国家自然科学基金(81270460)
- 作品数：9 被引量：18H指数：2
- 相关作者：徐珞孙向荣郭菲菲公衍玲栾晓更多>>
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- Orexin-A对肥胖模型大鼠杏仁核胃牵张敏感神经元放电活动及摄食的影响被引量：2
- 2018年
- 目的探讨食欲素A（orexin-A）对肥胖模型大鼠的基底内侧杏仁核（BMA）胃牵张敏感（GD）神经元放电活动及摄食量的影响及机制。方法选取健康雄性Wistar大鼠，高脂饮食诱导构建肥胖（DIO）和肥胖抵抗（DR）大鼠模型。采用细胞外记录神经元放电方法，观察orexin-A以及阿片受体拮抗剂纳洛酮对大鼠BMA GD神经元的影响；采用大鼠BMA置管药物微量注射术，观察orexin-A及纳洛酮对不同大鼠摄食的影响；应用RT-PCR和Elisa方法，检测大鼠BMA内orexin-1受体（OX-1R）及μ阿片受体的mRNA和蛋白含量的表达。结果BMA微量注射orexin-A后，正常大鼠GD敏感神经元放电频率显著增加[GD-E增幅：（78．3±6．9）％，GD-I增幅：（55．5±4．7）％，P〈0．01]，该效应可被OX-1R受体拮抗剂SB334867完全阻断，纳洛酮可部分阻断orexin-A的促放电效应。与正常大鼠相比，BMA注射orexin-A后DIO[GD-E增幅：（91．6±7．1）％，GD-I增幅：（67．9±8．1）％）]和DR[GD-E增幅：（87．9±6．8）％，GD-I增幅：（69．2±5．8）％]大鼠GD敏感神经元放电频率均显著增加（P〈0．05）。BMA注射orexin-A后可显著增加正常大鼠、DIO和DR大鼠的摄食量[分别是（2．38±0．34）g，（3．75±0．32）g，（4．01±0．38）g]，DR和DIO大鼠均显著高于正常大鼠（P〈0．05）。RT-PCR实验结果显示，DIO和DR大鼠OX-1R的mRNA（分别是5．85±0．45，6．03±0．42）高于正常大鼠，差异具有统计学意义（R〈0．05），DIO和DR大鼠μ阿片受体的mRNA（分别是（4．51±0．42），（8．31±0．41），高于正常大鼠（P〈0．05）。ELISA实验结果显示，DIO和DR大鼠OX-1R的蛋白含量[分别是（2．98±0．28）ng／μl，（3．05±0．31）ng／μl]高于正常大鼠[（1．53±0．31）ng／μl]（P〈0．05）；DR大鼠μ阿片受体蛋白含量[（4．21±0．35）ng／μl]高于DIO大鼠[（2．77±0．27）ng／μl]，且高于正常大�
- 王咪孙向荣郭菲菲栾晓徐珞
- 关键词：食欲素A摄食饮食诱导肥胖大鼠杏仁核
- 侧脑室注射nesfatin-1对大鼠饮水行为的影响
- 2014年
- 目的 观察nesfatin-1对大鼠饮水的影响,探讨Nesfatin-1对下丘脑调节水和电解质平衡的作用机制.方法 采用侧脑室埋管、注射药物和分子生物学等方法,观察内外源性Nesfatin-1对药物致渴、生理性致渴大鼠饮水的影响,并观察禁水对大鼠NUCB2/nesfatin-1基因表达的影响.结果 侧脑室注射外源性150、450 pmol nesfatin-1,大鼠0～ 120 min内各时间段的饮水量显著减少[150 pmol：（1.3±0.2）～（1.85±0.3） ml/100g;450 pmol：（0.8±0.4）～ （1.2±0.4） ml/100g vs NS：（2.5±0.3）～（3.1 ±0.2） ml/100g],且呈显著剂量依赖关系（P＜0.05～ 0.01）,但2～24 h饮水量无显著改变（P＞0.05）.