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国家自然科学基金(30571650)

作品数：9 被引量：16H指数：3
相关作者：朱乃硕钟江陈钰郭业磊黄建胜更多>>
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文献类型

  • 9篇中文期刊文章

领域

  • 6篇生物学
  • 3篇医药卫生

主题

  • 4篇细胞
  • 3篇蛋白
  • 3篇抗原
  • 2篇乙肝
  • 2篇肿瘤
  • 2篇超抗原
  • 2篇超抗原SEB
  • 1篇蛋白表达
  • 1篇蛋白相互作用
  • 1篇亚群
  • 1篇药物
  • 1篇乙肝表面抗原
  • 1篇乙肝病毒
  • 1篇抑制肿瘤
  • 1篇抑制肿瘤细胞
  • 1篇英文
  • 1篇荧光
  • 1篇荧光蛋白
  • 1篇质粒
  • 1篇体内外

机构

  • 9篇复旦大学
  • 2篇中国人民解放...

作者

  • 7篇朱乃硕
  • 2篇郭业磊
  • 2篇陈钰
  • 2篇黄建胜
  • 2篇朱嗣博
  • 2篇钟江
  • 1篇陈中才
  • 1篇赵瑞华
  • 1篇高学鹏
  • 1篇李鼎
  • 1篇顾晨曦
  • 1篇杨艳
  • 1篇崔嘉真
  • 1篇王健

