国家自然科学基金(30730087)
- 作品数：12 被引量：50H指数：4
- 相关作者：李大金李明清林羿杜美蓉贺银燕更多>>
- 相关机构：暨南大学复旦大学暨南大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金全球变化研究国家重大科学研究计划上海市医学领军人才项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- C型凝集素样受体CLEC-2在人滋养细胞系HTR-8/SVneo的表达与调控被引量：1
- 2010年
- 目的研究C型凝集素样受体CLEC-2在人早孕期母胎界面滋养细胞的表达及调控。方法应用免疫细胞化学法和Western blot法检测人滋养细胞系HTR-8/SVneo中CLEC-2的表达;并观察不同浓度人绒毛膜促性腺激素(hCG)、孕激素及雌激素对其表达CLEC-2的影响。结果 HTR-8/SVneo显著表达CLEC-2。与对照组相比,2.5和5.0kU/LhCG处理组CLEC-2的表达上调;相反,经0～10-7mol/L浓度雌激素处理后,HTR-8/SVneo中CLEC-2的表达呈剂量依赖性降低;孕激素不影响CLEC-2的表达。结论 HTR-8/SVneo表达CLEC-2受hCG升调节、雌激素降调节;CLEC-2可能参与调节人早孕期滋养细胞的生物学行为,进而参与正常妊娠的维持。
- 薛丽荣赵洪波李明清李大金谢可鸣
- 关键词：雌激素孕激素人绒毛膜促性腺激素
- 趋化因子对调节性NK细胞归巢的诱导作用
- 2008年
- 调节性T细胞和调节性NK细胞都可能在维持妊娠方面发挥关键作用。研究显示,同种异基因妊娠非肥胖型糖尿病(NOD)小鼠胚胎丢失率显著增高,而注射抗唾液酸神经节苷脂清除其残存的NK细胞,可使胚胎丢失率进一步增高。相反,过继性输注来源于正常小鼠的CD49b+CD25+NK细胞可显著降低胚胎丢失率。检测了CXCL12的特异性受体CXCR4在NK细胞表面的表达模式,并采用体外和体内迁移实验研究了NK细胞的迁移规律。由于以往研究证实小鼠胎盘滋养层细胞表达CXCL12,研究结果提示:孕期动员子宫外表达CXCR4的CD49b+CD25+NK细胞向妊娠子宫内迁移,可能对于调节母胎免疫耐受具有重要意义。
- 王慧琪李萃林羿王文静曾山
- 关键词：细胞迁移免疫调节
- 人胸腺基质淋巴细胞生成素(hTSLP)在早孕绒毛组织的表达及意义被引量：1
- 2009年
- 目的:探讨人早孕母胎界面表达TSLP及其受体(TSLPR)的特征。方法:使用RT-PCR、Western blot、免疫组织化学法分析正常绒毛组织TSLP/TSLPR的表达;RT-PCR、免疫细胞化学法分析原代培养的滋养细胞TSLP/TSLPR的表达;ELISA检测原代培养的人滋养细胞上清TSLP分泌水平。结果:从转录水平至蛋白水平,绒毛细胞滋养细胞与合体滋养细胞均表达TSLP及TSLPR。结论:TSLP表达于正常早孕绒毛组织,可能与早孕期调节性T细胞的扩增及功能变化相关。
- 郭培奋贺银燕李大金
- 关键词：胸腺基质淋巴细胞生成素母胎界面调节性T细胞
- 广东分离株HPV16型L2与重组E7融合蛋白原核表达载体的构建被引量：1
- 2010年
- 分析广东分离株HPV16型的L2和E7基因结构,并对E7的4个功能区重新排列组合形成失去致癌作用但其抗原表位不改变,其命名为rE7,构建pET-28a-L2、pET-28a-rE7、pET-28a-L2-rE7、pET-28a-rE7-L24个原核表达质粒.采用PCR技术从广东分离株HPV16基因组中扩增L2基因;用重叠PCR技术人工合成rE7基因和L2-rE7、rE7-L2融合基因,并构建到原核表达载体pET-28a(+)上.成功扩增广东分离株HPV16型L2基因,经重叠PCR技术成功得到rE7、L2-rE7和rE7-L2基因并成功构建了原核表达的4个载体:pET-28a-L2、pET-28a-rE7、pET-28a-L2-rE7、pET-28a-rE7-L2.广东分离株HPV16型L2基因与中国标准株有9处不同,同源性为99.37%,其编码氨基酸序列有8处突变.成功合成失去致癌作用的基因rE7及构建4个原核表达载体.
