宁夏大学生命科学学院西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室
- 作品数：20 被引量：46H指数：3
- 发文基金：国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金国家级大学生创新创业训练计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 3种氟喹诺酮类药物联合苦豆子碱对牛源致病性粪肠球菌耐药突变选择窗的影响被引量：3
- 2018年
- 目的研究苦豆子碱与3种氟喹诺酮类药物（环丙沙星、恩诺沙星、氧氟沙星）联用对粪肠球菌耐药突变选择窗（MSW）的影响。方法采用二倍稀释法测定环丙沙星、恩诺沙星、氧氟沙星对粪肠球菌标准株ATCCA29212、牛源分离株的最小抑菌浓度（MIC）;采用平板诱导法,用环丙沙星、恩诺沙星、氧氟沙星筛选粪肠球菌标准株及牛源分离株的第一步耐药突变体,用环丙沙星筛选得到第二步耐药突变体;采用二倍稀释法检测环丙沙星、恩诺沙星、氧氟沙星对耐药突变体的MIC、最小防突变浓度（MPC）,计算突变选择指数（SI）并确定MSW,观察苦豆子碱和3种氟喹诺酮类药物联用对粪肠球菌MSW的影响。结果3种氟喹诺酮类药物对2株分离的粪肠球菌的MIC均〉 1. 6μg·mL（-1）,MPC均〉 20μg·mL（-1）,SI为3. 4～13. 7;与原菌株比较,经不同氟喹诺酮类药物筛选的粪肠球菌的MIC升高了3～7倍,MPC升高了2～7倍;苦豆子碱和3种氟喹诺酮类药物联用（4MIC＋2MIC）可使抗菌药物对粪肠球菌的MSW缩小2～4倍。结论连续使用同一类型的抗菌药物能快速、加宽粪肠球菌的MSW,从而诱导耐药菌的产生;苦豆子碱和3种氟喹诺酮类药物联用有利于杀灭致病性粪肠球菌,防止耐药菌出现。
- 罗惠霞杨天梅冯峰周学章
- 关键词：粪肠球菌氟喹诺酮类药物耐药突变选择窗防突变浓度
- LDLR基因Ava Ⅱ位点多态性与高甘油三酯血症相关性的研究
- 甘油三酯(TG)升高在我国高脂血症患者中最为常见,其也是导致心、脑血管疾病的主要独立危险因素。研究认为高脂血症是由遗传与环境因素共同作用的一种多基因遗传病。低密度脂蛋白受体(LDLR)在体内脂质的代谢中起着重要作用,因此...
- 李敏来彦彬王玉炯杜学婷
- 大肠杆菌STI突变体基因的构建及其在原核系统中的表达
- 采用PCR技术,从产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)强毒株C83922中扩增出耐热性肠毒素sTI,并进行了核苷酸序列测定。结果表明,核苷酸序列与国外报道的序列一致。进而通过PCR和寡核苷酸定点突变技术将STI毒素中心的3个C...
- 李敏王亮郭乐王玉炯赵辉
- 文献传递
- 黑果枸杞高效植株再生与遗传转化体系的建立
- 2022年
- 为建立高效的黑果枸杞组织培养与遗传转化体系,本研究以黑果枸杞叶片、茎节、茎段为外植体,在含有不同浓度组合的NAA和BAP培养基上进行愈伤组织和不定芽诱导比较;选择黑果枸杞叶片为材料,采用农杆菌介导法,将带有绿色荧光蛋白基因(sGFP)的双元表达载体导入黑果枸杞,探讨侵染时间和抗生素浓度对遗传转化效果的影响。结果表明,黑果枸杞的最适植株再生体系为:以叶片为外植体,MS基本培养基中添加0.5 mg·L^(-1)NAA和0.3 mg·L^(-1)BAP,愈伤组织诱导率为88.56%,不定芽诱导率为54.54%,将不定芽置于1/2MS培养基中进行生根诱导,生根率为95%;稳定高效的遗传转化体系为:农杆菌侵染液OD_(600)为0.25,共培养3 d,卡那霉素(kanamycin)和羧苄西林(carbenicillin)浓度分别为25和250 mg·L^(-1)。愈伤组织和不定芽诱导时经卡那霉素和荧光标记双重选拔,愈伤组织阳性率为85.47%,出芽生根后经PCR鉴定,阳性转化率为29%;利用实时荧光定量PCR检测转基因植株,导入的外源sGFP基因均有较高的表达水平。本研究为利用基因工程技术对黑果枸杞进行品种改良提供了技术支撑。
- 张虹安迎瑞张君郎思睿陈任
- 关键词：黑果枸杞植株再生农杆菌介导
- 脂多糖刺激巨噬细胞获得的外泌体促进TGF-β1诱导的人A549细胞上皮间质转化被引量：7
- 2019年
