重庆市卫生局医学科研项目(06-1-008)
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
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- 相关机构：重庆市肺科医院第三军医大学重庆市公共卫生医疗救治中心更多>>
- 发文基金：重庆市卫生局医学科研项目重庆市科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 结核分枝杆菌H_(37)Rv株Rv0341编码基因iniB的克隆与表达被引量：2
- 2008年
- 目的克隆并表达编码结核分枝杆菌H37Rv株Rv0341蛋白的iniB基因。方法利用PCR从结核分枝杆菌H37Rv株中扩增iniB基因,克隆于pET-22b(+)原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,镍离子亲和层析柱纯化后,通过SDS-PAGE和Western-blot鉴定目的蛋白的表达及反应原性。结果克隆并表达了iniB基因,表达的蛋白相对分子质量约43000,诱导2h表达量较高,约为25%。目的蛋白主要以包涵体形式存在于超声沉淀中,纯化后蛋白纯度可达98%以上。经Western blot检测,纯化蛋白与依赖利福平结核分枝杆菌(依R菌)肺结核患者血清呈现强阳性反应,而与非依R菌肺结核患者血清不反应。结论已成功克隆并表达了编码结核分枝杆菌H37Rv株Rv0341蛋白的iniB基因,表达的重组蛋白具有反应原性及特异性,为依R菌结核病临床血清学快速诊断方法的建立及试剂盒的研发奠定了基础。
- 吴园钟敏王易伟钟静胡频频毛旭虎
- 关键词：结核分枝杆菌克隆
- 依赖利福平结核分枝杆菌Rv0341天然蛋白的诊断价值被引量：2
- 2009年
- 目的探讨依赖利福平结核分枝杆菌(依R菌)Rv0341天然蛋白检测血清Rv0341抗体,诊断依R菌感染肺结核病的价值。方法典型依R菌经SDS-PAGE、转膜后,获得Rv0341天然蛋白带,采用结核分枝杆菌抗体DIGFA诊断试剂检测血清Rv0341抗体,并考察该方法的重复性、特异性及敏感性。结果利用Rv0341天然蛋白检测血清Rv0341抗体,具有良好的批内和批间重复性;血清Rv0341抗体在耐R菌肺结核组和R敏感菌肺结核组的特异性分别为92.3%(24/26)和79.3%(23/29),在依R菌肺结核R治疗组中的敏感性为88.9%(16/18);在培养阴性结核组中,阳性率为23.8%(29/122)。54份阳性结果血清进行重复实验,确认为阳性。结论Rv0341天然蛋白可作为诊断抗原用于依R菌结核病血清学诊断试剂盒的研发,以快速辅助诊断依R菌结核病,特别对菌阴依R菌结核病更有诊断价值。
- 王易伟吴园胡频频钟明彭建军杨晓梅姚永秀钟敏毛旭虎
- 关键词：DIGFA结核病
- 依赖利福平结核菌肺结核一例分析被引量：4
- 2008年
- 研究发现，有的分枝杆菌在含利福平的培养基中生长旺盛，无利福平反而生长不良，于是将此类结核杆菌称为依赖利福平分枝杆菌（依R菌）。临床上，如果结核病患者体内出现依R菌，再使用利福平，不仅对治疗无反应，而且可使病情加重，预后不佳，但目前临床医师对依R菌普遍认识不足，现将临床1例确诊的依R菌患者报道如下。
- 张西雁张春智陈刚胡频频钟敏
- 关键词：肺结核结核菌临床医师分枝杆菌结核病患者
