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褪黑素诱导人骨肉瘤MG63细胞凋亡被引量：2: 2014年; 目的：观察褪黑素对人骨肉瘤细胞系MG63增殖和凋亡的影响及其对细胞周期和Fas基因表达的调控.方法：体外培养MG63细胞,CCK8法检测不同浓度褪黑素对MG63细胞增殖的影响,通过Hoechst 33258染色观察细胞凋亡的形态学变化,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期改变,实时荧光定量PCR及免疫印迹检测MG63细胞Fas基因表达情况.结果：CCK8法检测显示,褪黑素可抑制MG63细胞增殖,并具有时间和剂量依赖性;Hoechst 33258染色可见凋亡小体;流式细胞术检测显示褪黑素可使凋亡的MG63细胞明显增加,并使细胞周期阻滞在G2/M期;实时荧光定量PCR及免疫印迹分析显示经褪黑素作用后MG63细胞表达Fas蛋白明显增强.结论：褪黑素对MG63细胞的增殖有抑制作用,并诱导其发生凋亡,其机制可能与细胞周期阻滞在G2/M期及上调Fas蛋白表达有关.; 黄宇林晋周瑞祥林建华陈宣维; 关键词：褪黑素骨肉瘤实时荧光定量PCR 免疫印迹

Hp感染胃疾病与Treg细胞及褪黑素的关系被引量：2: 2012年; 幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)定植可引起胃黏膜炎症反应,是导致十二指肠溃疡和胃癌的主要危险因素之一。全球约一半人口感染Hp,我国Hp感染率更高达50%-80%,其中约10%-20%的感染者将发展为胃溃疡或胃癌。新近研究发现Hp感染患者机体中调节性T细胞(Regulatory T cell,Treg细胞)增多,后者能抑制机体对Hp的过度免疫应答和炎症反应,在介导免疫耐受形成和炎症慢性化过程中可能起重要作用,并可促进胃癌的发生和发展。褪黑素(Melatonin,MLT)对胸腺Treg细胞的产生有显著调控作用,并呈剂量依赖性。相关研究资料表明,MLT与Treg细胞、与Hp、与胃癌之间存在一定的功能联系。但目前国内外有关MLT与Hp感染所致胃疾病直接联系的研究较少,本文就Hp感染-Treg细胞-褪黑素之间的关系做一综述。; 宫喜周瑞祥; 关键词：TREG细胞 HP感染褪黑素胃疾病十二指肠溃疡调节性T细胞

褪黑素对小鼠MFC前胃癌细胞的survivin、caspase-3表达的影响被引量：3: 2011年; 目的探讨褪黑素(Melatonin,MLT)对小鼠前胃癌细胞(murine foregastric carcinoma,MFC)的生存素survivin和半胱天冬酶-3(cysteinyl aspartate-specific protease-3,caspase-3)表达的影响。方法使用不同浓度褪黑素处理培养的胃癌细胞,运用细胞免疫组化、实时荧光定量PCR、免疫印迹法、分光光度法等方法检测褪黑素在抑制小鼠MFC前胃癌细胞增殖过程中对细胞survivin、caspase-3的表达影响。结果与空白对照组相比,6mmol/L浓度褪黑素干预组的胃癌细胞survivin表达下调,caspase-3蛋白表达上调,并呈剂量依赖性。结论褪黑素能够降低胃癌细胞survivin的表达,进而激活caspase-3的活性,是褪黑素体外抑制肿瘤细胞增殖的作用机制之一。; 刘卉宫喜徐丽蒋继浩周瑞祥; 关键词：褪黑素胃癌细胞生存素半胱天冬酶-3

褪黑素对小鼠胃癌细胞褪黑素膜受体MT1、MT2表达的影响被引量：1: 2016年; 目的：探讨褪黑素对小鼠胃癌细胞褪黑素膜受体MT1、MT2表达的影响。方法：应用小鼠MFC前胃癌细胞建立荷胃癌小鼠模型，不同浓度褪黑素干预后，运用免疫组织化学、实时荧光定量PCR、免疫印迹定位定量检测MT1、MT2表达的变化。结果：移植瘤肿瘤细胞表达褪黑素膜受体MT1、MT2，褪黑素促进肿瘤组织膜受体MT1、MT2表达，并呈剂量依赖关系。结论：褪黑素上调褪黑素膜受体MT1、MT2的表达，说明褪黑素可能通过膜受体信号通路抑制胃癌生长。; 徐丽金清东刘卉王日雄周瑞祥; 关键词：褪黑素

褪黑素对小鼠MFC前胃癌细胞ERK、Akt及NF-κB表达的影响: 2014年; 目的探讨褪黑素对小鼠MFC前胃癌细胞ERK、Akt及NF-κB表达的影响。方法建立褪黑素在不同时间点干预胃癌细胞的体外模型,免疫印迹法观察褪黑素对小鼠MFC前胃癌细胞p-ERK/ERK、p-Akt/Akt,NF-κB表达的影响,CCK-8检测PI3K抑制剂Wortmannin对MFC细胞增殖的作用。结果①2mmol/L褪黑素作用24h、48h后明显下调MFC细胞ERK1/2、Akt的磷酸化,但对ERK1/2、Akt表达无影响;②Wortmannin明显抑制MFC细胞增殖活性,与MLT作用有明显协同效应;③褪黑素对NF-κB表达无影响。结论褪黑素可通过抑制ERK1/2、Akt的磷酸化从而抑制胃癌细胞增殖。; 徐丽宫喜刘卉宋军周瑞祥; 关键词：褪黑素 AKT NF-ΚB

