国家自然科学基金(30470583)
- 作品数：5 被引量：20H指数：3
- 相关作者：王维治王化冰吴云迟立君张莹更多>>
- 相关机构：哈尔滨医科大学附属第二医院北京协和医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金哈尔滨市科技创新人才研究专项资金黑龙江省卫生厅科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- FoxP3^+CD4^+CD25^+调节性T细胞在重症肌无力发病机制中的作用被引量：5
- 2007年
- 目的在细胞与分子水平检验重症肌无力(myasthenia gravis,MG)患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Tregs)的表达缺陷,探讨CD4+CD25+Tregs亚群异常与MG发病间的关系。方法流式细胞技术检测21例MG患者(11例经胸腺切除)与20名健康对照者(healthy controls,HCs)外周血CD4+ CD25+ Tregs及FoxP3+CD4+CD25+Tregs含量,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-FQ-PCR)分析MG患者与HCs外周血CD4+CD25+Tregs中FoxP3mRNA的表达。结果MG患者外周血CD4+ CD25+Tregs占CD4+T细胞含量与HCs比较无统计学差异(P>0.05)。MG患者外周血FoxP3+CD4+CD25+ Tregs含量及FoxP3mRNA表达量与HCs比较均显著性降低(P<0.05);胸腺切除的MG患者与未经胸腺切除的MG患者外周血FoxP3+CD4+CD25+Tregs含量及FoxP3 mRNA表达量无统计学差异(P>0.05)。结论MG患者外周血CD4+CD25+Tregs数量正常,但其表面分子FoxP3的表达下调,这种CD4+CD25+Tregs亚群的异常发现有助于深入阐明MG的免疫发病机制。
- 张莹王化冰迟立君王维治
- 关键词：重症肌无力CD4+CD25+调节性T细胞FOXP3
- 实验性自身免疫性神经炎相关细胞的免疫机制被引量：8
- 2006年
- 目的建立 P2或 P0多肽诱导的实验性自身免疫性神经炎(EAN)大鼠模型,确定诱导EAN 的优选抗原和剂量,探讨 EAN 相关细胞免疫机制。方法实验组用 P2_(57-81)或 P0_(180-199)多肽加完全弗氏佐剂(FCA)免疫 Lewis 大鼠,对照组单用 FCA 免疫,致敏后每日对大鼠进行临床评分,比较高峰期最大评分,致敏第14天进行淋巴细胞增殖试验,测定 CD_4^+T/淋巴结单个核细胞(MNC)和CD_4^+CD_(25)^+T/CD_4^+T 细胞百分比,并进行坐骨神经病理检查。结果实验大鼠瘫痪高峰期最大评分,P2_(57-81)200μg组显著高于 P2_(57-81)100μg组和 P0_(180-199)200μg组(均P<0.01),P2_(57-81)100μg组与P0_(180-199)200μg组差异元统计学意义;P2_(57-81)100μg组和 P2_(57-81)200μg组对 P2_(57-81)多肽刺激反应性显著高于对照组(均 P<0.01),P0_(180-199)200μg组对 P0_(180-199)多肽刺激反应性显著高于对照组(P<0.01),P2_(57-81)100μg组和 P0_(180-199)200μg组对相应致敏多肽刺激反应性显著低于 P2_(57-81)200μg组(均P<0.05);CD_4^+T/淋巴结 MNC 百分比在各组间差异无统计学意义;CD_4^+CD_(25)^+T/CD_4^+T 细胞百分比,P2_(57-81)200μg组显著低于 P2_(57_81)100μg组、P0_(180-199)200μg组和对照组(均 P<0.01),P2_(57-81)100μg组和P0_(180-199)200μg组显著低于对照组(均P<0.01),P0_(180-199)200μg组显著低于 P2_(57-81)100μg组(P<0.01);EAN 急性期坐骨神经以炎性细胞浸润为主,P2_(57-81)200μg组重于其他实验组(均 P<0.01),P2_(57-81)200μg组慢性期无炎性细胞浸润,而表现多发性局灶性脱髓鞘和神经纤维崩解未恢复。结论200μg P2_(57-81)多肽是诱导 EAN 的优选抗原,EAN 致病与 CD_4^+T 细胞数量无关,而与致病性 T 细胞活性增强及CD_4^+CD_(25)^+T 细胞减少有关。
- 吴云王化冰王维治
- 关键词：神经炎实验性变应性坐骨神经
- T细胞疫苗接种实验性自身免疫性神经炎的实验研究被引量：1
- 2008年
