辽宁省教育厅高等学校科学研究项目(05L442)
- 作品数：12 被引量：39H指数：4
- 相关作者：邢雪松吕威力张国斌臧晋郭和更多>>
- 相关机构：沈阳医学院更多>>
- 发文基金：辽宁省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- bFGF对大鼠缺血性脑损伤CaMKⅡmRNA表达影响被引量：5
- 2008年
- 目的研究大鼠脑缺血再灌注后Ca2+/钙调蛋白依赖的蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)mRNA的表达,探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对脑组织缺血再灌注神经元CaMKⅡmRNA的调节作用及机制。方法应用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,大脑中动脉阻塞1 h再灌注损伤24 h,采用TUNEL法、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测海马及皮质内神经元凋亡和CaMKⅡmRNA的表达。结果大鼠缺血再灌注海马及顶叶皮质内神经元凋亡数增加,而CaMKⅡmRNA表达较假手术组减少,注射bFGF后神经元凋亡数减少,CaMKⅡmRNA表达明显高于缺血再灌注组。结论bFGF抑制缺血神经元凋亡,参与CaMKⅡmRNA的调节,对缺血神经元有保护作用。
- 邢雪松吕威力
- 关键词：脑缺血BFGF海马
- 碱性成纤维细胞生长因子调节脑缺血再灌注大鼠海马及顶叶皮质神经元β-Catenin的表达被引量：1
- 2008年
- 目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对脑组织缺血再灌注神经元β-Catenin的调节作用及机制。方法:应用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,大脑中动脉阻塞1h再灌注损伤24h,采用TUNEL法、免疫组织化学SABC法及显微图像分析检测海马及顶叶皮质内神经元凋亡和β-Catenin的表达。结果:大鼠缺血再灌注海马及顶叶皮质内神经元凋亡数增加而β-Catenin免疫阳性反应产物较正常组增加,注射bFGF后神经元凋亡数减少,β-Catenin免疫阳性反应产物明显多于缺血再灌注组。结论:bFGF抑制缺血神经元凋亡,参与β-Catenin的调节,对缺血神经元有保护作用。
- 邢雪松吕威力郭丽
- 关键词：脑缺血碱性成纤维细胞生长因子海马顶叶皮质
- 大鼠气管干细胞增殖分化过程中Wnt／β-Catenin信号分子的表达
- 2008年
- 背景:干细胞和细胞外基质的互相作用需要Wnt信号途径的参与。在气管损伤后的修复过程中,不同的分子信号级联控制干细胞的迁移、增生与分化,Wnt信号途径是否参与其中?目的:检测并验证Wnt/β-Catenin信号途径在气管干细胞增殖分化中的作用。设计、时间及地点:单一样本观察实验,于2004-05/2006-07在沈阳医学院完成。材料:2周龄Wistar大鼠,雌雄不拘,作为离体气管来源。方法:实验组以含氟尿嘧啶的HamsF12培养液作用离体大鼠气管,作用12h后换成单纯Hams F12液,对照组只用Hams F12液培养。主要观察指标:去除氟尿嘧啶后于0,6,12,24,48h采用免疫组织化学SP染色及蛋白印迹法检测气管上皮中Wnt-1和β-Catenin的表达。结果:氟尿嘧啶作用12h后,大鼠气管上皮细胞绝大部分脱落,暴露出基底膜,仅剩余少数较分散的间隔分布的近于裸核的细胞,呈钉状位于基底膜上。氟尿嘧啶去除6h后,气管基底膜上可见少量扁平样细胞。24h后基底膜上细胞数目增加,并逐渐分化呈立方状,连接成片。48h后气管上皮中出现假复层柱状上皮,并可见纤毛细胞。免疫组织化学及蛋白定量结果显示:正常及损伤后0h气管上皮极少量表达Wnt-1及β-Catenin,损伤后6hWnt-1及β-Catenin表达最强,其后随时间延长,表达逐渐减少。结论:Wnt-1时间依赖性表达与气管上皮损伤修复进程相吻合,胞浆中游离状态的β-Catenin表达可能产生了促进气管干细胞的增殖并抑制其分化的作用。
- 吕威力邢雪松
- 关键词：WNT-1气管干细胞增殖分化
- 碱性成纤维细胞生长因子对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马组织中Notch1表达的影响被引量：1
- 2010年
- 目的：检测Notch1在大鼠局灶性脑缺血再灌注海马组织的表达及碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的干预作用.探讨bFGF对局灶性脑缺血再灌注海马组织神经再生影响可能的分子调控机制.方法：采用大脑中动脉栓塞制作大鼠脑缺血再灌注模型.用免疫组织化学法和RT-PCR法检测海马组织Notch1的表达及bFGF的干预作用.结果：随着脑缺血再灌注,海马组织中Notch1 mRNA反应产物在第3天较假手术组增多,随缺血再灌注时间的延长逐渐增多,第7天表达最强,以后表达逐渐减少.Notch1 阳性细胞的变化趋势与Notch1 mRNA相似.注射bFGF后Notch1 的表达增加.结论：bFGF促进缺血再灌注后海马组织Notch1的表达,提示bFGF促进神经干细胞增殖作用可能由Notch信号通路介导.