侧脑室注射nesfatin-1,10 min后注射致渴剂血管紧张素Ⅱ,注射150 pmol nesfatin-1的大鼠在15～30 min饮水量显著减少[150 pmol：（2.17±0.6） ml/100g vs NS（3.62± 1.0） ml/100g,P＜0.05],注射450 pmol nesfatin-1大鼠在注药后120 min内各时间段的饮水量均显著减少[450 pmol（0.31±0.1）～（2.87±0.8） ml/100g vs NS（2.31±0.7）～（7.05±0.2） ml/100g],呈剂量依赖关系（P＜0.05～0.01）,但5～24 h饮水量无显著改变（P＞0.05）.皮下注射高渗盐水,大鼠饮水量急剧增多,侧脑室注射150或450 pmol nesfatin-1,大鼠60 min内各时间段的饮水量均显著减少[150pmo1（0.25±0.2）～（1.6±0.25） ml/100g;450 pmol（0.1±0.15）～（1.92±0.2） ml/100g vs NS（0.9±0.2）～（2.9±0.2） ml/100g,P＜0.05～0.01],但恢复供水后60～120 min或2～24 h的饮水量无显著差异（P＞0.05）.下丘脑PVN注射反义nesfatin-1 RNA,第2次注射后3h,侧脑室注射血管紧张素Ⅱ （50 pmol/2μl）,大鼠饮水量显著增加[反义nesfatin-1：（1.87±0.4）～ （2.77±0.6） ml/100g vs NS（0.72±0.1）～（1.17±0.4） ml/100g,P＜0.01],但大鼠体质量和摄食量差异无统计学意义（P＞0.05）.大鼠禁水18h,下丘脑内NUCB2基因表达显著降低[禁水组：（-7.2±1.1）％vs自由饮水组：（0.82±0.4）
- 林娜栾晓祝海逄明杰郭菲菲孙向荣公衍玲徐珞
- 关键词：NESFATIN-1
- 杏仁核外源性nesfatin-1对大鼠探究行为的影响及机制被引量：2
- 2015年
- 目的探讨中央杏仁核（CeA）微量注射nesfatin-1对大鼠探究行为的影响及机制。方法将50只大鼠随机分为5组：nesfatin-1低剂量（Lnesfatin-1）组、nesfatin-1高剂量（Hnesfatin-1）组、SHU9119组、SHU9119＋Lnesfatin-1组和对照组。采用CeA给药，观察大鼠在高架十字迷宫模型测试中探究行为的变化及焦虑状态下（10只大鼠）杏仁核nesfatin-1mRNA表达的改变。结果与对照组相比，Lnesfatin-1组和Hnesfatin—1组大鼠焦虑行为明显加强，表现为大鼠进入开放臂的次数显著降低（OE，t=4．16～2．87，P〈0．01），进人开放臂次数比例（OE％，t=2．39～4．39，P〈0．01～0．05）明显减少，在开放臂停留的时间比例（OT％，t=5．43～20．55，P〈0．01）明显下降，且呈量效依赖关系；与对照组相比，Lnesfatin-1组和Hnesfatin-1组大鼠焦虑程度显著增强，表现为大鼠向下探究次数明显减少（HD，t=6．97～16．73，P〈0．01），封闭臂后腿直立次数（RE，t=6．60～13．25，P〈0．01）明显增加，且呈量效依赖关系。如预先给予黑皮质素受体拮抗剂SHU9119可部分消除nesfatin-1的促焦虑作用（t=2．11～3．08，P〈0．01-0．05）。Real—timePCR结果显示，焦虑模型组大鼠nesfatin-1mRNA表达显著升高（t=3．40—5．58，P〈0．05）。结论杏仁核nesfatin-1可增加大鼠焦虑和恐惧感，该作用可能与黑皮质素通路有关。
