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锌金属蛋白酶家族的结构与催化机理被引量：6: 2013年; 锌金属蛋白酶是一类分布广泛,种类繁多的水解酶家族,是近年来人们研究的热点.一般来说,HEXXH保守序列一直都作为锌金属蛋白酶家族分类的依据.除此之外,不同种类的酶还有一些其它的序列特征.谷氨酸锌蛋白(gluzincin)在锌离子配体处共有2组保守区域;甲硫氨酸锌蛋白(metzincin)则拥有1个延长的保守序列HEBXHXBGBXH,里面包含了第3个His配体.大量的金属蛋白酶晶体结构被解析出来,从中可以发现该类酶的活性中心都包含有1个锌离子.锌金属蛋白酶的催化机理通常认为是锌离子与1个水分子结合活化而成.但是,最近的发现证实了并不是所有的锌金属蛋白酶催化都需要水分子参与活化.在本文中,综述了这些已发表的锌金属蛋白酶家族的分类、结构特征、底物特异性识别和催化机理.; 郑媛盛军纪晓峰郑兰红孙谧

海洋低温脂肪酶MLP的同源模建及分子动力学模拟被引量：1: 2013年; 海洋低温脂肪酶(marine low-temperature lipase,MLP,登录号:ADM47601)是一株海洋细菌来源的新型脂肪酶,其具有耐碱性pH的优点,在生物能源、食品加工等行业具有良好的应用前景。作者从MLP的氨基酸序列入手,利用同源模建方法构建其三级结构,并通过Ramachandran图和Profile_3D图对模型的可靠性进行了验证。同时,通过"界面激活"实验和分子动力学模拟,对覆盖在活性位点区的"盖子域"进行了预测和分析。该研究结果将为今后更高性能突变株的获得及该酶空间折叠方式的研究等提供理论指导。; 纪晓峰盛军郑媛郝建华孙谧; 关键词：同源模建分子动力学模拟

扇贝多肽脂质体制备工艺的优化与表征被引量：2: 2013年; 以扇贝多肽PCF作为研究对象，制备脂质体制剂，用扇贝多肽在脂质体中的包封率作为衡量制备工艺的指标。在单因素实验基础上，利用中心复合设计方法和响应面分析法，研究三个变量对包封率影响的协同作用。在pH梯度为4-7条件下，确定扇贝多肽脂质体的最佳制备工艺为卵磷脂为200mg，胆固醇加量为56mg，吐温80加量为68mg，PCF添加量为2．15mg／mL，在此条件下，脂质体包封率达到96．05％。对制备的脂质体的质量进行了评价，其粒径在200nm以下，带负电荷，稳定性较好。通过响应面优化得到的扇贝多肽脂质体包封率有了大幅提高，为开发应用奠定了基础。; 郑媛纪晓峰郑兰红盛军王海英孙谧; 关键词：扇贝多肽脂质体

低温蛋白酶MP发酵液离子交换树脂的脱色被引量：1: 2014年; 低温蛋白酶MP发酵液中的色素沉积影响了其在产品中的应用,该文研究了利用离子交换树脂对其进行脱色。实验结果表明,阴离子树脂D352既能有效地脱色,又能保持较高的蛋白酶酶活;D352树脂脱色的最适pH值为6-7,最适温度为30℃,最有效的流速为6 BV/mL;D352树脂在吸附色素的同时也能吸附发酵液中大量杂蛋白分子,蛋白脱除率为45.2%;D352树脂在连续使用6次之后仍具有较强的脱色能力。; 王芳徐甲坤刘均忠孙谧; 关键词：蛋白酶发酵液离子交换树脂脱色

产酯酶B1海洋枯草芽孢杆菌C5发酵条件优化被引量：4: 2012年; 为提高芽孢杆菌C5产酯酶B1的能力,采用响应面法对其发酵条件进行优化.首先通过单因素实验筛选氮源、碳源、接种量、起始发酵pH、装液量、发酵温度和转速这7个因素,当酶活达到最高值时,各单因素的值分别为氮源玉米浆30 mL/L,碳源麦芽糖35 g/L,接种量4%(φ),起始pH 7.0,装液量15 mL,培养温度36℃,转速在实验室现有条件下最高选择220 r/min;再通过Plackett-Burman(PB)设计法,评价了这7个因素对酯酶B1产量影响的大小,确定氮源玉米浆的浓度、发酵起始pH和发酵温度为酯酶产生的3个主要影响因素;利用中心组合设计(CCD)及SAS软件分析获得了主要因素的最优条件,即玉米浆浓度28.70 mL/L,起始发酵pH为7.10,发酵温度为35.8℃.预测最高酶活力为139.18U/mL,实验最终酶活达到138.40 U/mL,与原发酵条件相比提高了228.15%.其实验值与预测值基本相符,说明预测模型可应用于酯酶发酵条件的优化.; 包兴艳郝建华陈世建王芳王伟孙谧; 关键词：酯酶 PLACKETT-BURMAN 响应面法甲基对硫磷

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国际科技合作与交流专项项目(2011DFB30250)