丁露露
- 作品数：15 被引量：28H指数：3
- 供职机构：上海交通大学医学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生政治法律生物学更多>>
- 环氧合酶2基因沉默对嘌呤霉素氨基核苷诱导足细胞凋亡的影响被引量：2
- 2014年
- 足细胞损伤是进行性肾损害的主要原因[1],足细胞环氧合酶2（cyclooxygenase-2,COX-2）的表达增强致使足细胞易于受到进一步损伤[2].特异性COX-2抑制剂对许多慢性肾脏疾病有减轻蛋白尿、延缓肾损害进展的作用,但作用机制尚未完全阐明[3-5].我们前期研究发现在嘌呤霉素氨基核苷（puromycin aminonucleoside,PAN）诱导的足细胞凋亡过程中C OX-2的表达增多,而特异性COX-2抑制剂塞来昔布则可以减轻PAN诱导的足细胞凋亡[6],推测塞来昔布抑制足细胞凋亡的作用可能是通过抑制COX-2的表达实现的.但塞来昔布抑制凋亡可能并不完全依赖对COX-2的调节.本研究应用COX-2小分子干扰RNA（small interfere RNA,siRNA）技术将足细胞COX-2基因沉默,比较正常条件永生性小鼠足细胞与PAN诱导凋亡的小鼠足细胞中COX-2的表达水平,观察足细胞Nephrin及CD2相关蛋白（CD2-associated Protein,CD2AP）的表达,进一步研究足细胞COX-2基因沉默对足细胞可能的保护作用机制,为临床上延缓慢性进行性肾损害的治疗提供新的依据.
- 孙怀鑫孔维信汪年松张林丁露露郝传明陈靖
- 关键词：嘌呤霉素氨基核苷环氧合酶2基因沉默特异性COX-2抑制剂进行性肾损害CD2相关蛋白
- 塞来昔布对嘌呤氨基核苷诱导的足细胞凋亡中COX-2表达水平的影响
- 2011年
- 目的:旨在通过特异性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布对嘌呤氨基核苷诱导的足细胞凋亡中足细胞COX-2表达水平变化的影响,初步探讨特异性COX-2抑制剂对足细胞保护作用的机制。方法:以条件永生性小鼠足细胞为研究对象,分为6组:正常对照组(CON)、嘌呤霉素氨基核苷组(PA)、地塞米松组(DEX)、塞来昔布组(CELE)、地塞米松+嘌呤氨基核苷组(DEX+PA)、塞来昔布+嘌呤氨基核苷组(CELE+PA),分别于0h、8h、24h和48h四个时间点用Hoechst 33258染色检测足细胞凋亡率,24h抽提蛋白用于Western blot检测COX-2的蛋白表达。结果:PA组与正常对照组相比细胞凋亡率明显增多(P<0.001),DEX+PA、CELE+PA组与PA组比较细胞凋亡率明显减少(P<0.05);正常对照组表达COX-2,用PA诱导凋亡后,24h时COX-2表达明显增加,用CELE、DEX干预后COX-2表达水平有所减少(P<0.05)。结论:特异性COX-2抑制剂CELE可以减少PA诱导的足细胞的凋亡率;CELE抑制PA诱导的足细胞凋亡的作用机制可能与CELE对足细胞所表达的COX-2水平变化的影响有一定的相关性。
- 朱莉孔维信丁浩丁露露夏春英邵维斌
- 关键词：塞来昔布足细胞COX-2凋亡
- 环氧合酶-2基因敲低对足细胞凋亡及nephrin蛋白表达的影响被引量：3
- 2012年
- 目的观察足细胞环氧合酶-2(COX-2)基因敲低对足细胞凋亡及nephrin蛋白表达的影响。方法 (1)以条件永生性小鼠足细胞株为研究对象:分为正常对照组、5μl的siRNA组、10μl的siRNA组、15μl的siRNA组。经诱导分化成熟,在干扰48 h后用半定量RT-PCR和Western bolt分别检测COX-2 mRNA及蛋白表达水平,用流式细胞仪检测足细胞凋亡水平。(2)以10μl的siRNA组作为研究对象,分别设立足细胞正常对照组、足细胞COX-2基因敲低组和足细胞阴性转染对照组,用Western bolt检测nephrin蛋白、BAX蛋白及BCL-Xl蛋白的表达水平。结果 (1)与正常对照组比较,随着干扰浓度的增加,COX-2mRNA及蛋白表达逐渐减少,而足细胞的凋亡率逐渐升高,15μl的siRNA组凋亡率明显增高。(2)1μl COX-2 siRNA转染组nephrin蛋白表达显著低于阴性转染组(P<0.05)。(3)与阴性转染组相比,10μl COX-2 siRNA转染组Bax蛋白表达显著上调,而Bcl-xl蛋白表达稍有下调。结论敲低COX-2的基因表达可以导致足细胞凋亡,并随着干扰浓度的增加,足细胞凋亡率逐渐增加;在干扰浓度为10μl时,足细胞nephrin蛋白的表达下调;BAX蛋白上调及BCL-Xl蛋白下调参与了足细胞的凋亡。
- 孙怀鑫孔维信汪年松张林丁露露郝传明陈靖
- 关键词：足细胞细胞凋亡