传媒

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年份

  • 1篇2019
  • 1篇2018
  • 2篇2015
  • 1篇2014
  • 1篇2011
  • 2篇2009
  • 1篇2008
共 9 条 记 录，以下是 1-9
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排序方式：
乙肝病毒X与Tab1蛋白相互作用的体内外验证
2018年
目的：借助实验室前期质谱分析技术和数据分析研究基础,采用免疫共沉淀（Co-IP）和蛋白质沉降实验（GST pull-down）验证HBV X蛋白与Tab1蛋白的相互作用,为进一步研究HBx在HBV慢性感染致癌机制中的作用提供一定的实验依据。方法：成功构建pGEX-2TK-GST-HBx质粒,对GST-HBx融合蛋白进行诱导表达,与GST-beads结合孵育,构建pcDNA3.1/myc-His（-）BTab1,转染293T细胞使其表达,然后GST pull-down体外试验验证二者的相互作用;构建pcDNA3.1/myc-His（-）B-Tab1和pcDNA3.1-3×flag-HBx真核表达质粒,共转染293T和HepG2细胞使其表达,通过Co-IP实验验证抗Myc抗体可以将HBx从细胞裂解液中沉淀下来,证实了它们在两种细胞系中存在相互作用。结果：显示了HBx和Tab1在体内外条件下能够发生相互作用,为进一步明确HBV X蛋白功能及作用机制奠定基础。
于丽丽胡博李雪朱乃硕
关键词：HBVX蛋白相互作用
超抗原SEB诱导的免疫耐受与细胞因子无关被引量：4
2009年
目的研究超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素B(staphylococcal enterotoxin B,SEB)诱导的耐受效应和耐受调节机制。方法收集SEB活化10天的细胞,充分洗涤后做为效应细胞,分别与刀豆蛋白(ConA)、脂多糖(LPS)和白介素-2(IL-2)共同培养,用MTT方法测定细胞的耐受性应答反应。正常淋巴细胞在与ConA、LPS、IL-2共同培养的同时添加效应细胞,用MTT方法测定效应细胞的抑制性应答反应功能。流式细胞技术解析耐受性效应细胞类型。结果效应细胞对ConA、LPS和IL-2的应答反应能力明显降低(P<0.01,n=3),但保持对ConA的应答反应能力。效应细胞抑制正常淋巴细胞与ConA、LPS和IL-2的应答反应(P<0.01,n=3),尤其抑制ConA和IL-2诱导的细胞增殖。SEB活化的效应细胞中CD8+NK1.1+、TcRVβ8+NK1.1+和CD4+NK1.1+NKT细胞以及TcRVβ8+T、CD8+T细胞数量明显增加(P<0.01和P<0.05,n=4)。结论超抗原SEB诱导的耐受性应答反应是效应细胞的直接作用,与细胞因子无关;这些效应细胞能抑制T淋巴细胞增殖,并保存识别ConA的受体功能。
陈钰郭业磊钟江陈中才
关键词：超抗原SEB免疫耐受细胞因子NKT细胞
一个新的人Rb26基因cDNA的克隆、表达及其增强细胞吞噬功能研究(英文)被引量：2
2008年
RabGTPase家族成员基因及其调节囊泡膜运输途径功能已有许多报道,但Rab26蛋白分子的结构和功能仍不清晰.通过生物信息学分析,并在人脑cDNA文库中克隆了一个新的Rab26基因全长cDNA序列,长1656bp,与已发表的基因序列相比,在48～50位插入了GCC,在956位T被C取代,而在1197位G被A取代.该序列包含一个771bp完整的开放阅读框(ORF),编码256个氨基酸残基的Rab26蛋白,分子质量为27.9ku(GenBank登录号No.AY646153),而非如以往报告的190个氨基酸残基.GFP荧光标记全长Rb26在哺乳动物细胞中表达显示,Rab26主要呈现在细胞膜状结构相联系的分布,发现该基因高表达能显著增强PE标记的红色异源蛋白质的吞噬.还应用逆转录-聚合酶链反应对多种人肿瘤细胞Rb26表达进行了研究,结果显示,Rab26在Acc2、SPC-A1,K562以及HeLa等肿瘤细胞株呈高表达,而在SMMOL/LC-7721、HepG2、Caco2等肝和肠上皮细胞株中则不表达,值得进一步深入研究.
王健朱嗣博李鼎朱乃硕
关键词：内吞作用
STAT3诱捕寡核苷酸经STAT3/IRF-1通路抑制肿瘤细胞PD-L1的表达被引量：5
2019年
目的:探究STAT3诱捕寡核苷酸(STAT3 Decoy-ON)对免疫抑制分子PD-L1的调控及其作用机制。方法:以前列腺癌细胞DU145为模型,通过流式细胞仪与激光扫描共聚焦显微镜分析STAT3 Decoy-ON对DU145的亲和性;通过qRT-PCR与Western blot分析STAT3 Decoy-ON对STAT3与IRF-1的表达影响;通过流式细胞仪及上述方法分析STAT3 Decoy-ON对PD-L1的表达调控;进一步构建PD-L1启动子上STAT3、IRF-1转录因子识别位点的突变或缺失荧光素酶质粒,探究STAT3与IRF-1对PD-L1表达的调控。结果:发现STAT3 Decoy-ON与DU145细胞具有高度亲和性,且显著下调DU145细胞STAT3与PD-L1的表达;同时STAT3与IRF-1识别位点的缺失或突变皆可显著降低PD-L1启动子的活性;STAT3 Decoy-ON通过下调细胞内IRF-1的表达发挥对PD-L1的抑制作用。结论:STAT3 Decoy-ON介导STAT3/IRF-1的信号通路抑制前列腺癌细胞(DU145)PD-L1的表达。
依含黄建胜李雪朱乃硕
关键词：PD-L1抗肿瘤药物
HAC1基因过表达对重组人CTLA-4蛋白在毕赤酵母中分泌表达的影响
2015年
