山西省自然科学基金(2009011059-3)
- 作品数：3 被引量：11H指数：2
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- 大肠杆菌植酸酶在毕赤酵母中的表达与纯化被引量：7
- 2012年
- 为探讨植酸酶的结构与功能,研究了来源于大肠杆菌的植酸酶基因在酵母中的表达和纯化条件.将含有大肠杆菌植酸酶基因的毕赤酵母工程菌在不同甲醇浓度和不同诱导时间下培养,检测植酸酶的表达情况.结果表明:诱导培养基中一次性添加2.5%的甲醇,诱导96 h后,蛋白浓度达到1.36 mg mL-1,酶活力达到6 530 U mL-1;将在毕赤酵母中表达的植酸酶粗酶液经过硫酸铵盐析、Resource S柱和Superdex-75三步纯化,得到单峰纯的蛋白,比活力为137 280 Umg-1.用圆二色谱分析纯化后的蛋白在pH 5.0和8.0环境中的结构变化,结果显示pH 8.0环境使大肠杆菌植酸酶发生了变性.
- 张耀华姚明泽卢文亮梁爱华
- 关键词：毕赤酵母圆二色谱
- 过表达EoRPL11下调HEK293T细胞中蛋白质的翻译活性(英文)被引量：3
- 2010年
- 核糖体蛋白L11(RPL11)是真核生物核糖体的重要组成部分.RPL11参与核糖体的生物发生及其它的一些细胞调控过程.本研究在人细胞中研究了游仆虫RPL11(EoRPL11)的亚细胞定位及对蛋白质合成的调控功能.通过激光共聚焦显微镜观察发现,融合绿色荧光蛋白的EoRPL11分布于细胞核中,并集中于核仁上;将EoRPL11和海肾荧光素酶报告基因共转染HEK293T细胞后发现,细胞内海肾荧光素酶的酶活性明显下降,并呈现一种剂量依赖性关系;实时定量PCR分析则表明,海肾荧光素酶的mRNA水平并没有明显改变;同时,细胞的增殖也受到了一定的抑制.以上结果表明,EoRPL11是核蛋白,并且其过表达可能在翻译水平上抑制细胞内总蛋白质的合成.
- 张国强张志云柴宝峰王伟梁爱华
- 关键词：八肋游仆虫下调C-MYC
- 核糖体蛋白L11与肿瘤抑制被引量：2
- 2009年
- 核糖体蛋白L11(ribosomal proteinL11,RPL11)是核糖体60S大亚基的重要组成部分,对于核糖体的组装和合成是必须的。除此之外,研究发现真核生物中的RPL11还参与细胞周期阻滞、细胞凋亡及肿瘤发生等过程的调控。与抑癌蛋白ARF功能相类似,它能够与癌蛋白HDM2相互作用,激活p53抑癌蛋白的活性;与癌蛋白c-Myc相互作用,负反馈调控c-Myc的转录活性。推测RPL11本身可能具有肿瘤抑制功能。本文就RPL11参与调控HDM2-p53和c-Myc这两个与肿瘤密切相关的信号通路的研究进展进行综述。
- 张国强张志云梁爱华
- 关键词：核糖体蛋白L11P53负反馈调节肿瘤抑制
