内蒙古医科大学第三临床医学院内蒙古烧伤研究所
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
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- 脂多糖预处理人脐带间充质干细胞的条件培养基对人脐静脉内皮细胞增殖、凋亡的影响被引量:1
- 2017年
- 目的探讨脂多糖预处理人脐带间充质干细胞(hUCMSC)的条件培养基对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖和凋亡的影响。方法本实验按随机数字表法将HUVEC分为对照组、条件培养基组和预处理条件培养基组。首先使用100 ng/mL脂多糖的内皮细胞培养基刺激3组HUVEC12 h后,对照组更换为原培养基,条件培养基组更换为hUCMSC的条件培养基,预处理条件培养基组更换为脂多糖预处理hUCMSC的条件培养基。分别于培养24、48、72 h时点采用MTT法测定HUVEC的增殖活性;台盼蓝排除染色法检测细胞增殖的数量,流式细胞仪检测细胞的增殖周期,Hoechst染色和流式细胞仪定性定量检测细胞凋亡的情况。方差分析统计分析比较数据。结果 MTT测定结果示:培养24 h时,对照组、条件培养基组和预处理条件培养基组细胞吸光度值为0.46、0.52和0.56;培养48 h时,3组的吸光度值为0.35、0.46和0.51;培养72 h时,3组的吸光度值为0.21、0.38和0.47;在3个时间点上,条件培养基组、预处理条件培养基组的吸光度值均高于对照组,且预处理条件培养基组的细胞量高于条件培养基组。台盼蓝染色计数的结果与MTT的结果趋势类似。培养24 h时,对照组、条件培养基组和预处理条件培养基组的细胞数量为(4.554±0.103)×10~3、(5.251±0.091)×10~3、(5.585±0.038)×10~3个;培养48 h时,3组的细胞数量分别为(3.465±0.087)×10~3、(4.659±0.116)×10~3、(5.347±0.099)×10~3个;培养72 h时,3组的细胞数量是(2.079±0.127)×10~3、(4.063±0.052)×10~3、(4.950±0.104)×10~3个;在3个时间点上,条件培养基组、预处理条件培养基组细胞的数量均显著高于对照组,差异有统计学意义(P值均小于0.05),且预处理条件培养基组的细胞数量显著高于条件培养基组,差异有统计学意义(P值均小于0.05)。流式细胞仪检测细胞增殖周期(G2/M+S期)的结果示:培养24 h时,3组细胞处于G2/M+S期的比例是(17.07±1.15)%,(22.5
- 聂顺义巴特夏成德周彪金盼盼兰斌斌王琼李武
- 关键词:脂多糖类间质干细胞
- 人脐带间充质干细胞培养上清液与阿莫西林体外联合应用对金黄色葡萄球菌的结构影响
- 2017年
- 目的探讨联合应用人脐带间充质干细胞(h UCMSC)上清液与阿莫西林对烧伤创面分离的金黄色葡萄球菌的抗菌活性研究。方法 (1)取足月剖宫产健康胎儿的脐带组织,分离、培养、鉴定h UCMSC后选取第3代细胞接种于4个6孔板,对应培养后分别提取其上清液用于以下实验,其中1组为100 ng/m L脂多糖预处理h UCMSC培养上清液。选取内蒙古烧伤研究所患者创面分离培养的金黄色葡萄球菌菌株进行体外增殖培养,按随机数字表法分为阿莫西林对照组(简称对照组)、阿莫西林+上清液组(简称上清液组)、阿莫西林+上清液+LL-37抗体组(简称抗体组)、阿莫西林+100 ng/m L脂多糖预处理上清液组(简称预处理组)。于7、12、24、48 h读取各组阿莫西林E-Test药敏试条的最低抑菌浓度(MIC)值,计算上清液组、抗体组、预处理组阿莫西林的部分抑菌浓度(FIC)指数。(2)细胞、细菌分组和培养同实验(1),选取金黄色葡萄球菌菌株进行体外增殖培养24 h,每组在抑菌环附近取菌,涂片固定,扫描电镜检测。(3)对数据行析因设计方差分析、单因素方差分析、LSD-t检验、Kruskal-Wallis检验、Mann-Whitney检验。结果 (1)阿莫西林E-Test药敏试条结果:在不同时相点(7、12、24、48 h),对照组阿莫西林对金黄色葡萄球菌的MIC大于上清液组、抗体组和预处理组(Z值为6.609~6.655,P值均小于0.05),抗体组阿莫西林对金黄色葡萄球菌的MIC大于上清液组和预处理组(Z值为5.797~6.656,P值均小于0.05),上清液组阿莫西林对金黄色葡萄球菌的MIC大于预处理组(Z值为5.923~6.656,P值均小于0.05)。在不同时相点(7、12、24、48 h),上清液组、预处理组阿莫西林的FIC指数均小于0.5,抗体组小于或接近0.5且小于1.0。(2)扫描电镜结果:对照组金黄色葡萄球菌的排列变得松散,无规律,不能聚集成葡萄状,细胞间的界限略变模糊,部分胞体间界限明显。上清液组细菌形状无�
- 聂顺义巴特李华强屠华雷周彪张青
- 关键词:脐带间质干细胞阿莫西林扫描电镜