暨南大学药学院生物制药学教研室
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
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- 减少寡聚体形成的重组人碱性成纤维细胞生长因子的改造被引量：1
- 2005年
- 采用PCR突变技术改造人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF)cDNA,将扩增的cDNA片断插入表达载体pET3c的表达框架中,构建了表达菌株BL21(DE3)/pET3c-[Ser69,87]hbFGF,用IPTG诱导表达,其[Ser69,87]hbFGF的表达量占菌体总蛋白30％。通过离子交换、肝素亲和两步层析的方法获得了纯度达98％的[Ser69,87]hbFGF样品。用MTT法测得纯化的[Ser69,87]hbFGF样品与野生型hbFGF促Balb／c 3T3细胞增殖的比活性相当。以野生型hbFGF作对照,分析反复冻融对突变体[Ser69,87]hbFGF形成寡聚体的影响,并在25℃和37℃的条件下分析其寡聚体的形成情况。结果表明,不管是反复冻融还是在25℃和37℃的条件下,突变体[Ser69,87]hbFGF形成的寡聚体都较野生型hbFGF明显减少。
- 冯辉李校堃吴晓萍苏志坚郑青黄亚东
- 关键词：寡聚体重组人碱性成纤维细胞生长因子PCR突变体蛋白质家族
- aFGF荧光分子探针基因的合成及其表达被引量：1
- 2005年
- 通过PCR技术和体外DNA重组技术将绿色荧光蛋白cDNA和酸性成纤维细胞生长因子cDNA构建成融合基因,克隆到表达载体pET3c中,构建成表达菌株BL21(DE3)/pET3c-GAF。经IPTG诱导表达,融合蛋白的表达量占菌体总蛋白的25%;DNA测序结果表明设计合成的融合基因与预期相符。Westernblot结果表明重组蛋白具有aFGF的免疫原性。经IPTG诱导后的菌体及蛋白粗提液在荧光显微镜下可观察到强烈的绿色荧光。融合基因在大肠杆菌中实现了表达,用MTT法测得纯化融合蛋白与野生型aFGF促Blab/c3T3细胞增殖活性相当,为利用绿色荧光分子探针研究aFGF的在活体内的作用机制建立了新的方法。
- 庞实锋郑青黄亚东周汝滨李校堃
- 关键词：基因合成基因表达PCR技术绿色荧光蛋白酸性成纤维细胞生长因子
- 成纤细胞生长因子应用于冠心病治疗的研究现状被引量：2
- 2003年
- 缺血性心脏病是当代死亡率较高的疾病之一 ,对人类的健康带来严重的威胁。近年来 ,人们发现一些生长因子有促进缺血组织的血管新生和加速侧枝循环建立的作用 ,为改善心肌缺血 ,治疗冠心病提供了新的思路和方法。本文就FGF(FibroblastGrowthFactor,FGF)的研究现状作相关的综述 ,国内外的实验研究表明 ,良好的冠脉侧枝血管可改善缺血心肌的血供 ,FGF对诱导缺血组织的血管再生改善血液循环具有重要的意义。
- 林灼锋李校堃郑青黄亚东
- 关键词：冠心病心肌缺血血管新生
