规病理分析。结果成功构建pcDNA3-IL-γ；与对照磷酸盐缓冲液（PBS）组（115．2±11．8）ng／L、pcDNA3组（133．6±9．4）ng／L比较，pcDNA3-IL-7注射组（242．3±10．1）ng／L外周血IFN-γ明显增高；pcDNA3-IL-γ明显抑制肿瘤生长（P〈0．05）；流式细胞仪检测显示pcDNA3-IL-7显著促进CD4＋T细胞、CD8＋T细胞内IFN-γ的分泌量；常规病理显示pcDNA3-IL-7注射组肿瘤组织大量坏死，炎性细胞和大量淋巴细胞浸润。结论瘤体内直接注射pcDNA3-IL-7明显抑制小鼠乳腺肿瘤生长，显著促进IFN-γ分泌，增强了小鼠机体抗乳腺肿瘤的免疫效应。
- 汪付兵陈志芬陈大平柳琨阳芳冯茂辉谢伟朱尤庆夏冰
- 关键词：白细胞介素-7干扰素-Γ抗肿瘤免疫
- 突变型p53蛋白DNA适配子的体外筛选与鉴定被引量：7
- 2011年
- 目的 建立体外获得突变型p53蛋白DNA适配子（aptamers）的方法,为该适配子在肿瘤早期诊断及靶向治疗运用中奠定基础.方法 构建长度为75 nt的初始随机单链DNA库,其两端为固定序列,中间为35个随机序列,库容量为1 × 1017～1×1018,以溴化氰活化的琼脂糖小球为筛选介质,运用指数富集的配体系统进化技术（SELEX技术）经逐轮筛选获得突变型p53蛋白的DNA适配子.将适配子库克隆、测序,采用DNAMAN软件对其结构进行分析,通过生物素-亲和素-辣根过氧化物酶显色系统测定适配子与突变型p53蛋白的亲和力.结果 经逐轮筛选,所得适配子富集库与突变型p53蛋白的亲和力逐步提高,A450值从0.1357增加到了0.6818,其亲和力至第8轮筛选达最高水平后进入平台期.克隆第8轮筛选适配子库,测定23个克隆子的序列,其中20个克隆子的序列与预期相符.DNAMAN5.29软件分析表明,20个克隆子的一级序列同源率为76.51%,无共同保守序列,适配子的二级结构则以茎环、凸环结构为主.结论 经8轮筛选获得的DNA适配子与突变型p53蛋白的体外结合具有高度的特异性及亲和力,其克隆子无共同保守序列,适配子的高亲和性与其形成的茎环、凸环等空间结构密切相关.
- 段丽冯茂辉阳芳谢伟彭艳吴红艳柳琨方喜平汪付兵
- 关键词：适配子P53蛋白SELEX技术
