国家自然科学基金(30670066)
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
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- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- 提高光滑球拟酵母乙酰辅酶A水平促进α－酮戊二酸合成被引量：4
- 2008年
- 【目的】为了了解光滑球拟酵母中乙酰辅酶A含量对其碳代谢及其通量的影响。【方法】将来源于酿酒酵母中编码乙酰辅酶A合成酶ACS2基因过量表达于发酵法生产丙酮酸的生产菌株Torulopsis glabrata中,获得了一株乙酰辅酶A合成酶活性提高9.2倍(1.20U/mg protein)的重组菌T.glabrata ACS2-1。【结果】与出发菌株WSH-IP303相比,重组菌T.glabrata ACS2-1:(1)能以乙酸为唯一碳源在胞内积累0.94mmol/(L·g DCW)的乙酰辅酶A;(2)以葡萄糖为唯一碳源时胞内乙酰辅酶A浓度、α-酮戊二酸产量和Cα-KG/Cpyr是出发菌株WSH-IP303的3.22、2.05和2.52倍;(3)在葡萄糖培养基中添加4g/L乙酸,使乙酰辅酶A浓度、α-酮戊二酸产量和Cα-KG/Cpyr是出发菌株WSH-IP303的4.55、2.47和3.75倍,α-酮戊二酸浓度达到17.8g/L。【结论】这一结果表明,改变细胞内关键辅因子的浓度能使碳代谢流的流向与通量发生改变,从积累丙酮酸转向过量积累α-酮戊二酸。
- 梁楠王淼刘立明堵国成陈坚
- 关键词：光滑球拟酵母乙酰辅酶A
- 氨基酸强化Torulopsis glabrata发酵生产丙酮酸被引量：2
- 2008年
- 在维生素限量添加的条件下,研究了添加氨基酸对丙酮酸发酵的影响.在发酵初始添加0.8g/L谷氨酸、0.6g/L酪氨酸和0.2g/L甲硫氨酸使丙酮酸产量分别提高23.5%,16.4%和11.8%.动力学分析表明,添加以上3种原料提高丙酮酸生产性能的原因在于用于细胞生长的葡萄糖下降,显著提高了细胞对葡萄糖的产率系数(Yx/s)和丙酮酸对葡萄糖的产率系数(Yp/s).添加氨基酸导致胞内NADH/NAD+比下降,增加了胞内NAD+可用度,加强了糖酵解速度,从而提高了丙酮酸生产强度.
- 许庆龙许晓鹏刘立明史仲平堵国成陈坚
- 关键词：光滑球拟酵母氨基酸丙酮酸发酵
- 基于途径分析促进α-酮戊二酸过量积累的数学模型技术被引量：3
- 2008年
- 在详尽分析α-酮戊二酸(α-KG)合成途径的基础上,结合数学模型,对光滑球拟酵母(Torulopsis glabrata)CCTCC M202019过量合成α-KG的合成途径及其调控因素进行全面分析与优化.全因子实验表明,硫胺素(B1)和Ca-CO3是影响α-KG过量积累的关键因素.在此基础上,采用最速上升实验得到α-酮戊二酸积累的最大响应区域为B10.016mg/L、CaCO384g/L附近.采用中心组合设计及响应面分析确定最优培养基组分为:硫胺素(B1)0.02mg/L、生物素(Bio)0.05mg/L、CaCO382g/L和乙酸钠4g/L.在最优培养基中,α-KG产量达到26.8g/L,提高了34%.α-酮戊二酸发酵过程动力学分析表明,采用最优培养基使发酵延滞期缩短6h,菌体比生长速率和α-KG比产物生成速率分别提高了45.4%和8.64%.
- 孙丽平刘立明堵国成陈坚
- 关键词：光滑球拟酵母Α-酮戊二酸动力学
