河南仰韶生化工程有限公司
- 作品数：62 被引量：172H指数：8
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- 一种提高枯草芽孢杆菌发酵液中α‑淀粉酶活的方法
- 本申请属于生物发酵工程技术领域，具体涉及一种提高枯草芽孢杆菌发酵液中α‑淀粉酶活的方法。该方法通过采用基因工程方法对枯草芽孢杆菌菌株基因组进行改造实现，具体包括：PCR克隆扩增sdpBC部分序列DNA、酶切和连接、转化、...
- 焦国宝孙利鹏邱立友高玉千黄涛田芳刘仲敏
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- 食品级液体木聚糖酶生产新工艺
- 本发明公开了一种食品级液体木聚糖酶生产新工艺，该工艺通过UV、NTG、羟胺化学诱变及离子束处理等方法，选育出高活性木聚糖酶黑曲霉菌株YSXL－469(Aspergilusniger)，对产酶菌株相关特性和产酶条件进行改进...
- 焦新民刘胜利茹群朵肖庆龙王耀民常东民郭巧丽张春梅
- 文献传递
- 一种高耐热普鲁兰酶的克隆表达、酶学性质及其在粉丝制作中的应用被引量：2
- 2020年
- 为了获得一种适合在粉丝制作中使用的高耐热普鲁兰酶,对Thermus thermophilus的普鲁兰酶基因进行了异源表达及应用性质研究。以T.thermophilus XQ5331基因组DNA为模板,通过PCR方法扩增获得普鲁兰酶编码基因TtP5331,在大肠杆菌中实现高效表达。重组酶TtP通过离子交换层析获得初步纯化。酶学性质研究结果显示,重组酶最适作用温度为75℃,最适pH6.5,在最适条件下比酶活为17 U/mg。重组酶TtP在90℃下保温10 min仍能保留约60%的酶活,沸水浴5 min可以完全灭活。在传统粉丝制作工艺基础上,采用先加酶后制芡糊的方式制作粉丝,按照每克芡糊淀粉1 U的量添加TtP处理芡糊,制作的粉丝的断条率为4.5%,与添加明矾获得的粉丝基本一致。以上结果说明,在酶法粉丝制作工艺中,TtP适合在芡糊制作前在淀粉悬液中添加,是一种用量小、使用简便的明矾替代物。
- 孙利鹏德青美朵朱新文姚雁王婕祝冬君沈微
- 关键词：粉丝普鲁兰酶异源表达
- 启动子替代构建克雷伯氏菌普鲁兰酶高产菌株
- 2015年
- 应用启动子替代技术将普鲁兰酶产生菌克雷伯氏菌（Klebsiellasp．）HN9的普鲁兰酶基因的启动子替换为枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis）的P43启动子，构建高产酶菌株。通过融合PCR，将由3个DNA片段融合得到启动子替代同源重组片段，该3个DNA片段分别是带有克雷伯氏菌普鲁兰酶基因启动子上游部分同源序列的四环素抗性基因（Tet）的上游片段Tet1、带有枯草芽孢杆菌P43启动子部分上游同源序列的Tet下游片段Tet2和带有克雷伯氏菌普鲁兰酶基因上游同源序列的P43启动子部分序列的Pro。经电转化将同源重组片段导入克雷伯氏菌中，转化子的普鲁兰酶基因表达水平比出发菌株提高10．23～11．45倍，摇瓶发酵酶活力提高8．97～10．52倍。结果表明，应用高效组成型启动子P43替代原始菌株的普鲁兰酶基因的启动子能够显著提高普鲁兰酶基因的表达量和发酵酶活力。
- 许苗苗焦国宝王明道孙利鹏刘仲敏邱立友
- 关键词：克雷伯氏菌普鲁兰酶
- 极端嗜热菌Thermosipho melanesiensis普鲁兰酶基因的异源表达与酶学性质分析
- 2018年
- 选择来源于极端嗜热菌Thermosipho melanesiensis(DSM12029)的普鲁兰酶基因,以购自德国菌种保藏中心的基因组为模板,扩增出普鲁兰酶基因TM-pulA;利用酶切酶连构建了重组质粒pET21a-TM-pulA;转入大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株中诱导表达并经纯化后,进行了水解产物分析和酶学性质测定.结果显示:TM-pulA为Ⅰ型普鲁兰酶,最适pH为5.8;最适温度是80℃;70℃下半衰期为4.75 h;Mn^(2+)、Co^(2+)、AL^(3+)、Fe^(3+)、SDS及EDTA对其酶活有不同程度的抑制作用;该酶的K_m、V_(max)、K_(cat)及K_(cat)/Km值分别为4.68 g·L^(-1)、0.0085 mmol·L^(-1)·s^(-1)、71.18 s^(-1)、15.21 L·g^(-1)·s^(-1).