- 陈双凤吕威力邢雪松
- 关键词：碱性成纤维细胞生长因子NOTCH1局灶性脑缺血海马
- Wnt-1在大鼠脑缺血再灌注海马组织内源性神经干细胞早期增殖分化中的作用被引量：16
- 2007年
- 目的:检测wnt-1在大鼠脑缺血再灌注海马组织神经干细胞早期增殖分化中的表达及其变化,探讨影响神经干细胞早期增殖分化的分子调控机制。方法:实验于2005-08/2006-08在沈阳医学院完成。选择健康雄性Wistar大鼠30只,随机分为正常组,缺血再灌注3,7,14,21d组,每组6只。缺血再灌注各组采用颈动脉负压分流法制作大鼠脑缺血再灌注模型。正常组不作任何手术处理。用免疫组织化学SP法及显微图像分析检测海马神经干细胞中BrdU,Wnt-1的表达。结果:30只大鼠均进入结果分析。①缺血再灌注各组大鼠海马均可见BrdU阳性细胞。阳性细胞呈棕黄色,形态多样,呈圆形、椭圆形或梭形。脑缺血再灌注第3天缺血海马神经元BrdU阳性细胞明显增多,BrdU阳性细胞百分率为(56.78±2.37)%,第7天达高峰,BrdU阳性细胞百分率为(69.99±6.01)%,第14,21天逐渐减少,分别为(49.35±5.57)%,(38.33±7.89)%。缺血再灌注各组与正常组[(4.89±5.60)%]比较,差异有显著性意义(P<0.05)。②缺血再灌注各组大鼠均有wnt-1表达,海马颗粒层细胞质呈棕黄色颗粒,不着色为阴性。脑缺血再灌注第3天Wnt-1反应产物有所增多,海马组织Wnt-1表达的平均灰度值为103.67±5.49。第7天表达最强,平均灰度值为75.34±6.75,以后表达逐渐减少。缺血再灌注各组与正常组(132.47±2.96)比较,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:Wnt-1时间依赖性表达与神经干细胞增殖分化进程相吻合,说明其在神经干细胞早期增殖分化中起重要调控作用。
- 邢雪松吕威力
- 关键词：干细胞细胞分化
- TNP-470和碱性成纤维细胞生长因子在血管内皮细胞增生中的相互作用被引量：4
- 2007年
- 目的:检测TNP-470对内皮细胞增生的影响及其与碱性成纤维细胞生长因子的相互作用,并探讨其可能机制。方法:实验于2005-05/2006-10在沈阳医学院完成。采用本室改进的Jaffe法进行人脐静脉内皮细胞原代培养,细胞生长达亚融合状态后,换成无血清培养液使其停止生长。实验分组:依据施加的实验因素不同,将培养的人脐静脉内皮细胞分为4组:对照组(DMEM无血清)、TNP-470组(10-4g/L)、碱性成纤维细胞生长因子组(500μg/L)、碱性成纤维细胞生长因子+TNP-470组。实验评估:采用四甲基偶氮唑盐比色分析测定各组内皮细胞吸光度,流式细胞计数仪检测内皮细胞周期各时相相对细胞数,免疫组织化学SABC法检测内皮细胞中核因子Kappa B p65和ki-67蛋白的表达阳性率。结果:①人脐静脉内皮细胞的生长活性:TNP-470显著抑制内皮细胞增生;碱性成纤维细胞生长因子显著刺激内皮细胞增生,与对照组相比,差异显著(0.119±0.002,0.168±0.004,0.138±0.003,P<0.05)。②内皮细胞周期各时相相对细胞数:TNP-470阻滞内皮细胞进入增殖期,使G0/G1期内皮细胞比例上升,S期+G2/M期比例下降;而碱性成纤维细胞生长因子具有很强的促内皮细胞分裂增殖活性,使G0/G1期内皮细胞比例减少,S期+G2/M期比例增加,与对照组相比,差异显著(P<0.05)。③各组人脐静脉内皮细胞中NF-κB p65蛋白及Ki-67蛋白的表达阳性率:对照组人脐静脉内皮细胞中NF-κB p65蛋白呈棕褐色染色、ki-67极少表达;TNP-470可显著降低碱性成纤维细胞生长因子诱导的内皮细胞核内NF-κB p65蛋白及Ki-67蛋白的表达,与碱性成纤维细胞生长因子组比较,差异显著[NF-κB p65蛋白:(16.200±1.344)%,(68.400±1.204)%;Ki-67蛋白:(1.500±0.813),(65.700±1.113)%,P<0.05]。结论:TNP-470通过细胞周期阻滞作用抑制内皮细胞分裂与增殖;TNP-470抑制成纤维细胞生长因子诱导的内皮细胞增生与其影响内皮细胞中NF-κ
- 吕威力邢雪松
- 关键词：TNP-470碱性成纤维细胞生长因子内皮细胞创伤修复
- bFGF对局部性脑缺血再灌注大鼠海马及皮质神经元CREB表达的影响被引量：3
- 2009年
- 目的:研究大鼠脑缺血再灌注后cAMP反应元件结合蛋白(CREB)表达的变化,探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对脑组织缺血再灌注神经元CREB的调节作用及机制.方法:应用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,大脑中动脉阻塞2h再灌注损伤24h,采用TUNEL法、免疫组化检测海马及皮质内神经元凋亡和CREB的表达.结果:大鼠缺血再灌注海马及顶叶皮质内神经元凋亡数增加而CREB表达较假手术组减少,注射bFGF后神经元凋亡数减少,CREB表达明显高于缺血再灌注组.结论:bFGF抑制缺血神经元凋亡,参与CREB的调节,对缺血神经元有保护作用.