- 芦春斌辛庆玲
- 关键词：人乳头瘤病毒16型E7基因
- 反复自然流产患者外周血调节性T细胞Foxp3的表达被引量：20
- 2008年
- 评价原因不明复发性流产(unexplained recurrent miscarriage,URM)患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞中Foxp3的表达。以正常生育非孕妇女(n=20)为对照,以URM(n=25)为研究对象,采用实时荧光定量PCR分析外周血单个核细胞Foxp3转录水平;以流式细胞术分析外周血CD4+CD25+T细胞Foxp3翻译水平。结果:实时荧光定量PCR显示,URM患者的Foxp3转录水平明显低于正常对照组(P<0.01)。流式细胞仪分析显示URM组外周血中CD4+CD25+T细胞Foxp3翻译水平显著低于正常对照组(P<0.01)。URM患者外周血调节性T细胞Foxp3表达降调可能参与URM的发病。
- 杨金英李大金金莉萍杜美蓉贺银燕周雯慧
- 关键词：反复自然流产调节性T细胞FOXP3
- 双链RNA和咪喹莫特联合刺激的协同作用研究
- 2009年
- 目的研究双链RNA（double—stranded RNA，dsRNA）和咪喹莫特联合刺激是否具有协同效应。方法在Toll样受体3（TLR3）的特异性刺激剂dsRNA、TLR7的特异性刺激剂咪喹莫特（R837）单独刺激或二者联合刺激条件下，检测BALB／c×C57BL／6和NK细胞缺陷的非肥胖型糖尿病（NOD）×C57BL／6小鼠胚胎吸收率。采用小鼠体内注射上述刺激剂的方法，流式细胞术检测子宫CD45^＋细胞内细胞因子表达水平。为进一步鉴定CD45^＋细胞身份，在体外培养系统中采用dsRNA和咪喹莫特刺激胎盘和底蜕膜来源的子宫CD3^＋T细胞和CD49b^＋NK细胞，并检测细胞内细胞因子表达水平。采用丝裂原激活的蛋白激酶（mitogen—activated protein kinase，MAPK）抑制剂SP600125和PD98059阻断细胞因子表达水平的增加。结果dsRNA和咪喹莫特联合刺激对胚胎吸收率的增高具有协同作用，同时对CD45^＋细胞内TNF—α和IFN-γ的表达增强具有协同刺激作用。进一步细胞鉴定研究显示，虽然在BALB／c小鼠CD3^＋细胞和CD49b^＋NK细胞中均可发现这种协同效应，但是在NOD小鼠，这种细胞因子水平的增高应主要归因于CD3^＋T细胞，因为在CD49b^＋NK细胞不显示这种细胞因子增高趋势。上述刺激剂合用的协同效应可部分地被JNK（Jun N-terminal kinase）MAPK抑制剂SP600125阻断，而几乎被ERK（extracellular signal—regulated kinase）MAPK抑制剂PD98059所完全阻断。结论增强的TLR3和TLR7联合信号可能是通过NOD小鼠Th1型T细胞，而不是NK细胞所传导。ERK MAPK途径可能在TLR3和TLR7参与的细胞信息传递过程中发挥关键性作用。
- 李萃王慧琪王文静狄静芳曾山林羿
- 关键词：动物模型免疫缺陷免疫调节TOLL样受体
- 足月胎膜早破孕妇脂质过氧化与凝血状态的相关性探讨被引量：7
- 2013年
- 目的:探讨脂质过氧化作用在足月胎膜早破(tPROM)发病机制中可能发挥的作用以及tPROM孕妇脂质过氧化与凝血状态改变的相关性。方法:以正常孕妇为对照,以定期产检且胎儿生长发育正常,在足月临产前胎膜破裂而无临床感染征象的孕妇32例为研究对象,分别对孕中期(16~23^(+6)周)、孕晚期(28~36^(+6)周)和孕足月临产前(37~40周)的新鲜中段尿液(经抹洗)进行抗原标记酶联免疫吸附法测定8-异前列腺素E_(2α)(8-iso-PGF_(2α))的水平,且测定尿肌酐(Cr)的浓度,采用尿8-iso-PGF_(2α)与尿Cr的比值以平衡患者肾脏的不同排泄功能,分析相关的凝血指标和妊娠结局。结果:tPROM组中,孕中期与孕晚期尿液8-iso-PGF_(2α)水平比较无显著性差异(P>0.05),两者分别与对照组比较也无显著性差异(P>0.05),孕足月时尿液8-iso-PGF_(2α)水平均显著高于自身孕中、晚期和正常孕足月组(P<0.05)。tPROM组孕足月时血细胞比容和纤维蛋白原明显高于正常组(P<0.05),活化部分凝血活酶时间和凝血酶原时间明显低于正常(P<0.05),但均与尿液8-iso-PGF_(2α)水平无显著相关性(P>0.05)。结论:tPROM孕妇破膜后临产前脂质过氧化作用明显增强。tPROM孕妇破膜后临产前血液处于高凝状态,可能与脂质过氧化作用增强无关。