- 王巧玲徐珞
- 关键词：NESFATIN-1焦虑恐惧高架十字迷宫杏仁核
- 十氨基丁酸对大鼠摄食变化的影响及机制研究被引量：3
- 2019年
- 目的探讨丫-氨基丁酸(丫-aminobutyric acid,GABA)受体信号通路是否参与调控丘脑未定带(thalamic undefined,ZI)-伏隔核(nucleus accumbens,NAc)神经通路对大鼠胃牵张(gastric distraction,GD)敏感神经元放电活动及对大鼠4 h累计摄食量的影响。方法随机选取6只大鼠,采用荧光金(fluorescent gold.FG)逆行追踪方法进行大鼠丘脑ZI与NAc之间的神经通路的观察;随机选取82只大鼠,分别进行大鼠胃部置球囊术,NAc核团置微电极,ZI核团置刺激电极,采用单细胞放电记录方法观察电刺激ZI对大鼠NAc内GD敏感神经元兴奋性的影响;随机选取18只大鼠,按照随机数字表发分为三组,每组6只,分别为NS组、GABA组、GABA+GABA受体拮抗剂荷包牡丹碱(BIC)组,采用大鼠NAc核团埋置套管并注入GABA及BIC的方法,观察大鼠4 h累计摄食量变化;随机选取18只大鼠,按照随机数字表发分为三组,每组6只,分别为假刺激(SS)组、50 jxA电刺激组、50“A电刺激+BIC组,采用电刺激大鼠ZI及大鼠NAc注射BIC的方法,观察大鼠4 h累计摄食量变化。结果FG逆行追踪结合荧光免疫组织化学染色结果显示,在ZI可见有GABA和FG双重标记的神经元。电刺激ZI,大鼠NAc中GABA敏感性GD神经元放电频率显著增多[GD-E增幅:(78.8士&4)%,GD-I增幅:(89.3±9.2)%,P<0.01],但该效应可被BIC拮抗[GD-E增幅:(113.8±13.6)%,GD-I增幅:(121.8±14.2)%,P<0.01]o大鼠NAc内微量注射GABA可明显增加4 h累积摄食量[(155.72±18.84)kcal,￠=3.41,P<0.05],该效应可被部分BIC拮抗[123.43±15,11)kcal,<=3.28,P<0.05]。电刺激大鼠ZI,大鼠摄食量明显增加[(39.07±11.27)kcal,t=2.96,P<0.05],该效应可被部分BIC拮抗[(34.17±10.85)kcal,Z=2.33,P<0.05]o结论ZI-NAc神经通路可调控鼠胃牵张(GD)敏感神经元放电活动及大鼠摄食情况,并且GABA-A受体信号通路可能参与该过程的调控。
- 王茜冷慧栾晓郭菲菲孙向荣高胜利徐珞
- 关键词：伏隔核摄食
- 生长激素释放肽对全脑缺血／再灌注损伤大鼠海马组织的保护作用及对谷氨酸／γ-氨基丁酸敏感神经元放电活动的影响被引量：6
- 2016年
- 目的探讨生长激素释放肽（Ghrelin）对全脑缺血／再灌注（I／R）大鼠海马神经元的保护效应及其作用机制。方法按随机数字表法将雄性sD大鼠分为假手术（Sham）组、I／R组、生理盐水（Ns）＋I/R组和Ghrelin＋I／R组，每组42只。夹闭双侧颈内动脉15min、再灌注60min制备全脑I／R模型；Sham组仅暴露颈动脉，不做任何处理。Ghrelin＋I／R组、NS＋I／R组于I／R前经侧脑室注射Ghrelin或NS 1μL。实验结束后取部分大鼠脑组织，采用化学比色法测定海马组织丙二醛（MDA）、髓过氧化物酶（MPO）和谷胱甘肽（GSH）水平，测量梗死面积，观察组织病理学改变。