目的:检测室内空调机滤尘网中粉尘螨1类变应原(Dermatophagoides farinae 1,Der f 1)、屋尘螨1类变应原(Dermatophagoides pteronyssinus 1,Der p 1)和腐食酪螨1类变应原(Tyrophagus putrescentiae 1,Tyr p 1)。方法:分别从安徽合肥、芜湖、淮南、淮北4个城市采集室内空调机滤尘网灰尘,提取总DNA进行Der p 1、Der f 1、Tyr p 1特异性扩增、克隆测序和比对分析。结果:所采集的144份样本中,Der f 1、Der p 1和Tyr p 1基因的阳性检出率分别为22.92%(33/144)、20.83%(30/144)和6.94%(10/144),其中Der f 1和Der p 1基因阳性检出率较高。同时,检出的3种变应原基因与Genbank数据库上已上传的基因序列均具有较高的同源性。另外有16.67%(24/144)的样本同时检出Der f 1和Der p 1;2.08%(3/144)的样本同时检测出Der f 1、Der p 1和Tyr p 1,且检测阳性结果多集中采集于合肥、芜湖样本。结论:安徽地区的空调机滤尘网灰尘中含有引起过敏性疾病的Der f 1、Der p 1、Tyr p 1变应原,应当重视室内空调的定期清洗,定期更换滤尘网以减少尘螨和腐食酪螨的孳生。
目的探讨粉尘螨变应原Derf1mRNA疫苗对哮喘小鼠的特异性免疫治疗效果。方法 50只BALB/c小鼠随机分为5组(10只/组),分别为PBS组、Derf1变应原致敏组、Derf1变应原免疫治疗组、β-actin mRNA免疫治疗组和Derf1 mRNA免疫治疗组。分别于第0、第7和第14天,PBS组小鼠腹腔注射PBS,其余4组小鼠则腹腔注射10μg Der f 1进行致敏,建立小鼠哮喘模型。自第21天起,除PBS组小鼠雾化吸入PBS,其他4组小鼠均雾化吸入100μg/ml Der f 1变应原,30 min/次,1次/d,连续7 d,观察并记录小鼠哮喘发作情况。5组小鼠于最后1次雾化吸入致敏2周后,背部皮下分别注射100μl PBS、1μg Der f1(维持致敏)、10μg Derf1(免疫治疗)、2μgβ-actin mRNA和2μg Derf1mRNA,1次/周,连续3周。最后1次皮下注射后2周处死小鼠。收集各组小鼠的支气管肺泡灌洗液(BALF),ELISA法检测γ干扰素(IFN-γ)和白介素13(IL-13)水平,并计数嗜酸粒细胞(EOS);收集各组小鼠脾组织,分离脾细胞,除PBS组外,其他4组均加入10μg/ml Der f 1培养72 h,ELISA法检测脾细胞培养上清液中IFN-γ和IL-13水平;取各组小鼠眼球血,ELISA法检测血清中总IgE以及变应原特异性IgE(sIgE)、IgG1(sIgG1)和IgG2a(sIgG2a)抗体水平。HE染色观察各组小鼠肺组织切片。结果除PBS组外,其他4组小鼠雾化吸入致敏后,均出现急性哮喘发作症状。小鼠BALF中,Der f 1 mRNA免疫治疗组和Der f 1免疫治疗组的IFN-γ水平分别为(897.56±105.73)和(864.48±70.62)pg/ml,均明显高于Derf1变应原致敏组[(209.05±52.28)pg/ml]和β-actin mRNA免疫治疗组[(219.47±64.72)pg/ml](P<0.01);两者IL-13水平分别为(241.64±31.41)和(321.94±41.07)pg/ml,则明显低于Derf1变应原致敏组[(520.62±43.77)pg/ml]和β-actin mRNA免疫治疗组[(507.22±42.26)pg/ml](P<0.01);两者EOS数量分别为(1.33±0.44)×105和(1.48±0.39)×105个/ml,均明显低于Derf1变应原致敏组[(3.54±0.52)×105个/ml]和β-actin mRNA免疫治疗组[(2.98±0.53)×105个/ml](P<0
