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E盒锌指结合蛋白1基因沉默抑制结肠癌HCT116细胞增殖并促进其凋亡被引量：3: 2014年; 目的使用针对E盒锌指结合蛋白1(ZEB1)的siRNA在结肠癌HCT116细胞中下调ZEB1的表达,研究其对HCT116细胞增殖和凋亡的影响。方法根据人ZEB1的mRNA序列设计并合成2对针对ZEB1的siRNA,瞬时转染HCT116细胞后,利用实时荧光定量PCR,Western blot法分别在mRNA和蛋白水平检测siRNA对ZEB1的抑制效果;利用MTT法检测细胞增殖;AnnexinⅤ-FITC/PI染色结合流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果与对照组相比,针对ZEB1的siRNA可在mRNA和蛋白水平有效抑制ZEB1的表达,ZEB1的表达下调可有效抑制HCT116细胞的增殖,并促进细胞凋亡。结论 ZEB1对结肠癌细胞的生存和增殖具有重要作用,可能参与结肠癌的发生发展过程。; 郑国旭史圣甲魏铭席文锦郭张燕杨帆孟艳玲温伟红杨安钢; 关键词：结肠癌细胞增殖

c-Myc和EZH2双阳性肝细胞癌中microRNA-26a的上下游调控机制研究: 前言肝细胞癌作为全球范围内死亡率排名第三的恶性肿瘤受到多国肿瘤学家的关注。我们课题组前期的工作发现,c-Myc和EZH2双阳性的肝细胞癌具有较差的预后。microRNA发挥作用具有“一对多”的特点,探索利用microRN...; 张翔; 关键词：C-MYC EZH2 肝细胞癌反馈环路; 文献传递

免疫促凋亡分子靶向杀伤肿瘤的研究进展: 2013年; 免疫促凋亡分子是肿瘤特异性表面标记物的单链抗体与具有转位及杀伤功能的活性片段融合表达的重组蛋白，具有靶向识别、高效杀伤肿瘤细胞的特点。免疫促凋亡分子由免疫毒素发展而来，免疫毒素虽然具有较强的杀伤活性和特异性，但是由于其转运、杀伤结构域来源于细菌或植物毒素，临床试验中产生了中和抗体并伴有较强副作用，限制了其应用的范围。第二代免疫促凋亡分子利用人内源性杀伤分子替换了免疫毒素的杀伤结构域，部分解决了免疫毒素的免疫原性问题，但是其未被替代的天然毒素转位结构域仍具有免疫原性且转位效率有限。最新一代免疫促凋亡分子进一步用furin位点替代了毒素的转位结构域，在保证特异性及杀伤活性的同时，提高了转位能力并极大地降低了免疫原性，因而具有广泛的临床应用前景。; 王涛任君琳贾林涛杨安钢; 关键词：肿瘤靶向杀伤

HER2靶向免疫促凋亡蛋白e23sFv-Fdt-tBid原核表达载体构建及其基因工程菌种稳定性的鉴定被引量：2: 2013年; 目的构建HER2靶向免疫促凋亡蛋白e23sFv-Fdt-tBid的原核表达载体并鉴定其基因工程菌种稳定性。方法应用PCR技术以pCMV-e23sFv-Fdt-tBid为模板扩增e23sFv-Fdt-tBid片段,并将其克隆入pET-22b原核表达载体;将该表达载体转化BL21大肠杆菌并挑取表达蛋白较高的克隆菌,划线接种传代50次;通过革兰氏染色方法、扫描电镜形态观察、菌种质粒酶切鉴定及蛋白诱导表达的Western blot分析鉴定e23sFv-Fdt-tBid免疫促凋亡蛋白表达工程菌的稳定性。结果成功构建pET-22b-e23sFv-Fdt-tBid原核表达载体,并在BL21大肠杆菌中诱导表达;革兰氏染色方法、扫描电镜形态观察、菌种质粒酶切鉴定及Western blot法鉴定结果表明基因工程菌种稳定性良好,可以稳定表达免疫促凋亡蛋白e23sFv-Fdt-tBid。结论成功构建了HER2靶向免疫促凋亡蛋白原核表达载体,鉴定了表达该免疫促凋亡蛋白的基因工程菌种稳定性,为HER2靶向免疫促凋亡蛋白e23sFv-Fdt-tBid的应用研究奠定了基础。; 席文锦彭红艳白文栋郑国旭史圣甲皇甫罗锴王曦贾林涛张英起杨安钢; 关键词：原核表达

干涉lncRNAs HOTAIR对人乳腺癌细胞MDA-MB-231的影响被引量：12: 2012年; 目的:探讨利用RNA干涉沉默HOTAIR基因对人乳腺癌细胞MDA-MB-231的影响。方法:利用脂质体转染MDA-MB-231细胞;qPCR检测HOTAIR基因的表达;检测EMT相关的Snail蛋白水平的表达;流式细胞术检测凋亡率;MTT法检测细胞增殖。结果:干涉HOTAIR基因后细胞中Snail蛋白表达水平下降,细胞凋亡增加。结论:靶向HO-TAIR的序列特异性siRNA可显著抑制HOTAIR基因的表达;干涉HOTAIR基因表达可抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。; 杨韬李俊堂王丽娟李伟郭张燕白文栋杨安钢; 关键词：SNAIL

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国家自然科学基金(81030045)