复旦大学上海医学院生物化学与分子生物学系
- 作品数：276 被引量：1,152H指数：17
- 相关作者：王丽影张英靳嘉巍王霞侯敏更多>>
- 相关机构：复旦大学附属中山医院复旦大学附属华山医院复旦大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市教育委员会重点学科基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 水稻叶绿体DNA的提取和纯化被引量：3
- 1989年
- 以籼稻品种珍讪97B为材料,采用溶液捣碎和不连续蔗糖梯度离心的方法提取了籼稻的叶绿体DNA,DNA经限制性内切酶酶解和琼脂糖胶电泳可以得到清晰的条带,来自蚕豆的核酮糖—1,5—二磷酸羧化氧合酶大亚基基因探针和23SrRNA基因探针可以与酶切条带杂交,由此确定了含这二种基因的BamHI酶切片段。
- 沈志伟孙崇荣朱俭
- 关键词：水稻叶绿体DNADNA提取
- 水稻脂质转移蛋白cDNA结构及相应肽链构造特征的分析被引量：1
- 1997年
- 从水稻(Oryza sativa L.ssp.indica)“广陆矮4号”黄化苗cDNA库中分离到一个与其它植物脂质转移蛋白(LTP)基因同源性很高的cDNA克隆(pFDRSC144)。完成了pFDRSC144克隆中840bp插入片段全顺序的测定。结果表明,该片段包含354个碱基的编码区,编码118个氨基酸,其中包括26个氨基酸组成的信号肽。从疏/亲水性分布曲线可看出,该肽链形成的分子具有很大范围的疏水面。按Garnier二维结构预测法显示成熟蛋白的肽链主要以β-折叠肽链的形式存在,推测可能形成一种有利于脂质传送的开放性管形构造。Southern杂交分析表明,LTP基因在水稻基因组中以基因家族的形式存在。
- 詹树萱葛晓春李耕孙崇荣曹凯鸣
- 关键词：水稻CDNA肽链
- Prohibitin 1 的上调参与肝癌细胞的增殖和迁移被引量：3
- 2011年
- 尽管已知prohibitin1(PHB)与肿瘤有关,但很少有关于PHB在肝癌中的作用的报道.前期的糖蛋白质组学研究显示,PHB在高转移肝癌细胞株MHCC97-H细胞中被上调,且它可以被麦胚凝集素WGA所吸附.在本研究中,通过Western blotting和逆转录PCR实验证实,PHB在MHCC97-H细胞中的表达被上调约2倍.当PHB在MHCC97-H细胞中被过表达时,细胞增殖被抑制35%,细胞迁移率提高约2倍.本研究结果表明,PHB在MHCC97-H细胞中被上调,而且这种上调与肝癌细胞的增殖和迁移有关.
- 许志宾吴金鸿查锡良
- 关键词：糖基化凝集素PROHIBITIN上调
- 2型糖尿病葡萄糖应激与抗氧化代偿的变化被引量：27
- 2009年
- 目的利用2型糖尿病不同病程人群空腹及葡萄糖口服应激模型,研究葡萄糖应激对人体自由基代谢指标变化的影响,探讨血糖波动与氧化应激水平和机体抗氧化代偿能力的关系,以探明自由基对糖尿病不同病程的介导规律。方法分为健康对照组(CO)、糖尿病前期组(DP)、糖尿病组(DM)和糖尿病并发症组(DC),每组选30例。氧化应激指标的测定:各组取空腹及口服葡萄糖液(GS)后2 h的肘静脉血各5 mL,检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2)、维生素C(VC)和总抗氧化能力(T-AOC)。结果空腹氧化水平各组依次:DC>DM>DP>CO;还原水平除DP组SOD活力高于CO组,各组总体随糖代谢异常程度加剧呈下降趋势。葡萄糖应激2 h后各组自由基氧化还原水平排列类同空腹。GS干预前后比较,干预后各组H2O2水平都有不同程度提高,但还原水平各组有不同,CO与DP组在GS干预后,T-AOC水平比干预前都升高。随糖代谢异常程度加剧,氧化应激水平逐步增高,抗氧化能力逐趋下降,氧化损伤产物MDA增多。GS应激后,CO、DP组的总体抗氧化能力T-AOC显示代偿性增高,而DM、DC组无此效应。结论氧化应激在2型糖尿病的病理发展过程中起重要作用;CO与DP组所具的抗氧化代偿能力,提示对糖尿病的早期诊断和早期有效干预具有重要意义。
- 谢飞舟施冬云肖玲刘精东刘珊林
- 关键词：2型糖尿病氧化应激活性氧
- 胚胎干细胞来源的内皮细胞构建内皮化血管支架被引量：2
- 2007年
