温州医学院生命科学学院细胞与分子医学研究所
- 作品数：9 被引量：28H指数：3
- 发文基金：国家高技术研究发展计划浙江省自然科学基金温州市科技局科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 实时荧光定量分析SK-N-SH细胞中β-actin mRNA的半衰期被引量：1
- 2006年
- 目的:探讨和分析SK-N-SH细胞中β-actinmRNA的半衰期。方法:建立包含β-actin基因片断的pMD-T载体的梯度稀释曲线,应用VIC标记的Taqman-MGB探针进行检测,用Opticon2.02软件分析结果。以不同浓度和不同时间的放线菌素D阻断SK-N-SH细胞转录,提取总RNA并予荧光定量RT-PCR检测β-actinmRNA。结果:SK-N-SH细胞中β-actinmRNA的半衰期为4h。与未处理组相比,4h组β-actin的拷贝数差异有显著性(P<0.05),12h和24h组β-actin拷贝数差异有极显著性(P<0.01)。不同浓度之间放线菌素D对β-actin拷贝数的影响差异不大(P>0.05)。结论:应用实时荧光定量RT-PCR,通过比较mRNA与总RNA的拷贝数,建立了一种准确方便地检测mRNA衰减的方法。同时β-actin不适合做放线菌素D处理实验中的内参照。
- 胡昕吕建新
- 关键词：实时荧光定量SK-N-SHΒ-ACTINMRNA放线菌素D
- 帕金森病患者黑质和纹状体质子磁共振波谱研究被引量：2
- 2010年
- 目的研究帕金森病(PD)患者黑质和纹状体质子磁共振波谱变化,评价质子磁共振波谱技术用于PD的诊断和病理生理研究的价值。方法采用质子磁共振波谱技术检测50例PD与45例年龄匹配的健康对照者双侧黑质、纹状体N-乙酰天门冬氨酸(NAA)、胆碱复合物(Cho)及肌酸复合物(Cr)含量,比较NAA/Cr、Cho/Cr、NAA/Cho比值。结果 PD患者黑质NAA/Cr比值较正常组小(<0.05),两组NAA/Cho、Cho/Cr比较,差异均无统计学意义(均>0.05)。两组纹状体NAA/Cho、NAA/Cr、Cho/Cr比较,差异均无统计学意义(均>0.05)。结论 NAA/Cr降低是评估PD患者神经元功能损害的重要指标。磁共振波谱技术可作为无创性研究PD病理生理过程和诊断的方法。
- 陈昆明闻彩云陈为安章圣辉胡昕何金彩
- 关键词：帕金森病黑质纹状体磁共振波谱学
- ABPS诱导单核细胞HLA-DR表达(英文)被引量：7
- 2004年
- 目的 研究牛膝多糖 (ABPS)在体外激活单核细胞的效应。方法 采集健康成人抗凝血 ,用贴壁法分离单核细胞 ,调节细胞数接种到 2 4孔板。在 370 C ,5 %CO2 条件下 ,以同一时间不同ABPS浓度或同一ABPS浓度不同时间培养 ,用流式细胞术和电镜检测单核细胞的激活。结果 ABPS诱导单核细胞超微结构和HLA DR的改变。结论 ABPS上调HLA DR表达并能激活单核细胞。
- 王宇学彭颖吕建新金丽琴
- 关键词：牛膝多糖单核细胞HLA-DR
- 帕金森病脑白质高信号的磁共振研究被引量：3
- 2010年
- 目的:探讨帕金森病(PD)患者脑白质高信号(WMH)的磁共振影像特点及其与临床分级的关系。方法:对PD和正常对照组,采用核磁共振TW1、TW2和FLAIR成像技术观察影像学表现;对帕金森病患者的年龄、病程和分级与影像学的相关性进行分析。结果:PD患者可出现脑白质的异常高信号,出现率与对照组比差异无显著性;对照组和PD组WMH阳性患者的平均年龄高于WMH阴性患者,WMH阳性PD患者的病程与WMH阴性者比差异无显著性,而WMH阳性患者的分级较WMH阴性患者高;PD患者中深部脑白质高信号(DWMH)阳性者和脑室周围高信号(PVH)阳性者的年龄均较阴性者大,差异有显著性(P<0.01);DWMH阳性者的病程、分级与DWMH阴性者比差异均无显著性,PVH阳性者的病程与PVH阴性者比差异无显著性,但分级显著高于PVH阴性者。结论:PD患者的WMH与年龄、病程和临床分级有一定的相关性,WMH的病理机制有待进一步研究。
