北京师范大学分子生物学及生物化学研究室
- 作品数：28 被引量：60H指数：4
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- 钙调神经磷酸酶在CaM,Mn^(2+)存在时的构象变化被引量：3
- 1995年
- 钙调神经磷酸酶(Calcineurin,CaN)是由A,B两亚基1:1组成的二聚体酶.A亚基是CaN的催化亚基,上有钙调素(CaM)、B亚基和金属离子结合位点.B亚基是调节亚基,上有4个Ca^(2+)结合位点,在维系酶的活性构象方面起着重要的作用.肖方祥等用Mn^(2+)作为Ca^(2+)探针进行了CaN,CaN+CaM结合Mn^(2+)的ESR研究,其结果表明,CaN上有2个Mn^(2+)结合位点,然而分离的A,B亚基上分别有2个、4个Mn^(2+)结合位点。
- 向本琼周捷魏群
- 关键词：钙调神经磷酸酶钙调素构象锰离子
- 蛋白质磷酸化和脱磷酸化对DNA拓扑异构酶Ⅰ活力调节的研究被引量：4
- 1993年
- 本文以小鼠正常肝和H_(22a)腹水型肝癌细胞为材料,从中分离出纯度较高的拓扑异构酶Ⅰ和细胞质酪氨酸蛋白激酶(TPK)来研究磷酸化和脱磷酸化对拓扑异构酶Ⅰ活力的调节。结果表明TPK能活化拓扑异构酶Ⅰ。另外还发现PKA和碱性磷酸酶(CIP)能分别活化和抑制拓扑异构酶Ⅰ。
- 刘清泉白龙川颜卉君吳国利
- 关键词：DNA拓扑异构酶I蛋白磷酸化
- 蛋白质酪氨酸脱磷酸化和信号传导被引量：1
- 1993年
- 蛋白质酪氨酸磷酸酶(PTPP)能特异地催化蛋白质酪氨酸残基的脱磷酸化反应.它是一个由很多结构相关的酶组成的家族.比较氨基酸的序列发现 PTPP-1B和跨膜蛋白 CD45 的胞内区有结构相似性.现已证明 CD45 确实具有内在 PTPP活性.通过研究 CD45 在淋巴 T 细胞中的功能,揭示了一个新的信号传导机制.蛋白质酪氨酸残基的脱磷酸化在这一信号传导途径中起着关键性作用.
- 朱茂祥吴国利
- 关键词：蛋白酪氨酸磷酸酶磷酸化激酶
- 几种药物对HL-60细胞的诱导分化作用及其过程中蛋白激酶C活力分布的变化被引量：2
- 1993年
- 本文就HHT、RA、WB_(852)对HL-60细胞的诱导分化作用及此过程中PKC活力在细胞胞浆部分及膜溶脱部分的变化进行研究。结果表明,在适当的用药浓度下,从细胞生长抑制情况、形态学观察及NBT还原能力测定判断,三种药物对HL-60细胞有明显的诱导分化作用。PKC活力分布变化的研究结果表明,用药组细胞胞浆部分酶活力有不同程度的下降,尤在用药早期(约6h以前)下降显著;而膜部分PKC活力则表现上升、或下降,或活力相差不大的结果。暗示在信息传递过程中起核心作用的PKC对不同的胞外刺激可能采取不同的应答方式。PKC的作用可能主要发生在信息传递的早期。
- 庞玲颜卉君吴国利
- 关键词：蛋白激酶维甲酸抗癌药
- 尼龙网固定化果胶酶的制备及其性质研究被引量：12
- 1992年
- 用尼龙网作载体,经3-二甲氨基丙胺活化,用戊二醛将果胶酶固定化。所得固定化酶Km值与自然酶接近;对温度的稳定性有较大的提高,100℃保温30min才能使其失活。固定化酶在较宽的pH范围内能保持其正常活力,它对金属离子抑制剂的耐受性有较显著的提高,用0.5％果胶溶液作底物,重复使用10次后酶活力保留44％。固定化果胶酶与自然酶相比较,对不同果汁的澄清效果不同。固定化果胶酶在无保护剂存在的条件下,室温放置四个月活力不减少。
- 张来群高天慧
- 关键词：尼龙网果胶酶固定化酶
- 缺血与正常小鼠脑内蛋白磷酸化脱磷酸化的比较研究被引量：1
- 1994年