- 王明道邢岩邱爽王红阳孙利鹏邱立友
- 关键词：普鲁兰酶异源表达酶学性质
- 天蚕素抗菌肽对产蛋后期蛋鸡生产性能、 蛋品质及肠道黏膜形态的影响被引量：20
- 2020年
- 试验旨在研究饲粮中添加不同水平抗菌肽对产蛋后期蛋鸡生产性能、蛋品质和肠道黏膜形态的影响。试验选用70周龄产蛋率相近的海兰褐蛋鸡270只,随机分为3个处理,每处理6个重复,每个重复15只鸡,分别为对照组(基础饲粮)、试验Ⅰ组(基础饲粮+50 mg/kg天蚕素抗菌肽)、试验Ⅱ组(基础饲粮+100 mg/kg天蚕素抗菌肽),预饲期7 d,正试期45 d。结果表明:(1)试验Ⅰ、Ⅱ组料蛋比显著降低(P<0.05),试验Ⅱ组产蛋率显著高于试验Ⅰ组与对照组(P<0.05),试验Ⅰ组与对照组无显著差异(P>0.05)。(2)与对照组相比,试验Ⅰ、Ⅱ组蛋鸡的蛋壳厚度、蛋壳强度、蛋形指数、蛋白高度、哈氏单位、蛋黄相对重、蛋壳相对重、蛋黄胆固醇含量均无显著变化(P>0.05)。(3)与对照组相比,试验Ⅰ、Ⅱ组回肠绒毛高度显著提高(P<0.05),十二指肠、空肠绒毛高度以及十二指肠、空肠、回肠隐窝深度、VH/CD值、肠壁厚度无显著变化(P>0.05),但回肠肠壁厚度试验Ⅰ组显著低于试验Ⅱ组(P<0.05)。由此可见,在产蛋后期蛋鸡饲粮中添加适宜剂量抗菌肽(100 mg/kg)可提高蛋鸡生产性能,改善肠道黏膜形态。
- 张耀文马文峰张志丹刘方圆王杰曹忠洋王占彬
- 关键词：天蚕素抗菌肽蛋鸡蛋品质
- 一种新的嗜热普鲁兰酶、制备方法及其应用
- 本发明属于普鲁兰酶制备技术领域，具体涉及一种新的嗜热普鲁兰酶、制备方法及其应用专利申请事宜。通过克隆特定嗜热菌 <I>Thermosipho </I><I>melanesiensis</I>（DSM1202）的普鲁兰酶基...
- 王明道聂慧慧邢岩王红阳张雨杭邱爽王旭焦国宝刘红记孙利鹏邱立友原增艳付香斌
- 文献传递
- 普鲁兰酶产酶基因、含有该基因的载体及其应用
- 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种能够提高普鲁兰酶比酶活和热稳定性的普鲁兰酶产酶基因、含有该基因的载体、及该载体在普鲁兰酶制备中的应用。该基因与保藏编号CGMCC？NO.10357的变栖克雷伯氏菌HN7的野生型普鲁...
- 王明道郭双聂慧慧张雨杭焦国宝陈晓慧孙利鹏邱立友时延光王红阳郜峰原增艳付香斌
- 文献传递
- 一株产普鲁兰酶细菌的分离鉴定及其发酵条件优化被引量：1
- 2014年
- 从淀粉加工厂附近土壤中筛选得到一株普鲁兰酶高产菌株,编号为Z-13,其初始酶活达到5.7 U/mL.通过对此菌株的16S rDNA比对,以及生理生化鉴定,鉴定此菌株为克雷伯氏菌(Klebsiella variicola),通过发酵条件优化,确定最佳发酵产酶条件为:玉米淀粉1.5%,蛋白胨2.0%,KH2PO40.05%,MgSO4·7H2O 0.01%.装液量为70 L/250 L,培养基最初pH为6.0,发酵温度30℃,摇床转速200 r/min,发酵时间48 h,优化后菌株产普鲁兰酶的酶活高达67.8 U/mL,是优化前菌株产普鲁兰酶活性的11.89倍.
- 王明道郭双张雨杭孙利鹏时延光邱立友
- 关键词：普鲁兰酶产酶条件优化
- 一种提高枯草芽孢杆菌发酵液中α‑淀粉酶活的方法
- 本申请属于生物发酵工程技术领域，具体涉及一种提高枯草芽孢杆菌发酵液中α‑淀粉酶活的方法。该方法通过采用基因工程方法对枯草芽孢杆菌菌株基因组进行改造实现，具体包括：PCR克隆扩增sdpBC部分序列DNA、酶切和连接、转化、...
- 焦国宝孙利鹏邱立友高玉千黄涛田芳刘仲敏
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