其余大鼠采用单细胞外记录神经元放电方法，分别观察海马CAl区谷氨酸（Glu）和γ-氨基丁酸（GABA）敏感神经元（Glu—N、GABA—N）的放电活动。结果与Sham组比较，I／R模型大鼠海马组织MDA、MPO显著增高，GSH显著降低，海马组织梗死面积明显增加，固缩神经元细胞数明显增多；而NS＋I／R组与I／R组各指标比较差异均无统计学意义。与NS＋I／R组比较，Ghrelin＋I／R组海马组织MDA、MPO显著降低[MDA（nmol／g）：16．4±4．2比24．5±6．7，MPO（nmol／g）：6．4±1．8比10．2±2．9，均P〈0．05]，GSH显著升高（μmol／g：2．65±0．72比1．66±0．50，P〈0．05），海马组织梗死面积明显缩小[（43．9±9．5）％比（77．0±12．7）％，P〈0．01]，固缩神经元细胞数明显减少（个：36．2±4．5比47．1±6．1，P〈0．01）。电生理研究结果显示，I／R模型大鼠海马CA1区Glu—N和GABA—N放电频率较Sham组明显增加；NS＋I／R组Glu—N和GABA—N放电活动与I／R组比较差异无统计学意义。与NS＋UR组比较，Ghrelin＋I／R组海马CAl区Glu—N放电频率（Hz）显著降低（缺血时：3．81±0．67比4．98±0．33，再灌注时：3．01±0．37比3．77±0．41，均P〈0．05），GABA—N放电频率（
- 张孟玲孙向荣郭菲菲公衍玲徐珞
- 关键词：生长激素释放肽海马Γ-氨基丁酸
- Nesfatin-1及MCH对大鼠胃酸分泌和胃运动的影响被引量：2
- 2018年
- 目的:本实验主要探究nesfatin-1对胃运动和胃酸分泌的影响,以及弓状核(ARC)-下丘脑外侧区(LHA)nesfatin-1神经通路在该过程中的作用。方法:采用逆行追踪和免疫组织化学染色实验观察ARC-LHA nesfatin-1神经通路的构成;在体胃运动实验观察nesfatin-1对胃运动的影响以电刺激ARC对胃运动的影响;采用幽门结扎法测量胃液和胃酸分泌量。结果:LHA微量注射nesfatin-1抑制胃运动和胃酸分泌,但是预先注射黑色素浓集激素(MCH)受体拮抗剂PMC-3881-PI减弱nesfatin-1对胃运动和胃酸分泌的抑制作用。电刺激ARC后,胃收缩幅度和频率显著增强,胃酸分泌明显增多。nesfatin-1抗体或PMC-3881-PI对电刺激ARC诱导的胃运动没有显著影响,但是能够改变电刺激ARC诱导的胃酸分泌。结论:ARC-LHA间nesfafin-1通路可调控大鼠胃运动和胃酸分泌,并且黑色素浓集激素也参与调节该过程。
- 付丹丹付丹丹郭菲菲郭菲菲孙向荣
- 关键词：NESFATIN-1下丘脑外侧区弓状核胃运动胃酸分泌
- DVC orexin-A通过调控ghrelin受体信号通路改善顺铂所致大鼠胃功能紊乱被引量：2
- 2020年
- 目的:探讨迷走神经复合体(Dorsal vagal complex,DVC)内orexin-A对顺铂所致胃功能紊乱的影响及可能机制。方法:随机选取30只大鼠并将其分为3组(n=10):对照组(NS组);24 h顺铂治疗组;48 h顺铂治疗组。24 h顺铂治疗组和48 h顺铂治疗组大鼠分别在腹腔注射顺铂后24 h和48 h处死大鼠,对照组大鼠腹腔注射生理盐水(Normal saline,NS)。采用定量实时PCR检测各组大鼠下丘脑orexin-A mRNA的表达,ELISA测量大鼠脑脊液中P物质水平;DVC内微量注射orexin-A和ghrelin受体拮抗剂后,检测大鼠食物和高岭土的摄入量。结果:顺铂可显著减少大鼠下丘脑orexin-A mRNA表达,增加其脑脊液内P物质的浓度。外源性orexin-A可改善顺铂引起的厌食症和异食癖。orexin-A以上的效应可被DVC内预先注射ghrelin受体拮抗剂部分逆转。结论:orexin-A可能通过ghrelin神经肽系统改善顺铂在化疗过程中诱导的胃功能紊乱。