- 目的探索炎性环境下巨噬细胞来源外泌体对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的肺脏上皮间质转化(EMT)的影响。方法采用透射电镜鉴定外泌体形态,Western blot法检测外泌体特异性标志物肿瘤易感基因101(TSG101)、附属蛋白质凋亡关联基因α相互作用蛋白X(ALIX)、CD81、CD9蛋白及外泌体不含有的钙连蛋白(calnexin)对THP-1巨噬细胞来源的外泌体进行鉴定。利用TGF-β1诱导肺泡上皮A549细胞发生EMT,比较脂多糖(LPS)刺激和未刺激THP-1细胞来源外泌体对A549细胞间质化特征的影响。结果成功建立TGF-β1诱导A549细胞发生EMT模型和获得THP-1巨噬细胞来源的外泌体。与未经LPS处理巨噬细胞来源外泌体比较,LPS刺激THP-1细胞来源的外泌体能显著促进TGF-β1诱导A549细胞EMT,包括显著下调上皮钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平,上调波形蛋白(vimentin)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、TGF-β1/SMAD家族成员2/3(Smad2/3)通路Smad2/3蛋白和磷酸化的Smad2/3(p-Smad2/3)和1型胶原蛋白(Col1)等细胞间质化相关的信号蛋白表达。结论LPS刺激巨噬细胞来源的外泌体通过激活TGF-β/Smad2/3信号,上调A549细胞中vimentin、α-SMA和Col1等细胞间质化相关蛋白的表达,促进A549细胞发生EMT。
- 尤学红郭媛媛刘晓明马春燕
- 关键词：巨噬细胞
- 甜叶菊中9种甜菊醇糖苷积累与其生物合成关键基因表达量的相关性被引量：2
- 2022年
- 为了研究甜叶菊中主要甜菊醇糖苷积累特点与其生物合成关键基因表达量的关系,本研究选取3个品种甜叶菊(普赛科3号、中山2号、同心)为试验材料,定期在幼苗期、营养生长期、花蕾期采收植株的上位3对叶片,采用液相色谱-质谱法(LC-MS)检测9种甜菊醇糖苷,即莱宝迪苷A、B、C、D、E、F(RA、RB、RC、RD、RE、RF)、甜菊糖苷(ST)、甜茶糖苷(RBS)和杜尔可苷A(DA)含量,同时利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析糖苷生物合成的3个UDP-糖基转移酶(UGTs)关键基因,即SrUGT91D2e、SrUGT74G1和SrUGT76G1的表达水平。结果表明,甜味糖苷RA在普塞科3号营养生长期含量最高(1.60 mg·g^(-1)),RD在普塞科3号的花蕾期含量最高(1.58 mg·g^(-1));苦味糖苷ST、RC、DA在普塞科3号中的积累量显著低于中山2号和同心(普塞科3号ST为0.50 mg·g^(-1)、RC为0.26 mg·g^(-1)、DA为0.01 mg·g^(-1)),因此普塞科3号可作为甜味糖苷高产选育品种。对甜菊醇糖苷生物合成关键基因表达量与糖苷含量进行相关性分析,甜味糖苷RD和RA的含量与其关键影响因子SrUGT91D2e和SrUGT76G1的表达量显著相关,苦味糖苷RC、ST、DA的含量与其关键影响因子SrUGT74G1的表达量显著相关。本试验为甜叶菊不同甜度糖苷的品种选育及采收时间的确定提供了依据。
- 张虹路国栋袁春春郎思睿陈任
- 关键词：甜叶菊基因表达
- 线粒体自噬与癌症关系的研究进展被引量：5
- 2017年
- 线粒体自噬是选择性自噬的一种,线粒体通过自噬途径被选择性清除。线粒体自噬对于细胞内环境稳定来说十分关键,细胞利用线粒体自噬机制消除功能障碍的线粒体或减少线粒体数量等来适应应激,维持胞内内环境的稳定。因此,对于线粒体自噬的分子机制以及生理作用的研究具有重要的生物学意义。细胞可通过多种分子机制介导线粒体自噬,如PINK1/Parkin、Nix和FUNDC1途径。线粒体自噬调控机制的失调或障碍与人类多种疾病的发病密切相关,有研究发现在多种癌症中存在着不同水平的线粒体自噬,包括直肠癌、肺癌、乳腺癌等,从而也反映了线粒体自噬与癌症的密切关系。论文介绍了线粒体自噬作用和过程的最新研究进展,并着重总结自噬与癌症的关系。
- 李旭卉吴习习张凯罗海霞李敏
- 关键词：PINK1癌症
- 过量表达马铃薯ataxin-3可增加泛素积累并反向调控本氏烟生长被引量：2