- 以小鼠断头脑缺血为模型，研究缺血小鼠脑内蛋白磷酸化脱磷酸化的改变。对缺血１ｍｉｎ、５ｍｉｎ、１５ｍｉｎ和３０ｍｉｎ及对照小鼠脑内蛋白磷酸化脱磷酸化的研究表明，有些磷蛋白如１４５ｋＤ、８４ｋＤ、５９ｋＤ和５０ｋＤ的磷酸化随缺血时间延长而减弱，还有些磷蛋白如１１９ｋＤ、１０５ｋＤ、７８ｋＤ和５５ｋＤ的磷酸化随缺血时间延长而增加。对磷酸化程度变化显著的缺血１５ｍｉｎ小鼠脑内胞浆及膜上ＰＫＡ、ＰＫＣ、Ｃａ^（２＋）／ＣａＭＰＫ底物的磷酸化进行了研究，发现胞浆组分中与钙相关的ＰＫＣ、Ｃａ^（２＋）／ＣａＭＰＫ底物磷酸化在缺血鼠脑中明显减弱。同时研究了脑内唯一依赖于Ｃａ^（２＋）／ＣａＭ的钙调神经磷酸酶（Ｃａｌｃｉｎｅｕｒｉｎ，ＣａＮ）底物的变化，发现缺血小鼠脑内ＣａＮ的某些底物磷酸化降低。
- 孟祥兵魏群
- 关键词：蛋白磷酸化脑缺血钙调神经磷酸酶
- 钙调神经磷酸酶的ESR研究被引量：4
- 1995年
- 用X波段顺磁光谱仪进行了Mn^(2+)结合钙调神经磷酸酶和其A,B二亚基的研究,结果表明,在钙调神经磷酸酶A亚基上有2个K_d分别为0.02mmol/L和0.06mmol/L的Mn^(2+)结合位点,在B亚基上有4个Mn^(2+)结合位点,其中2个为高亲和力位点K_d为0.004mmol/L,另2个为低亲和力位点K_d为0.09mmol/L.有意思的是,在A亚基和B亚基组成的全酶上只测得2个Mn^(2+)结合位点(K_d分别为0.007mmol/L和0.033mmol/L.但在钙调素存在下的全酶上测得10个Mn^(2+)结合位点,而且Mn^(2+)-钙调素-钙调神经磷酸酶表现出高酶活性.这些结果的金属离子直接光谱学测定表明了Mn^(2+)和全酶的结合与其和2个自由亚基的结合方式是不同的,同时也提示,在调节蛋白钙调素的存在下,全酶聚合时可能发生了构象的变化.
- 魏群肖方祥卢景芬周捷
- 关键词：钙调神经磷酸酶钙调素电子顺磁共振结合蛋白
- 小鼠脑内钙调神经磷酸酶内源底物的研究
- 1994年
- 钙调神经磷酸酶是哺乳动物脑内含量极丰富的唯一依赖Ca^(2+)及钙调素的磷蛋白磷酸酶.该酶(calcineurin,CaN)在脑外组织如精子细胞、淋巴细胞及肌肉组织中也有分布,但含量远远低于脑.CaN由18kD Ca^(2+)结合的调节亚基和61kD钙调素结合的催化亚基组成.除可与Ca^(2+)结合外,该酶还可与Mn^(2+),Ni^(2+),Co^(2+)等金属离子结合而影响其活性.CaN催化亚基已有至少5种cDNA同型物分别从大鼠、小鼠和人基因库中调出.
- 孟祥兵魏群
- 关键词：CAN
- 一种同时纯化钙谓神经磷酸酶和钙调素的有效方法被引量：4
- 1993年
- 本文报导了一种能同时纯化钙调神经磷酸酶和钙调素的有效方法。牛脑粗提液经DE-52纤维素层析分段洗脱:0.5mol/L NaCl缓冲液洗脱峰经phenyl-sepharose亲和柱和G75 sephadex制得电泳纯钙调素。0.18mol/L KCl缓冲液洗脱峰经Affigel-Blue层析,硫酸铵盐析,钙调素亲和层析,G-200 Sephadex凝胶过滤制得电泳纯钙调神经磷酸酶。
- 魏群吕照江肖方祥邢录洲李大海
- 关键词：磷酸酶钙调素
- 钙调神经磷酸酶
- 1989年
- 钙调神经磷酸酶是70年代末80年代初发现的一种直接依赖于钙和钙调素的磷蛋白磷酸酶。它大量存在于脑内,分子量80k,由催化亚基A和调节亚基B1:1组成。钙调神经磷酸酶是个多底物的磷蛋白磷酸酶,它的活性还受Mn^(2+),Ni^(2+)等多种金属离子的调节。
- 魏群吴国利
- 关键词：钙调素磷酸酶
- 全文增补中