- 陈昆明闻彩云陈为安杨慧民章圣辉杨德业何金彩胡昕
- 关键词：帕金森病白质高信号核磁共振
- 蝉拟青霉多糖活性组分的筛选
- 2007年
- 目的:筛选出蝉拟青霉多糖中的活性组分。方法:体外培养小鼠黑色素瘤细胞B16,观察各多糖组分及其刺激脾细胞上清液对B16细胞的抑制作用。结果:经蝉拟青霉多糖组分PcPSA和PcPSB刺激的脾细胞上清液具有抑制B16细胞的作用。结论:经体外培养的B16细胞的抑制试验筛选出2个活性多糖组分PcPSA和PcPSB。
- 金丽琴熊中奎吕建新
- 关键词：蝉拟青霉多糖类
- 乙酰胆碱及其拮抗剂对人SK-N-SH细胞增殖及mAchR1表达的影响
- 2005年
- 用CCK-8比色法和流式细胞术,检测乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)及拮抗剂阿托品(atropine,Atro)对SK-N-SH细胞增殖活性和周期分布的调节作用;进一步用荧光定量PCR、免疫印迹和流式细胞间接免疫荧光技术,分析SK-N-SH细胞毒蕈碱受体亚型型(mAchR1)和c-fos的表达差异。结果表明,1mmol/L Ach对SK-N-SH细胞有明显促增殖作用,而1mmol/L Atro阻滞细胞从S期向G2/M期移行;1mmol/L Ach与1mmol/L Atro均反馈调节mAchR1的蛋白水平,但mAchR1mRNA的表达不受影响;1mmol/L Ach显著上调c-fos mRNA和Fos蛋白的表达,但这种作用可被Atro逆转。提示胆碱类受体参与配基对肿瘤细胞的促增殖作用。
- 胡昕吕建新
- 关键词：乙酰胆碱SK-N-SH细胞拮抗剂毒蕈碱受体亚型间接免疫荧光技术
- 多重荧光定量PCR对mAchR1表达相对定量分析被引量：1
- 2007年
- 目的:建立多重荧光通道定量PCR方法研究乙酰胆碱Ach对毒蕈碱受体mAchRsⅠ型基因表达的影响。方法:分别用FAM和VIC不同荧光素标记的MGB-TaqMan探针同时对靶基因和看家基因的转录拷贝数进行多色多通道测定。结果:多重荧光通道定量PCR与单通道荧光定量PCR比较没有差异。Ach作用SK-N-SH细胞24h和72h后mAchR1表达分别上调1.38倍和下降6.71倍(P<0.01)。结论:MGB-TaqMan探针技术在多重荧光RT-qPCR技术中具有高灵敏度和高重复性。Ach对mAchR1 mRNA表达水平有调节作用,并有时间效应。
- 胡昕吕建新
- 关键词：多重荧光基因表达
- 创伤弧菌细胞素致病机制的研究进展被引量：12
- 2006年
- 创伤弧菌是一种致病性极强的嗜盐性细菌,能够引起伤口炎症,严重时会导致败血症的发生。肺可能是其作用的主要靶器官。创伤弧菌溶细胞素作为它的主要毒力因子之一,在感染过程中可通过多种机制发挥重要的致病作用,但其确切的致病机制至今尚未完全阐明。现将近年来有关创伤弧菌溶细胞素的致病机制方面的相关研究作一综述。
- 李桂军楼永良
- 关键词：细胞毒素类
- 乙酰胆碱及其拮抗剂对人SK-N-SH细胞增殖及mAchR1表达的影响被引量：2
- 2005年
- 用CCK-8比色法和流式细胞术,检测乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)及拮抗剂阿托品(at-ropine,Atro)对SK-N-SH细胞增殖活性和周期分布的调节作用;进一步用荧光定量PCR、免疫印迹和流式细胞间接免疫荧光技术,分析SK-N-SH细胞毒蕈碱受体亚型Ⅰ型(mAchR1)和c-fos的表达差异。结果表明,1mmol/LAch对SK-N-SH细胞有明显促增殖作用,而1mmol/LAtro阻滞细胞从S期向G_2/M期移行;1mmol/LAch与1mmol/LAtro均反馈调节mAchR1的蛋白水平,但mAchR1mRNA的表达不受影响;1mmol/LAch显著上调c-fosmRNA和Fos蛋白的表达,但这种作用可被Atro逆转。提示胆碱类受体参与配基对肿瘤细胞的促增殖作用。
- 胡昕吕建新
- 关键词：乙酰胆碱拮抗剂细胞增殖中枢神经
