广东海洋大学海洋与气象学院海洋药物研究与开发重点实验室 作品数:18 被引量:73 H指数:6 相关作者: 王长秀 王艳平 杨培培 徐海瑛 更多>> 发文基金: 广东省自然科学基金 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 化学工程 更多>>
土贝母苷甲对人高转移巨细胞肺癌PGCL3细胞粘附、侵袭和迁移能力的影响 被引量:6 2008年 目的:探讨土贝母苷甲(下称苷甲)对人高转移巨细胞肺癌PGCL3细胞粘附、侵袭和迁移能力的影响。方法:PGCL3细胞经不同剂量苷甲处理24、48、72h,MTT法检测其对PGCL3细胞生长的影响;分别用重组基底膜侵袭模型、粘附基质分析、Transwell小室趋化运动模型研究苷甲对PGCL3细胞的粘附、侵袭和运动能力的影响;用酶谱法检测苷甲对PGCL3细胞分泌Ⅳ型胶原酶(MMP-2)能力及活性的影响。结果:苷甲明显抑制PGCL3细胞的生长,且呈剂量依赖关系,作用24、48、72h的IC50分别为15.70、14.20和13.32μmo.lL-1。苷甲1.25、2.50、5.00μmol·L-1处理PGCL3细胞24h,对PGCL3细胞侵袭能力的抑制率分别为28.7%、41.0%、57.5%;对PGCL3细胞迁移能力的抑制率分别为21.6%、35.2%、53.7%。苷甲降低PGCL3细胞MMP-2的分泌量及其活性,降低PGCL3细胞对层粘连蛋白、纤维粘连蛋白的粘附率,且呈一定的剂量依赖关系。结论:苷甲抑制人高转移巨细胞肺癌PGCL3细胞的粘附、侵袭和迁移能力,其对PGCL3细胞的侵袭和粘附的影响可能与其降低PGCL3细胞MMP-2的分泌量及其活性,降低PGCL3细胞对层粘连蛋白、纤维粘连蛋白的粘附率有关。 于立坚 马润娣 王长秀 黄来珍 张霄瑜 于廷曦关键词:土贝母苷甲 粘附 迁移 MMP-2 Sephadex G-25用于YML-1脱盐条件优化 被引量:3 2006年 廖铭能 苏伟明 于立坚 马润娣关键词:SEPHADEX 脱盐 重组福安泰-03融合蛋白表达条件的优化及其生物学活性检测 2012年 福安泰-03(FAT-03)是从赤魟组织中分离得到,具有强抗血管生成活性的蛋白。本研究通过DNA重组技术获得了重组福安泰-03(rFAT-03)融合蛋白,运用响应面试验设计法优化表达条件,采用GST亲和柱分离纯化表达蛋白,比较分析不同培养时间、诱导剂浓度、诱导温度和诱导时间对可溶性融合蛋白表达量的影响。结果表明,当培养时间为6.13h、诱导温度为19.71℃、诱导剂(IPTG)浓度为0.36mmol/L、诱导时间为13.60h条件下可获得较好的表达效果,可溶性目的蛋白GST-rFAT-03的得率为7.57mg/L。对获得的rFAT-03生物活性检测显示,rFAT-03能明显抑制鸡胚绒毛尿囊膜血管生成,且其效果与剂量相关。为后续对该蛋白的分离纯化和生物学功能研究奠定了基础。 张永平 马润娣 于立坚 苏伟明 廖铭能 黄来珍 于廷曦关键词:生物活性 血管生成促进剂SDY-08的促组织修复作用 被引量:1 2008年 目的研究血管生成促进剂SDY-08对组织修复的影响。方法MTT法检查SDY-08对ECV-304细胞生长的影响;鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)实验检查SDY-08对CAM血管生成的影响,小鼠背部创伤模型检查SDY-08对组织修复的影响;免疫组化法和Westernblotting检查SDY-08对血管内皮细胞生长因子(VEGF)、Bcl-2和Bax表达的影响。结果SDY-08(终浓度80μg/ml)作用ECV-304细胞12,24,36h,其生长促进率为28.1%、115.6%、81.4%;SDY-08(浓度1.6mg/m1)对CAM血管生成的诱导率为72.1%;SDY-08(浓度0.5mg/ml)提前2d使小鼠创面愈合;SDY-08上调创伤组织血管内皮细胞VEGF的表达,上调ECV-304细胞VEGF和抑凋亡基因Bcl-2的表达,下调促凋亡基因Bax的表达。结论SDY-08有明显的促血管生成和促组织修复作用,与其上调VEGF、Bcl-2的表达及下调Bax的表达密切相关。 王强 马润娣 于立坚 苏伟明 黄来珍 张霄瑜 于廷曦关键词:伤口愈合 血管内皮细胞生长因子 马氏珠母贝高F值寡肽在Caco-2细胞中吸收的初步研究 被引量:3 2011年 采用Caco-2单层细胞模型体外模拟马氏珠母贝高F值寡肽(PHFP)小肠吸收,研究结果显示:无论是AP面→BL面还是BL面→AP面,PHFP的吸收量均呈增加趋势。添加P-糖蛋白的专属抑制剂维拉帕米后,AP→BL的渗透系数由原来的6.83×10-7cm/min提高到8.16×10-7cm/min,而BL→AP渗透系数由8.84×10-7cm/min降低到2.20 10-7cm/min,说明PHFP溶液在Caco-2细胞中的转运存在外排泵的作用。并且,PHFP在Caco-2细胞转运过程中被细胞中所存在的代谢酶所代谢,而添加维拉帕米后,PHFP的代谢量有所降低。 