- 2018年
- 动物细胞中ataxin-3与泛素特异结合,通过去泛素化阻止蛋白质水解;基因组注释预测ataxin-3同源物存在于植物中,但到目前为止尚未见植物ataxin-3基因功能的研究报道;本研究克隆了马铃薯（Solanum tuberosum） ataxin-3编码基因StAX c DNA,转化StAX于本氏烟（Nicotiana benthamiana）基因组,筛选获得StAX过量表达株系stax-9;测定结果显示,stax-9叶片ataxin-3、UBI 3和CDC48 mRNA积累显著增加,stax-9叶片ataxin-3、寡聚泛素和总蛋白积累分别比WT株系增加了138%、81%和38%,而赤霉素含量仅是WT的1/6;研究结果表明,ataxin-3本氏烟体内过量表达,显著增强了泛素转录和翻译,增加了总蛋白积累,减少了赤霉素积累,导致半矮化表型;结论认为植物ataxin-3通过正向调控泛素和蛋白积累,反向调控生长;本研究为植物ataxin-3功能的进一步理解提供依据。
- 殷倩乔丽媛王佩云伍涵宇拓宁姚新灵
- 关键词：聚类分析
- 枸杞多糖抑制绿脓杆菌毒素引起的小鼠巨噬细胞RAW264.7氧化损伤作用研究被引量：2
- 2019年
- 目的探讨枸杞多糖减轻绿脓杆菌毒素(Pyocyanin,PCN)对小鼠巨噬细胞RAW264.7氧化损伤机制。方法细胞分为对照组(未处理组),绿脓杆菌毒素处理组,枸杞多糖处理组及枸杞多糖+绿脓杆菌毒素处理组,通过细胞MTT法检测绿脓杆菌毒素处理后枸杞多糖对小鼠巨噬细胞RAW264.7活性的保护作用;采用Western blot检测不同处理组细胞凋亡相关蛋白的表达;采用荧光染色法检测ROS的表达;采用ELASA法检测不同时间点细胞上清中IL-4的表达;采用流式细胞仪检测不同处理组细胞凋亡情况。结果 50μmol/L PCN处理后导致细胞增殖能力下降,凋亡抑制蛋白Bcl-xl表达量下调,ROS表达量上升(t=3.95,P<0.05)。随着处理时间的延长,PCN能够刺激细胞促炎因子IL-4过量表达,促进巨噬细胞细胞凋亡(t=7.15,P<0.05)。100 mg/ml LBP预处理RAW264.7细胞可显著促进Bcl-2(t=1.24,P<0.05)和Bcl-xl的表达(t=1.51,P<0.05),促炎因子IL-4和胞内ROS的表达显著下调(t值分别为8.15和2.57,均P<0.05),并PCN造成的巨噬细胞凋亡减少。结论 LBP可抑制PCN造成的胞内ROS产生,抑制IL-4释放,调控凋亡抑制蛋白Bcl-2、Bcl-xl和凋亡蛋白Caspase3的表达,进而提高PCN作用后RAW264.7细胞的增殖能力,为进一步研究绿脓杆菌致病机制及LBP的免疫保护作用提供了理论基础。
- 魏萌萌林雪薛頔宋孚洋王玉炯
- 关键词：枸杞多糖IL-4ROS细胞凋亡
- 雄性不育枸杞花药比较转录组分析被引量：1
- 2022年
- 为筛选宁夏枸杞(Lycium barbarum L.)雄性不育花药发育相关的差异表达基因,本研究开展了雄性不育品种‘宁杞5号’和可育品种‘宁杞1号’成熟花粉时期花药转录组分析,共获得差异表达基因1759个,在‘宁杞5号’中有753个基因上调表达,1006个基因下调表达。KEGG富集表明,这些差异表达基因主要富集到氨基酸的生物合成、植物激素信号传导、苯丙素生物合成、淀粉和蔗糖代谢、脂肪酸代谢等相关通路。对有注释信息的差异表达基因进行NR和Uniprot数据库检索,筛选到28个花药发育相关基因,其中有20个在‘宁杞5号’中下调表达,8个上调表达。选取其中的5个差异表达基因进行RT-qPCR验证,结果与转录组数据趋势一致。甘油醛-3-磷酸脱氢酶(Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAP)、束状阿拉伯半乳糖蛋白3(Fasciclin-like arabinogalactan protein 3,FLAs)和花药特异表达启动子LAT52系统发育树分析表明,3个基因分别与同科的物种在同一个进化分支上且同源性较高。这些差异表达基因可能在宁夏枸杞‘宁杞5号’成熟花粉时期花药发育及雄性不育的发生中发挥重要作用。研究结果为进一步研究宁夏枸杞花药发育及其调控机制、雄性不育发生的分子机制提供了参考依据。
- 张兴冯嘉馨陈佳范文强王路瑶岳思君郑蕊
- 关键词：宁夏枸杞雄性不育差异表达基因
