江苏省高校自然科学研究项目(09KJB550003)
- 作品数：3 被引量：13H指数：2
- 相关作者：杨瑶潘道东黄茜黄璐曾小群更多>>
- 相关机构：南京师范大学宁波大学更多>>
- 发文基金：江苏省高校自然科学研究项目国家高技术研究发展计划“十一五”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程更多>>
- 植物乳杆菌Lactobacillu plantarumY1菌株胆盐水解酶基因(bsh)的克隆及重组表达被引量：8
- 2010年
- 经同源蛋白比对分析设计引物,PCR扩增获得植物乳杆菌Y1菌株bsh基因(975 bp),首先克隆至表达载体pET-28a,转化E.coli BL21(DE3)菌株,IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析结果显示表达的重组蛋白为包涵体.选择能为大肠杆菌稀有密码子提供额外tRNA的E.coli Rosetta(DE3)作为宿主菌,仍旧没有改善表达产物的可溶性.但是,选择含IF2融合蛋白标签的pLS-IF2质粒构建表达载体,SDS-PAGE分析及Western blot鉴定结果显示表达的融合重组蛋白IF2-BSH具有可溶性.该结果为进一步研究乳酸菌胆盐水解酶的生物活性,结构功能关系的研究奠定了基础.
- 黄茜黄璐潘道东杨瑶
- 关键词：植物乳杆菌胆盐水解酶原核表达
- 降胆固醇活性发酵乳杆菌F1发酵酸乳制备条件的研究被引量：1
- 2010年
- 以发酵乳杆菌F1发酵制备酸乳,以接种量、发酵时间和发酵温度为考察因素,结合以感官评分为指标的响应面分析方法,确定发酵乳杆菌F1发酵酸乳的最佳发酵条件为:接种量4%、发酵时间8h、发酵温度39℃。利用该条件发酵的酸乳,其胆固醇降解率达到49.16%,比优化前胆固醇的降解率提高了8.79%。
- 杨瑶曾小群潘道东
- 关键词：发酵乳杆菌降胆固醇响应曲面法
- 重组融合蛋白MBP-BSH在大肠杆菌中的表达及其纯化、功能鉴定被引量：7
- 2012年
- 选择IF2融合标签,另选择含SUMO、GST、NusA和MBP融合标签的质粒构建表达载体。SDS-PAGE电泳结果显示,重组菌Escherichia Rosetta(DE3)(pLS932-BSH)的诱导表达细胞提取液上清出现了明显的融合蛋白MBP-BSH条带,经诱导表达条件优化后,MBP-BSH可溶性大幅度提高。用Ni-NTA Resin和Amylose Resin分别进行目标蛋白纯化,结果显示前者效果更好,并且C端融合His-Tag更有利于其与Ni离子结合,MBP-BSH蛋白纯化量更大,杂带更少。茚三酮显色反应测定酶活力,结果显示纯化后的MBP-BSH的酶比活力为2.4282U/mg。
- 黄茜黄璐潘道东杨瑶
- 关键词：表达纯化胆盐水解酶