- 张雪华刘雪环孙向荣金婷婷徐珞
- 关键词：OREXIN-ADVC顺铂胃功能紊乱
- Orexin和P物质对顺铂诱发大鼠异食癖的影响被引量：2
- 2016年
- 目的:观察食欲素(Orexin)和P物质(SP)对顺铂诱发大鼠异食癖的影响。方法:雄性Wistar大鼠被随机分为对照组和顺铂处理组,顺铂处理组给予大鼠顺铂(3或6 mg/kg,腹腔注射),对照组给予等量生理盐水。记录顺铂大鼠摄食高岭土量、摄食量的改变;Real-time PCR法观察顺铂对大鼠下丘脑Orexin和延髓中SP前体-前速激肽原A(PPT-A)m RNA表达的影响;分别和联合应用SP受体(NK1受体)拮抗剂阿瑞匹坦和Orexin-A对顺铂大鼠异食癖和摄食量的作用。结果:皮下注射3 mg/kg(低剂量组)的顺帕后大鼠高岭土摄入量和摄食量与对照组相比无明显差异(P>0.05),而注射6 mg/kg(高剂量组)顺铂后,大鼠高岭土摄入量与对照组和低剂量组相比显著增加(P<0.05);高剂量的顺铂作用12 h时,大鼠延髓内PPT-A的m RNA表达有轻微增加,但无统计学差异(P>0.05),24 h后,延髓内PPT-A的m RNA表达量显著增加(P<0.05)。在此后持续观察的5天中,顺铂可持续引起延髓中PPT-A的mRNA表达增高,在第5天时PPT-A的m RNA仍维持166.23±16.92%的高表达。高剂量顺铂抑制大鼠下丘脑中Orexin的mRNA表达,24 h时Orexin降低幅度最明显,为对照组的34.81±7.22%(P<0.05)。此后检测的5天,Orexin浓度均低于对照组;将阿瑞匹坦和orexin联合应用,大鼠高岭土摄入量较单独应用阿瑞匹坦或orexin明显减少,摄食量显著增加(P<0.05)。结论:P物质和orexin通路对顺铂化疗大鼠的异食癖和摄食量调控具有协同作用。
- 张颖韩波郭菲菲孙向荣公衍玲张孟玲杨丹丹徐珞
- 关键词：OREXINP物质顺铂异食癖
- 侧脑室注射orexin对顺铂诱导大鼠异食癖的影响被引量：1
- 2016年
- 目的：研究化疗后止呕药联合侧脑室注射orexin能否改善顺铂诱导的异食癖与食欲减退,进一步探索吡嘧司特联合orexin抗呕吐的机制。方法：1腹腔注射止呕药并侧脑室置管给予orexin,观察大鼠高岭土摄取及摄食改变。2EIA法测量脑脊液中P物质含量。结果：1顺铂中高剂量组高岭土摄入增加、摄食和体重减少,呈量效依赖关系（P〈0.05~0.01）。2恩丹西酮早期抑制高岭土摄入（P〈0.05）。联合用药后延长该效应且晚期增加摄食（P〈0.05）。3阿瑞吡坦晚期抑制高岭土摄入,呈量效依赖关系（P〈0.05~0.01）,联合用药后第4天,高岭土摄取减少、摄食增加（P〈0.05）。4吡嘧司特晚期抑制高岭土摄入,呈量效依赖关系（P〈0.05~0.01）。高剂量吡嘧司特晚期增加摄食（P〈0.05）。联合用药后第4、5天,高岭土摄入减少,第1、4、5天摄食增加（P〈0.05）。5注射顺铂脑脊液中P物质浓度升高（P〈0.05）。联合用药能够降低P物质浓度（P〈0.05）。结论：联合应用orexin能够延长止呕药作用期并改善顺铂引起的食欲减退。吡嘧司特通过减少P物质的含量,抑制高岭土摄入。
- 苑艳艳郭菲菲孟祥璐孙向荣公衍玲栾晓杨丹丹张孟玲徐珞
- 关键词：OREXINP物质顺铂异食癖