郑惠娜 章超桦 吉宏武 秦小明 黄来珍关键词:马氏珠母贝 高F值寡肽 CACO-2细胞 土贝母皂苷抑制对苯二胺诱发豚鼠接触性皮炎效应的研究 被引量:3 2016年 目的:研究土贝母皂苷(Tubeimosides,TBMSs,简称皂苷)抑制对苯二胺诱发的豚鼠接触性皮炎的效应。方法:从土贝母块茎中提取分离出有效部位土贝母皂苷。实验所用皂苷的主要成分是土贝母苷甲和苷乙(简称苷甲、苷乙),以及微量土贝母苷丙(简称苷丙),其标志性成分苷甲的含量≥90%。采用异体和同体两种对照的局部涂皮封闭实验(Buehler test),研究皂苷对对苯二胺(p-phenylenediamine,PPDA)诱发豚鼠接触性皮炎的效应的影响。结果:异体和同体对照实验结果表明,皂苷提前或与PPDA混合应用,均可剂量依赖性地改善,甚至完全抑制PPDA诱发豚鼠接触性皮炎。一分子的土贝母皂苷能抑制或完全逆转6到12分子对苯二胺诱发的豚鼠接触性皮炎。结论:土贝母皂苷有显著抑制对苯二胺诱发豚鼠接触性皮炎的活性。 于立坚 张永平 马润娣 于廷曦关键词:土贝母皂苷 对苯二胺 接触性皮炎 Repair of glutamate-induced excitotoxic neuronal damage mediated by intracerebroventricular transplantation of neural stem cells in adult mice 2007年 Objective To investigate a possibility of repairing damaged brain by intracerebroventricular transplantation of neural stem cells (NSCs) in the adult mice subjected to glutamate-induced excitotoxic injury. Methods Mouse NSCs were isolated from the brains of embryos at 15-day postcoitum (dpc). The expression of nestin, a special antigen for NSC, was detected by immunocytochemistry. Immunofluorescence staining was carried out to observe the survival and location of transplanted NSCs. The animals in the MSG+NSCs group received intracerebroventricular transplantation of NSCs (approximately 1.0×10^5 cells) separately on day 1 and day 10 after 10-d MSG exposure (4.0 g/kg per day). The mice in control and MSG groups received intracerebroventricular injection of Dulbecco's minimum essential medium (DMEM) instead of NSCs. On day 11 after the last NSC transplantation, the test of Y-maze discrimination learning was performed, and then the histopathology of the animal brains was studied to analyze the MSG-induced functional and morphological changes of brain and the effects of intracerebroventricular transplantation of NSCs on the brain repair. Results The isolated cells were Nestin-positive. The grafted NSCs in the host brain were region-specifically survived at 10-d post-transplantation. Intracerebroventricular transplantation of NSCs obviously facilitated the brain recovery from glutamate-induced behavioral disturbances and histopathological impairs in adult mice. Conclusion Intracerebroventricular transplantation of NSCs may be feasible in repairing diseased or damaged brain tissue. 马娟 于立坚 马润娣 张永平 房娟芝 张霄瑜 于廷曦关键词:TRANSPLANTATION MICE 阿魏酸钠对慢性应激抑郁模型大鼠抗抑郁作用的实验研究 被引量:11 2009年 目的慢性不可预见性轻度应激大鼠抑郁模型检测阿魏酸钠的抗抑郁效果。