- 曾朝涛郭和邢雪松吕威力
- 关键词：脑缺血成纤维细胞生长因子2CREB海马
- bFGF对脑缺血大鼠海马及顶叶皮质c-Myc蛋白影响被引量：1
- 2010年
- 目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对脑组织缺血再灌注神经元c-Myc蛋白表达影响及机制。方法 30只大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、bFGF组,每组10只;应用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,大脑中动脉阻塞2 h再灌注损伤24 h,采用原位末端标记法(TUNEL)、免疫组织化学法检测海马及顶叶皮质内神经元凋亡和c-Myc蛋白表达。结果假手术组大鼠海马及顶叶皮质偶见凋亡细胞,神经元内少见c-Myc蛋白阳性细胞;缺血再灌注组海马及顶叶皮质神经元凋亡增加,顶叶皮质及海马神经元内c-Myc蛋白表达灰度值为(88.16±2.43),(86.72±1.23),bFGF组神经元凋亡减少,神经元内c-Myc蛋白表达灰度值为(97.61±1.78),(95.35±2.34)。结论 bFGF可减少缺血神经元凋亡,抑制脑缺血诱导的c-Myc蛋白的表达,对脑缺血再灌注海马及顶叶皮质神经元具有保护作用。
- 吕威力邢雪松张国斌
- 关键词：脑缺血C-MYC海马
- 降钙素基因相关肽和神经生长因子对脑缺血再灌注大鼠海马及顶叶皮质神经元凋亡及核因子-κB表达的调节被引量：4
- 2007年
- 目的:探讨降钙素基因相关肽(CGRP)和神经生长因子(NGF)对脑组织缺血再灌注的保护作用及机制。方法:采用颈动脉负压分流法制作大鼠脑缺血再灌注模型,采用TUNEL法、免疫组织化学SABC法及显微图像分析检测海马及皮质内神经元凋亡和核因子κB(NF-κB)的表达。结果:大鼠缺血再灌注海马及顶叶皮质内神经元凋亡数增加而NF-κB免疫阳性反应产物较正常组减少,注射CGRP或NGF后神经元凋亡数减少,NF-κB免疫阳性反应产物明显高于缺血再灌注组,两者联合应用效果更加显著。结论:CGRP和NGF抑制缺血神经元凋亡,参与NF-κB的调节,两者对缺血神经元有协同修复作用。
- 邢雪松吕威力张国斌
- 关键词：降钙素基因相关肽神经生长因子核因子ΚB神经元
- CGRP和NGF对全脑缺血再灌注大鼠脑组织PKB表达的调节作用被引量：1
- 2007年
- 目的:研究大鼠脑缺血再灌注后蛋白激酶B(protein kinaseB,PKB)的表达,探讨降钙素基因相关肽(CGRP)和神经生长因子(NGF)对脑组织缺血再灌注的保护作用及机制。方法:根据Nagasawa线栓法制作大鼠右侧大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,采用电镜、免疫组织化学SABC法及显微图像分析检测海马及皮质内PKB的表达。结果:大鼠缺血再灌注海马及顶叶皮质内PKB反应产物较正常组增多(P<0.05),而注射CGRP或NGF后阳性产物明显高于缺血再灌注组(P<0.01),二者联合应用效果更加显著(P<0.05)。结论:CGRP及NGF参与缺血神经元PKB的调节,二者对缺血神经元有协同修复作用。
- 邢雪松吕威力臧晋
- 关键词：蛋白激酶B神经元缺血