重组人细胞毒性T细胞相关抗原(Cytotoxic T Lymphocyte Associated Antigen 4,CTLA-4)是一类重要的基因工程药物,其在毕赤酵母中表达水平偏低使其一直无法广泛应用于临床治疗.而影响毕赤酵母中的外源蛋白分泌表达的因素,主要为内质网中的折叠速率以及不可折叠蛋白积累造成的胞内胁迫压力.本文通过在毕赤酵母细胞中过表达HAC1基因对毕赤酵母细胞中未折叠蛋白反应(Unfolded Protein Response,UPR)的信号通路进行调控,从而改善了CTLA-4蛋白的表达水平.摇瓶中改造菌株M-HAC1发酵上清液中该蛋白的分泌表达量是原始菌株表达量的2.55倍.
何秋焱杨艳朱乃硕
关键词：巴斯德毕赤酵母蛋白表达
基于ChIP-Seq进行肿瘤/睾丸抗原XAGE-1b的DNA结合位点鉴定被引量：1
2014年
XAGE-1b(X antigen family member 1B)属于XAGE亚家族,是一种肿瘤-睾丸抗原(cancer/testis antigen,CTA),表达于正常人睾丸组织和多种类型的肿瘤细胞中.本实验室前期研究发现,该基因在涎腺腺样囊性癌高转移细胞系中呈高表达.为了进一步研究XAGE-1b下游调控基因,本实验采用ChIP-Seq技术筛查XAGE-1b蛋白质可能存在的DNA结合片段.结果发现,XAGE-1b下游调控基因富集于细胞分裂(cell division,P-Value=7.95e-04)、细胞周期调控(cell cycle,P-Value=5.532e-03)、及癌症相关基因(GESA/MSigDB module_11,P-Value=2.010e-06)中.同时发现,XAGE-1b下游调控多个基因的表达产物(NCBI/interactions 22827,P-Value=4.678e-06)能与原癌基因c-Myc的启动子抑制蛋白PUF60发生蛋白质相互作用,并通过qPCR进行了验证.这些研究对阐明XAGE-1b在肿瘤细胞的增殖和转移中的作用有重要意义.
高学鹏朱嗣博赵瑞华朱乃硕
关键词：肿瘤睾丸抗原C-MYC
产KPC酶超耐药阿斯肠杆菌EaH7的发现及其耐药伴生质粒的遗传特征
2015年
目的分析1株亚胺培南抗性阿斯肠杆菌(Enterobacter asburiae)的耐药机制及其遗传特征。方法Vitek-2 Compact系统初步鉴定菌株并测定抗生素最小抑菌浓度,对16s rRNA基因测序以确定菌株;PCR法扩增β-内酰胺类、喹诺酮类和氨基糖苷类等17种耐药基因并测序确认;以CaCl2诱导的化学法转化质粒;构建伴生质粒DNA文库并测序,以Glimmer 3.02和BLASTP软件注释并预测伴生质粒序列的编码基因功能;采用接合试验验证伴生质粒对耐药性质粒转移的作用。结果该菌株为阿斯肠杆菌,对亚胺培南等15种β-内酰胺及氨基糖苷类抗生素耐药,仅对左氧氟沙星和环丙沙星敏感;该菌株同时含有2种质粒,其中耐药性质粒pEa-1携带耐药基因blaKPC-2、blaCTX-M-15和blaTEM-1,而伴生质粒pEa-2则携带4种转移蛋白基因mobA、mobB、mobC和mobD;pEa-2可促进耐药质粒pEa-1接合转移。结论在国内首次报道了产KPC-2酶的阿斯肠杆菌,该菌携带的质粒pEa-2具有促进耐药性质粒pEa-1接合转移的作用。
崔嘉真黄建胜朱乃硕
关键词：耐药质粒
乙肝表面抗原结合蛋白的红色荧光示踪分子的表达纯化和功能鉴定被引量：1
2011年
乙肝表面抗原结合蛋白（HBsAg binding protein，SBP）是本实验室发现的一种可以与乙肝表面抗原HBsAg特异性结合的人源蛋白，已被证实具有增强乙肝疫苗免疫效果的作用。DsRed—Monomer是来源于DsRed的人工突变体，作为蛋白表达的报告基因在真核细胞中使用。为探究SBP的作用机理，通过基因工程方法将该基因与DsRed—Monomer基因连接，克隆到原核表达载体，表达带有红色荧光的融合蛋白，该蛋白通过荧光激发检测显示荧光强度与蛋白量成正比例关系。同时该融合蛋白经过ELlSA方法检测可以与HBsAg特异性结合，使用常规方法和荧光量检测两种方法测定得到的该蛋白与HBsAg的亲和常数相似。首次证实了DsRed—Monomer在原核表达中可作为报告基因进行研究和使用，建立了利用荧光量检测蛋白的方法，与常规ELISA方法比较证明，大大缩短了试验时间和步骤，可以更方便的应用于分子示踪及其功能研究。
顾晨曦朱乃硕
关键词：红色荧光蛋白乙肝表面抗原
超抗原SEB活化的NKT细胞亚群形态和分化途径的研究被引量：4
2009年
目的:以NKT细胞形态和分化途径为焦点,研究超抗原SEB活化的NKT细胞亚群的特征。方法:C57BL/J小鼠脾细胞分别经SEB或者ConA诱导,收集体外扩增10d和5d的淋巴细胞以及获取正常黏附性巨噬细胞。用荧光抗体染色,流式细胞仪测定淋巴细胞和大淋巴细胞群表面CD69的表达、NKT细胞亚群百分数和不同NKT细胞亚群的分化途径。倒置显微镜400倍下比较大淋巴细胞的形态。结果:SEB活化的淋巴细胞和大淋巴细胞表面CD69分子表达由正常值的0.11%分别提高到55.00%和68.95%。大细胞群中CD8+和TCRVB8+NKT细胞亚群的百分数由原始的0.36%和0.81%分别提高到30.29%和31.48%。这些细胞位于流式细胞图的上部,是大体积细胞群。显微镜下显示SEB活化的大淋巴细胞体积不仅大于ConA活化的T淋巴细胞,而且比正常巨噬细胞大5倍以上,是非黏附性细胞。胞内质粒松散、胞质与核之比>1。SEB活化的CD8+和TCRVβ8+NKT细胞亚群均由T细胞直接分化而来。结论:SEB活化10d的NKT细胞亚群主要是CD8+NK1.1+和TCRVβ8+NK1.1+的NKT细胞。这些细胞是大体积淋巴细胞,应属于T细胞的亚群。
陈钰郭业磊钟江
关键词：超抗原细胞形态细胞分化
全选 清除 导出
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