- 刘培艳吴莉莉肖小敏
- 关键词：脂质过氧化凝血状态胎膜早破
- Ionomycin诱导小鼠精子顶体反应的初步研究
- 2014年
- 目的:探讨Ionomycin诱导精子顶体反应的效果.方法:收集小鼠附睾尾精子,体外获能后用不同终浓度的Ionomycin处理相同时间,以及用相同浓度的Ionomycin处理不同时间.FITC-PNA染色观察并统计精子顶体反应率.结果:用终浓度为1、5、10、50μmol/L Ionomycin处理1 h的精子AR率分别为31.6%、52.2%、57.4%和64.0%.用终浓度为5μmol/L的Ionomycin处理10、30、45、60、120、180 min的精子AR率分别为17.2%、25.0%、41.2%、52.2%、54.0%和55.0%.结论:Ionomycin可以诱导小鼠精子的顶体反应,且顶体反应率随着浓度和诱导时间的变化而变化.
- 姚冠颖曹佐武
- 关键词：小鼠顶体反应精子
- 胎儿生长受限的孕妇脂质过氧化与脐动脉血流相关性探讨被引量：11
- 2012年
- 目的:探讨脂质过氧化作用在胎儿生长受限(FGR)发病机制中可能发挥的作用以及FGR孕妇脂质过氧化作用与脐动脉血流阻力变化的相关性。方法:以正常孕妇为对照,选择孕32周后诊断为FGR,经应用L-精氨酸和扩容等治疗后超声多普勒脐动脉血流S/D比值恢复正常的足月分娩的单胎妊娠孕妇38例为研究对象,分别对孕晚期治疗前和孕足月临产前的经抹洗新鲜中段尿液进行抗原标记酶联免疫法测定8-异前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)的水平,并分析相关的临床指标和妊娠结局。结果:FGR组孕晚期尿液8-iso-PGF2α水平显著高于正常妊娠组,差异有统计学意义(P<0.05);FGR孕妇经临床治疗后,孕足月时尿液8-iso-PGF2α水平仍显著高于正常妊娠组,且显著高于自身对照的孕晚期组,差异有统计学意义(P<0.05);FGR组孕晚期在治疗前血细胞比容(HCT)、脐动脉血流收缩期峰值与舒张期峰值的比值(S/D)、血流阻力指数(RI)和血流脉动指数(PI)明显高于正常妊娠组(P<0.05),但分别与尿液8-iso-PGF2α水平无显著相关性(P>0.05)。结论:FGR孕妇孕期体内的脂质过氧化作用明显增强;FGR孕妇脐动脉血流阻力明显增高,可能与脂质过氧化作用增强无关。
- 吴莉莉刘培艳肖小敏
- 关键词：脂质过氧化脐动脉血流胎儿生长受限
- 人工合成相关寡肽抑制流产发生的免疫机制研究被引量：3
- 2010年
- 研究寡肽蛋-苏-精-缬(MTRV)抑制多聚次黄苷酸-胞苷酸(poly I∶C)诱发的小鼠胚胎吸收的免疫机制。给予异基因妊娠BALB/c×C57BL/6小鼠腹腔注射poly I∶C建立诱发性胚胎吸收模型;在孕期多个时点腹腔注射MTRV,观察其对胚胎吸收率的影响,并采用流式细胞术检测妊娠9.5 d和13.5 d妊娠子宫内各种免疫活性细胞的百分率。结果显示,MTRV不能显著改变poly I∶C所引起的Toll样受体3阳性细胞和CD80阳性细胞增多,但是可显著抑制poly I∶C所引起的IFN-γ阳性细胞增多和转化生长因子-β阳性细胞减少,并降低流产率。提示寡肽MTRV可纠正poly I∶C所引起的妊娠子宫内细胞因子表达紊乱,从而抑制poly I∶C所诱发的流产。
- 王丽丽曾山孙Nisar Khan林羿Robbert Benner芦春斌
- 关键词：流产母-胎界面免疫调节免疫耐受
