大连工业大学生物工程学院辽宁省发酵工程重点实验室
- 作品数：21 被引量：148H指数：8
- 相关作者：田思迪王增利李云芳李毅杨小兵更多>>
- 相关机构：大连民族学院生命科学学院中央民族大学中国少数民族传统医学研究院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省教育厅高等学校科学研究项目河南省杰出人才创新基金更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学医药卫生更多>>
- 金铁锁毛状根诱导及培养体系的建立被引量：29
- 2011年
- 目的:研究金铁锁毛状根制备方法及液体培养条件,为规模化生产金铁锁提供技术支持。方法:利用发根农杆菌ACCC10060菌株侵染金铁锁幼叶及茎段。结果:将外植体与菌液(A6000.8)在含有20 mg.L-1乙酰丁香酮的B5培养基上共培养48 h,可以有效地诱导金铁锁毛状根;叶片比茎段的诱导率高。转化的毛状根具有激素自养和抗卡那霉素的特性,并且组织中含有冠瘿碱,证明该菌对金铁锁组织成功地进行了转化。在无激素的1/2 MS液体培养基中培养35 d后,金铁锁毛状根生物量增加了14.11倍(鲜重)和8.39倍(干重),其总皂苷为0.857%(干重),愈伤组织和原植物中分别为0.388%,0.217%。结论:金铁锁毛状根离体培养系统的成功建立,对进一步规模化培养金铁锁毛状根具有重要意义。
- 李景滨刘同祥王培忠张宗申
- 关键词：金铁锁毛状根发根农杆菌
- 热处理对海参溶菌酶C端多肽的抑菌活性和结构的影响被引量：3
- 2014年
- 实验优化了重组蛋白C端多肽（SjLys-C）的E. coli Rosetta（DE3）pLysS表达系统,将重组质粒pET-32a （＋）-SjLys-C转入有助于蛋白二硫键正确折叠的新表达宿主E. Coli Rosetta-GamiB（DE3）pLysS中. SDS-PAGE分析表明,重组蛋白SjLys-C在宿主中得到高效可溶表达.抑菌实验结果表明,重组蛋白SjLys-C具有较高的抑菌活性；经100℃处理40 min后,蛋白SjLys-C的抑菌活性提高.分子动力学（ MD）模拟表明, SjLys-C蛋白具有高度的热稳定性,蛋白热处理后未变性,仍维持完整的三级结构.但在热处理过程中, SjLys-C多肽的氨基酸残基随温度变化发生内部结构的重排.其中C端区、 N端区和活性区域（10~20）内氨基酸残基的柔性增加,蛋白整体构象展开,导致被包埋在内部的2个活性位点（Ser18, His48）暴露,并且它们之间的距离缩短；而活性区域（37~47）内氨基酸残基的构象调整,导致区域结构紧凑,使2个活性位点间的距离改变.
- 武瑶梁雯婧李成商旭丛丽娜
- 关键词：抑菌活性分子动力学模拟
- 大麦微生物对制麦和啤酒酿造的影响及其控制被引量：2
- 2008年
- 综述了大麦表面微生物的种类和变化,及其对制麦和啤酒酿造的影响,并总结了大麦表面霉菌控制方法的研究进展。
- 栾静赵长新
- 关键词：大麦微生物制麦啤酒酿造
- 大麦和麦芽水溶性蛋白提取方案的优化及双向电泳图谱的建立被引量：5
- 2012年
- 为了建立一套适用于大麦和麦芽的双向电泳分析方法,得到更加清晰、全面的双向电泳图谱。以高产优质大麦品种Gairdner为材料,对提取方法以及提取过程中所用的试剂的种类、用量和处理时间等进行比较分析和优化,运用蛋白定量法测定提取样品的蛋白质含量,摸索出一套完整的用于双向电泳分析的大麦蛋白提取和样品制备方法。大麦或麦芽经研磨,缓冲液-苯酚提取,醇洗,冻干后得到的蛋白质样品,双向电泳分离,硝酸银染色,PDQuest分析,图谱结果显示大麦检测到700个蛋白质点,麦芽检测到500个蛋白质点。这一方法的构建可作为大麦蛋白质组研究的重要工具,为今后大麦蛋白质组学以及对大麦品质改良的研究奠定了一定的基础。
- 夏先锋朴永哲沈海萍翟明昌成建国赵长新
- 关键词：大麦麦芽双向电泳
- 三七种子无菌育苗技术的研究被引量：1
- 2014年
- 目的研究获得生长整齐、健壮的三七幼苗的途径。方法将消毒后的三七种子置于培养基上进行无菌培养,对影响种子萌发和幼苗生长的因素进行优化。结果 20℃条件下培养60 d后,MS、1/2MS、B5、N6四种培养基中,MS培养基种子萌发率最高,达到80%,而N6培养基上种子萌发率最低;在种子培养过程中,暗培养条件下的种子萌发速度和萌发率均高于光照培养条件;去除果皮的种子出芽率最高,并且染菌率低。当将种子用赤霉素溶液处理,明显提高萌发率,20℃条件下培养45 d后,300 mg/L赤霉素溶液处理的种子出芽率接近90%。结论去掉三七种子的果皮,用浓度为300 mg/L的赤霉素浸泡后置于MS培养基中,在黑暗条件培养萌发效果最好。