- 目的建立P257-81-特异性T细胞系,在实验性自身免疫性神经炎(EAN)大鼠进行T细胞疫苗接种(TCV)的实验研究。方法P257-81多肽、IL-2和抗CD3/CD28单抗包被磁珠诱导扩增P257-81-特异性T细胞及非抗原特异性T细胞,将灭活T细胞接种大鼠,检测指标包括:瘫痪高峰期最大评分比较,淋巴细胞增殖试验、CD4+T/淋巴结单个核细胞及CD4+CD25+T/CD4+T细胞百分比测定、培养液上清IFN-γ及IL-10水平测定以及坐骨神经病理学检查。结果P257-81-特异性T细胞显著扩增,2周扩增近1000倍;P257-81-特异性TCV预防组无大鼠发病;P257-81-特异性TCV治疗组大鼠病情减轻,其坐骨神经炎性细胞浸润程度显著轻于对照组(P<0.001);P257-81-特异性TCV预防组和治疗组CD4+CD25+ T/CD4+T细胞百分比及培养液上清IL-10水平均显著高于其对照组,培养液上清IFN-γ水平均显著低于其对照组(均P<0.001)。结论抗原+IL-2+CD3/CD28单抗包被磁珠刺激是一种高效、可靠的扩增抗原特异性T细胞方法;P257-81-特异性TCV能预防EAN发生,并可治疗已发生的EAN,其机制可能为:使CD4+CD25+调节性T细胞/CD4+T细胞比例上调,诱导致病性CD4+Th1细胞向保护性CD4+Th2细胞转换。
- 吴云梁庆成王维治
- 关键词：实验性自身免疫性神经炎
- γ-干扰素诱导人外周血CD4^+CD25^-T细胞转化为CD4^+CD25^+调节性T细胞的可行性研究被引量：3
- 2010年
- 目的研究γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)将人外周血CD4^+CD25^- T细胞诱导为CD4^+CD25^+调节性T细胞(CD4^+CD25^+Tregs)的可行性。方法采用免疫磁珠法分离19名健康志愿者外周血单个核细胞中的CD4^+CD25^- T细胞,在抗CD3和抗CD28抗体存在条件下给予不同水平IFN-γ刺激72 h,以流式细胞仪检测CD4^+CD25^+T细胞比例并以real time-PCR法检测其特异性表型标志FoxP3表达水平。将诱导生成的CD4^+CD25^+T细胞与自体CD4^+CD25^-T细胞共培养检测诱导生成的CD4^+CD25^+T细胞抑制CD4^+CD25^-T细胞增殖的能力。结果IFN-γ刺激后CD4^+CD25^+T细胞比例上调且其FoxP3表达较诱导前明显增高,当IFN-γ水平为20、40 ng/mL时,CD4^+CD25^+T细胞上调比例最高;40 ng/mL IFN-γ诱导的CD4^+CD25^+T细胞FoxP3表达最高,但不及CD4^+CD25^+Tregs。IFN-γ诱导所得CD4^+CD25^+T细胞可抑制自体CD4^+CD25^-T细胞增殖,40 ng/mL IFN-γ诱导的CD4^+CD25^+T细胞抑制能力与CD4^+CD25^+Tregs相当。结论 IFN-γ可诱导CD4^+CD25^-T细胞转化为CD4^+CD25^+T细胞,当IFN-γ水平为40 ng/mL时诱导率最高且诱导生成的CD4^+CD25^+T细胞表型和功能与CD4^+CD25^+Tregs相当。
- 黄硕迟立君王维治
- 关键词：Γ-干扰素T细胞CD4^+CD25^+调节性T细胞
- Th_1/Th_2型细胞因子在实验性自身免疫性神经炎发病机制中的作用被引量：5
- 2007年
- 目的建立 P2多肽诱导的实验性自身免疫性神经炎(EAN)大鼠模型,探讨 Th_1/Th_2型细胞因子在 EAN 发病机制中的作用。方法实验组用100μg或200μg P2_(57-81)多肽加完全弗氏佐剂(FCA)免疫 Lewis 大鼠,对照组单用 FCA 免疫,致敏后每日对大鼠进行临床评分,比较高峰期最高评分。致敏第14天测定淋巴结细胞培养液上清干扰素(IFN)-γ、IL-4及 IL-10的含量,并进行坐骨神经病理学检查。结果实验大鼠瘫痪高峰期最高评分 P2_(57-81)200μg组(3.6±0.3)显著高于100μg组(2.2±0.6,P<0.01);P2_(57-81)200μg组大鼠病程显著长于100μg组;IFN-γ含量,两组实验大鼠均显著高于对照组[分别为(530.6±91.7)、(806.3±132.4)和(35.0±5.9)pg/ml,均 P<0.01],而P2_(57-81) 200μg组显著高于100μg组(P<0.01);IL-4和 IL-10含量,P2_(57-81)100μg组均显著高于对照组(均 P<0.01),P2_(57-81)200μg组显著低于对照组(P<0.05,P<0.01);坐骨神经病理可见 EAN 急性期以炎性细胞浸润为主,P2_(57-81)200μg组慢性期无炎性细胞浸润,而表现为多发性局灶性脱髓鞘和神经纤维崩解未恢复。结论 EAN 临床表现随致敏原 P2_(57-81)多肽剂量增加而加重;在 EAN 急性期,IFN-γ水平与 EAN 临床表现大致平行;EAN 疾病具有自限性可能与 IL-4和 IL-10水平增高有关,而疾病迁延可能与 IL-4和 IL-10水平降低有关。
- 吴云王化冰王维治
- 关键词：神经炎实验性变应性细胞因子类坐骨神经