褪黑素的抗胃癌效应及其引起的Bcl-2、Bax、p21和p53的表达变化被引量：11: 2014年; 为了探讨褪黑素体内抗小鼠胃癌作用及其机制,本研究应用小鼠胃癌(murine foregastric carcinoma,MFC)细胞建立荷胃癌小鼠模型,不同浓度褪黑素干预后,运用实时荧光定量RT-PCR、免疫印迹等方法检测Bcl-2,Bax,p21,p53的表达变化。结果显示:(1)褪黑素能够缩小荷胃癌小鼠的肿瘤体积,减轻肿瘤重量,达到抗胃癌作用;(2)褪黑素在抑制胃癌生长过程中下调肿瘤组织Bcl-2表达,上调Bax、p21和p53表达。以上结果表明,褪黑素可通过促进胃癌细胞凋亡从而实现体内抑制胃癌生长作用。; 徐丽金清东宫喜刘卉周瑞祥; 关键词：胃癌褪黑素 BAX P21 P53

MT2受体介导褪黑素对小鼠前胃癌细胞的抑制作用被引量：1: 2014年; 目的探讨褪黑素(MLT)通过褪黑素膜受体MT2抑制小鼠前胃癌(MFC)细胞增殖及其与丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)、磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)-Akt信号通路的关系。方法应用siRNA技术沉默MT2表达,观察褪黑素对小鼠前胃癌细胞的抑制作用及ERK1/2、Akt的磷酸化的影响。结果 1.siRNA介导的MT2沉默能明显拮抗褪黑素对胃癌细胞增殖的抑制作用;2.沉默MT2可部分阻断褪黑素抑制ERK1/2、Akt磷酸化的作用。结论褪黑素可通过MT2受体抑制ERK1/2、Akt的磷酸化从而抑制胃癌细胞增殖。; 徐丽金清东宫喜刘卉周瑞祥; 关键词：褪黑素 AKT ERK1 实时定量聚合酶链反应小鼠

褪黑素体内外对小鼠前胃癌细胞的增殖抑制与凋亡诱导作用被引量：6: 2011年; 目的探讨褪黑素(MLT)在体内外对小鼠前胃癌(MFC)细胞的增殖抑制与凋亡诱导作用。方法体内实验:建立荷胃癌小鼠模型,随机分为5组:A.正常对照组;B.荷瘤空白对照组:每日注射生理盐水100 mg/kg;C.小剂量褪黑素组:荷瘤成功后(接种第6天起)每日腹腔注射MLT 25 mg/kg;D.中剂量MLT组:每日腹腔注射MLT 50 mg/kg;E.大剂量MLT组:每日腹腔注射MLT 100 mg/kg。褪黑素连续注射1周后完整剥离小鼠瘤体并测量其重量体积。体外实验:建立不同浓度褪黑素对胃癌细胞干预模型,运用荧光双标染色,流式细胞术、CCK-8等方法检测褪黑素对小鼠前胃癌细胞增殖抑制和凋亡诱导作用。结果与荷瘤空白对照组相比,褪黑素体内明显下调瘤体的重量体积;与空白对照组相比,褪黑素体外明显抑制胃癌细胞增殖活性,细胞凋亡率增加,并使细胞周期阻滞在G2/M期,并呈剂量依赖性。结论褪黑素在体内外均能抑制小鼠前胃癌细胞的增殖活性,并呈时间-剂量依赖性,该作用与促细胞凋亡和细胞周期G2/M期阻滞有关。; 刘卉蒋继浩徐丽宫喜周瑞祥; 关键词：褪黑素增殖流式细胞术小鼠

褪黑素对小鼠CD4^+ T细胞增殖及Foxp3启动子活性的影响被引量：1: 2012年; 目的探讨褪黑素(melatonin,MLT)对小鼠CD4+T细胞增殖及Foxp3(Forkhead box P3)启动子活性的影响,进一步丰富神经内分泌免疫网络学说。方法免疫磁珠分选小鼠脾CD4+T细胞,CCK-8法检测褪黑素对其增殖活性的影响;构建、筛选及鉴定Foxp3核心和全长启动子重组载体,并且电转染入小鼠CD4+T细胞,加以不同淋巴细胞刺激因子和褪黑素干预,用双荧光素酶报告基因法检测Foxp3启动子的活性变化。结果与空白对照组相比,从10-5mol浓度的MLT开始对CD4+T细胞有毒性作用,并呈剂量依赖性。10-6mol MLT对CD4+T细胞的增殖活性无影响。3种淋巴细胞刺激因子(佛波酯PMA+离子霉素ionomycin;植物血凝素PHA;T细胞抗原受体TCR)刺激和(或)褪黑素干预虽然使小鼠Foxp3核心或全长启动子活性有所上调,但与空白对照差异无统计学意义(P>0.05)。结论不同浓度褪黑素对小鼠CD4+T细胞增殖活性产生不同影响;褪黑素未显著增强小鼠Foxp3启动子活性。; 刘卉徐丽王日雄张慧周瑞祥; 关键词：褪黑素 CD4+T细胞 FOXP3 启动子小鼠

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国家自然科学基金(30971541)

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