- 李云芳金朝霞张宗申于振艳郭奇根
- 关键词：三七种子萌发出芽率
- 酿酒酵母FFC2146胞内蛋白及胞外蛋白双向电泳条件优化及图谱建立被引量：6
- 2011年
- 通过对酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的培养基、培养条件及蛋白质提取方案的优化,建立了酿酒酵母胞外和胞内蛋白双向电泳图谱制作方法。在YNB培养基中培养20 h,经过离心取上清-超滤-冻干可得到酿酒酵母胞外蛋白质样品;用SDS缓冲液悬浮酵母细胞-煮沸-超声-增溶,得到了酿酒酵母胞内蛋白质样品。经过双向电泳分离、硝酸银染色和PDQuest图像分析可以检测到了200多种酿酒酵母胞外蛋白和500多种酿酒酵母胞内蛋白。
- 王祥余朴永哲翟明昌王晓丹程贺赵长新
- 关键词：蛋白质双向电泳酿酒酵母
- 氮源和磷源对金铁锁毛状根悬浮培养的影响被引量：9
- 2013年
- 以生物量和总皂苷两个参数为指标,研究了氮源(NH+4,NO-3)与磷源(PO3-4)浓度对金铁锁毛状根悬浮培养过程中的影响。培养基中NH+4与NO-3的浓度比为1∶2时,毛状根生物量和总皂苷的收获量都达到最高值,PO3-4的浓度在6.25mmol/L时具有同样的效果;毛状根对培养液中NO-3和PO3-4吸收利用与其生长周期基本一致,它们的含量在20d左右下降到最低;综合考虑,氮源和磷源的最佳组合为NH+410mmol/L,NO-320mmol/L,PO3-46.25mmol/L。
- 刘军陈显化金朝霞王冰张宗申
- 关键词：金铁锁毛状根次级代谢
- 金属离子胁迫对酿酒酵母复制衰老过程中O2^-·与SOD的影响被引量：1
- 2013年
- 研究酵母老化过程中金属离子胁迫下,细胞内超氧阴离子自由基(O-2·)产生速率和超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化规律。添加铜、锌、锰单一离子和离子组合进行胁迫,同时设置对照实验。铜和锰离子胁迫作用明显,锌离子几乎没有作用。离子组合的胁迫作用大小顺序是锌锰、铜锰、铜锌,三者共同的胁迫作用是最显著。离子胁迫刺激酿酒酵母细胞内形成活性氧,同时激活超氧化物歧化酶,随着代数的增加,胁迫作用越强,同时各离子间存在协同作用。
- 尹亚辉付月刘宝祥陈佩佩袁方赵长新
- 关键词：超氧阴离子自由基
- 光强对悬浮培养下铁皮石斛原球茎生长的影响被引量：11
- 2014年
- 以长势均一、色泽深绿的铁皮石斛原球茎为试验材料,分别在1 000lx、2 000lx和3 000lx的光强下进行12h/d的光照培养,每隔7d测定其鲜质量、多糖含量、叶绿素含量及叶绿素a/b,研究光强对悬浮培养下铁皮石斛原球茎生长的影响。结果表明,2 000lx光强完全满足液体条件下铁皮石斛原球茎生长的要求,鲜质量和多糖(23.4%)的积累最高,同时叶绿素含量也最大,光强较低时,其叶绿素a/b值也较低,这与自然生境下铁皮石斛的相关参数一致。表明提供一定光强和光周期,采取悬浮方式规模化培养铁皮石斛原球茎是可行的。
- 杨小兵王增利史昊张宗申金朝霞
- 关键词：铁皮石斛原球茎光照叶绿素
- 高产谷胱甘肽酵母菌株的选育及其代谢通量分析被引量：12
- 2008年
- 利用UV和HNO2及其复合诱变处理S.cerevisiae的原生质,筛选得到ZnCl2和半胱氨酸抗性菌株S.cerevisiae YZM-14(ZnCl2r,Cysr),其谷胱甘肽(GSH)产量(84.72mg/L)、生物量(7.63g/L)及胞内GSH含量(11.10mg/g)分别是出发菌株的2.79倍、1.63倍和1.71倍,且性状稳定。根据细胞比生长速率和GSH得率变化曲线,将GSH生物合成过程分为三个阶段,第二阶段诱变菌株与出发菌株相比PP途径代谢通量增加8.1mmol/(g.h),GSH前体合成途径通量增加,且诱变菌株的有机酸分泌通量减少,提高了细胞的碳源利用效率,增大了GSH的生成。
- 俞志敏徐凯徐鹏汤佳鑫赵长新
- 关键词：谷胱甘肽酿酒酵母诱变育种代谢通量分析