方法66只SD雄性大鼠(体质量220~280g)随机分为对照组、慢性应激(模型)组、慢性应激+氟西汀(阳性对照)组和阿魏酸钠治疗(慢性应激+不同剂量阿魏酸钠)组,每组11只动物。长期不可预见性轻度应激+孤养复制大鼠慢性抑郁模型;阿魏酸钠腹腔注射(20mg·kg^-1·d^-1、40mg·kg^-1·d^-1、80mg·kg^-1·d^-1),持续28日。慢性应激期间测定动物的体质量和摄食量;开野、液体消耗试验检查动物行为;实验末行强迫游泳和组织病理学检查分析动物行为和海马组织形态学。结果成功建立慢性应激大鼠抑郁模型。阿魏酸钠治疗能部分逆转应激引起的动物的抑郁样表现。实验第4周末,阿魏酸钠治疗组(80mg/kg)大鼠的体质量增加量、糖水消耗量、运动和探究能力[分别为(88.06±7.83)g,(66.33±3.03)g,(25.10±4.90)分,(6.60±1.20)分,]均明显高于模型组[分别为(77.15±14.66)g,(40.75±6.05)g,(18.20±2.00)分,(3.20±0.60)分],强迫游泳不动时间(117.30±7.22)s则短于模型组(148.10±8.25)s,差异有显著性(P值分别为0.0425,0.0087,0.0409,0.0317,0.0025);阿魏酸钠治疗还能部分逆转应激引起的动物海马区神经元轻度水肿、变性。结论阿魏酸钠对慢性应激大鼠抑郁模型有明显的抗抑郁作用。 张永平 于立坚 廖铭能 马润娣 张霄瑜 于廷曦关键词:阿魏酸钠 抗抑郁作用 慢性应激抑郁模型 土贝母苷甲对人脐静脉内皮细胞凋亡和肿瘤诱导的血管生成的影响 被引量:6 2008年 研究了土贝母苷甲(下称苷甲)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)凋亡和肿瘤诱导的血管生成的影响。包括:MTT法检测苷甲对HUVECs生长的影响;荧光显微镜观察苷甲作用下HUVECs的形态变化;流式细胞术分析苷甲对HUVECs周期及凋亡的影响;聚碳酸酯膜小室(Transwell model)趋化运动模型检测苷甲对HUVECs运动能力的影响;鸡胚绒毛尿囊膜(chick embryochorioallantoic membrane,CAM)试验检测苷甲对人鼻咽癌细胞(human nasopharyngeal carcinomaCNE-2Zcells,CNE-2Z)诱导的CAM血管生成的影响;免疫组化法检测苷甲对BALB/c裸小鼠Lewis肺癌组织微血管密度(microvessel density,MVD)和血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)和血小板源生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)表达的影响。苷甲明显抑制HUVECs的生长,其抑制效果与剂量和作用时间相关,苷甲作用HUVECs24、48、72h其IC50值分别为24.2、21.4、17.9μmol/L;苷甲作用下HUVECs发生周期阻滞,呈现典型的凋亡特征,20.0μmol/L苷甲作用12、24、36hHUVECs的凋亡率分别为11.4%、20.8%、25.3%;20.0μmol/L苷甲处理HUVECs24h,对细胞迁移抑制率为58.4%;苷甲抑制CNE-2Z细胞诱导的CAM血管生成,并与剂量相关;苷甲应用后瘤组织MVD明显减少,VEGF、bFGF、PDGF表达下调。苷甲有明显的抑制血管生成活性,其抑制血管生成作用与诱导血管内皮细胞凋亡,抑制其运动能力,下调VEGF、bFGF和PDGF的表达有关。 于立坚 胡定慧 马润娣 苏伟明 王珍玉 廖铭能 张霄瑜 于廷曦关键词:土贝母苷甲 血管生成 人脐静脉内皮细胞株 鸡胚绒毛尿囊膜 福安泰-03对高转移人卵巢癌细胞HO-8910PM侵袭能力的影响 被引量:4 2009年 应用噻唑蓝法检测从赤魟中分离到的福安泰-03(Fuantai-03,FAT-03)对高转移人卵巢癌细胞HO-8910PM生长的影响;人工重组基底膜检测FAT-03对细胞侵袭能力的影响;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测FAT-03对HO-8910PM细胞分泌MMP-9能力的影响。结果显示,FAT-03(20.0、40.0、60.0μg/ml)作用HO-8910PM细胞24h,对细胞生长的抑制率小于10%,对细胞与纤维粘连蛋白(fibronectin,FN)和Matrigel粘附的抑制率分别为15.1%、28.0%(P<0.05)、54.1%(P<0.01)和14.7%、34.3%(P<0.05)、40.5%(P<0.01),对细胞迁移的抑制率分别为16.4%、33.8%(P<0.05)和42.6%(P<0.01)。此外,FAT-03显著减少HO8910-PM细胞分泌MMP-9的量,并降低其活性。这些实验事实提示FAT-03能明显抑制HO-8910PM细胞的侵袭能力。 廖铭能 徐海瑛 马润娣 于立坚 苏伟明 黄来珍 张霄瑜 于廷曦关键词:MMP-9