- 目的探索胚胎干细胞定向分化为血管内皮细胞,并用于构建内皮化血管支架,为临床心血管疾病治疗提供实验基础。方法采用改良后单层分化体系,血管内皮生长因子(VEGF)作为独立诱导因子定向诱导胚胎干细胞分化为血管内皮细胞,用RT-PCR法检测分化时程各时间点内皮特异性标志的表达,用免疫荧光法检测分化体系中的内皮细胞蛋白标志。将分化成熟的内皮细胞种植于支架表面,构建内皮化血管支架。结果胚胎干细胞全能性分子标志Oct3／4,早期内皮标志Flk-1,Tie-2,PECAM-1,以及成熟内皮标志VE-cadherin在胚胎干细胞分化体系中呈现一定的转录时序性;免疫荧光结果显示分化细胞Flk-1,VE-cadheiin阳性,血管支架被表达VE-cadherin的内皮细胞覆盖。结论我们改良了胚胎干细胞分化为血管内皮细胞的方法,并用于探索内皮化血管支架的构建。
- 钟贞杨健李平谭理应其龙宋后燕
- 关键词：胚胎干细胞分化
- 胆固醇结石病人与正常人胆囊胆汁的蛋白质表达谱比较分析被引量：4
- 2008年
- 目的比较分析胆固醇结石病人与正常人胆囊胆汁蛋白表达谱的差异，为阐明胆石成因提供实验依据。方法提取胆固醇结石病人和正常人胆囊胆汁总蛋白，构建相应的双向电泳蛋白质表达谱．直用ImageMaster图像分析软件获得差异蛋白点信息。结果胆固醇结石病人与正常人胆囊胆汁总蛋白浓度分别为（6．4824±0．3403）mg／ml和（2．3156±0．3064）mg／ml（P〈0．01）。两组组内蛋白质平均匹配点数分别为465±71和407±85．平均匹配率为71．70％和68．38％，组间269个蛋白质点相互匹配，匹配率为61．70％。胆固醇结石组蛋白表达谱显著差异点34个，16个表达上调，18个表达下调。结论初步建立了胆固醇结石病人和正常人胆囊胆汁蛋白表达谱，发现两者存在差异蛋白质点，为筛选胆石形成关键调控子提供基础。
- 张殿彩项建斌蔡端许志宾王丽影查锡良
- 关键词：双向凝胶电泳蛋白质组胆汁
- 医学生物化学教学改革探索
- 王丽影张英汤其群查锡良
- 核受体FXR及其激动剂在肿瘤中的相关研究
- 目的:研究核受体FXR在肝癌中的表达,进一步研究FXR激动剂对于肿瘤细胞的作用,探讨FXR是否可能成为干预和治疗肝癌的靶点分子。方法:利用Realtime PCR,Western blot检测肝癌组织(T)与癌旁组织(N...
- 吴维斌孙智超彭小敏张颂文
- 文献传递
- 小麦等谷类植物种子贮藏蛋白基因的表达与调控被引量：6
- 1995年
- 孙崇荣黄伟达
- 关键词：小麦禾谷类作物种子基因表达
- 缺氧对小鼠角膜血管内皮生长因子及可溶性fms-样酪氨酸激酶受体-1表达的影响
- 2008年
- 目的观察缺氧对小鼠角膜组织中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）及可溶性fins一样酪氨酸激酶受体-1（soluble fms-like tyrosine kinase receptor-1, sFlt-1 ）表达的影响并探讨两者之间的关系。方法实验用健康雌性成年昆明小鼠70只，分为缺氧组和正常对照组，缺氧仓的氧气体积分数为8％～10％，缺氧时间分别为1、3、5、7、10、14d。用变性Western blot技术检测小鼠在缺氧条件下角膜组织中总VEGF表达的变化，用非变性Western blot技术检测小鼠在缺氧条件下角膜组织中游离及结合VEGF表达的变化，用逆转录聚合酶链反应技术检测小鼠在缺氧条件下角膜组织中VEGF、sFlt-1、缺氧诱导因子-1（hypoxia in-ducible巧玲珑factor-1，HIF-1）的基因表达变化。结果缺氧14d内未见小鼠角膜新生血管。缺氧组总VEGF及结合VEGF表达增加，随着缺氧时间的延长而增强，与正常对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05），但缺氧14d内均未见游离VEGF表达。缺氧组VEGF、sFh-1、HIF-1的基因表达均增加，随着缺氧时间的延长而增强，与正常对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05），其中VEGF的基因表达与HIF．1的基因表达呈正相关（r=0．993），sFlt-1的基因表达与HIF-1的基因表达呈正相关（r=0．997）。结论缺氧可以诱导小鼠角膜组织中VEGF和sFlt-1表达的增加，在缺氧的条件下，小鼠角膜组织中VEGF和sFlt-1呈平衡状态。sFlt-1可作为一种内源性VEGF拮抗因子治疗眼部新生血管性疾病。（中国眼耳鼻喉科杂志，2008，8：286-288）
- 徐瓅张朝然方征宇
- 关键词：缺氧血管内皮生长因子角膜小鼠