- 特异性环氧合酶-2抑制剂塞来昔布对嘌呤霉素氨基核苷诱导的足细胞凋亡的影响被引量：5
- 2011年
- 目的研究特异性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布对嘌呤霉素氨基核苷(puromycin aminonucleoside,PA)诱导的足细胞凋亡的影响,初步探讨特异性COX-2抑制剂对足细胞保护作用的机制。方法以条件永生性小鼠足细胞株为研究对象,分为正常对照(CON)组、PA组、塞来昔布(CEL)组和地塞米松(DEX)组。在0、8、24和48h检测各组足细胞活性和凋亡水平,并检测足细胞凋亡过程中caspase-3的活性水平,运用Western印迹法检测各组足细胞P53及COX-2的表达。结果与CON组比较,PA、CEL、DEX组在24、48h的足细胞凋亡率均显著升高(P值均<0.05),但各组这两个时点间的足细胞调亡率的差异无统计学意义(P值均>0.05)。与PA组比较,CEL、DEX组在24、48h的足细胞凋亡率均显著降低(P值均<0.05)。与CON组比较,各组细胞caspase-3活性无明显变化(P值均>0.05)。与CON组比较,PA组在24、48h的P53、COX-2表达均显著增多(P值均<0.05),各组这两个时间点间P53、COX-2表达的差异无统计学意义(P值均>0.05)。与PA组同时间点比较,CEL、DEX组在24、48h的P53、COX-2的表达显著下降(P值均<0.05)。结论 PA诱导的足细胞凋亡呈时间依赖性,随时间延长,足细胞凋亡逐渐增多。PA诱导的足细胞凋亡过程中P53、COX-2的表达增加,足细胞凋亡过程与caspase-3无关。COX-2抑制剂具有抑制足细胞凋亡的作用,与地塞米松相当。
- 丁露露孔维信顾勇杨海春陈靖朱莉
- 关键词：足细胞嘌呤霉素氨基核苷环氧合酶-2塞来昔布
- 镇江市机电行业职工对《中华人民共和国职业病防治法》“知信行”的现状调查被引量：3
- 2005年
- 刘远丁露露许岩陆荣柱陈传芬姜汝福王蕊朱庆安
- 关键词：《中华人民共和国职业病防治法》职业卫生管理知信行健康权益职业卫生技术服务机构机电行业
- 环氧合酶-2基因敲低对足细胞凋亡及podocin蛋白表达的影响被引量：1
- 2012年
- 目的观察足细胞环氧合酶-2(COX-2)基因敲低对足细胞凋亡及podocin蛋白表达的影响,以进一步探讨足细胞凋亡的分子机制。方法将条件永生性小鼠足细胞株随机分为阴性转染组、5μL siRNA组、10μL siRNA组、15μL siRNA组。经诱导分化成熟,在siRNA干扰48 h后用半定量RT-PCR和Western bolt分别检测足细胞COX-2 mRNA及蛋白表达水平,用流式细胞仪检测足细胞凋亡水平。将10μL siRNA组分别设立足细胞正常对照组、足细胞COX-2基因敲低组和足细胞阴性转染对照组三个亚组,用Western bolt检测podocin蛋白、BAX蛋白及BCL-X1蛋白的表达水平。结果与阴性转染组比较,随着干扰浓度的增加,COX-2 mRNA及蛋白表达逐渐减少,而足细胞的凋亡率逐渐升高,15μL的siRNA组凋亡率明显增高。足细胞COX-2基因敲低组podocin蛋白表达显著低于足细胞阴性转染对照组(P<0.05)。与足细胞阴性转染对照组相比,足细胞COX-2基因敲低组BAX蛋白表达显著上调,而BCL-X1蛋白表达稍有下调。结论敲低COX-2基因表达可以导致足细胞凋亡,且随着siRNA干扰浓度的增加,足细胞凋亡率逐渐增加。在干扰浓度为10μL时,足细胞podocin蛋白的表达下调。BAX蛋白上调及BCL-X1蛋白下调参与了足细胞的凋亡。
- 张林孔维信孙怀鑫丁露露郝传明陈靖
- 关键词：足细胞细胞凋亡
- 终末期糖尿病肾病血液透析患者的临床探讨
- 2015年
- 目的探讨为终末期糖尿病肾病(ESDN)患者进行血液透析治疗临床效果。方法选取该院于2011年6月—2013年6月期间所收治的30例终末期糖尿病肾病患者作为本次研究的对象,根据治疗结果将他们分为ESDN死亡组和ESDN存活组,比较两组尿素氮(BUN)、肌酐(CR)情况。结果本组研究对象中有6例患者在一年之内死亡,有12例患者在两年内死亡,即ESDN死亡组共计18例,分别包括3例患者死于感染性并发症,有7例患者死于心力衰竭,有8例患者死于脑出血。从两组尿素氮(BUN)、肌酐(CR)情况来看,ESDN存活组患者的初检BUN水平较低,但与死亡组比较差异无统计学意义(P>0.05),而CR水平较高,与死亡组差异具有统计学意义(P<0.05)。结论及时有效的血液透析治疗对于挽救终末期糖尿病肾病患者生命具有重要意义,但在血液透析治疗过程中应密切观察各项指标变化情况,以确保患者在最佳状态下接受治疗,减少死亡情况的发生。
- 丁露露
- 关键词：终末期糖尿病肾病血液透析
- 小鼠足细胞Tbxa2r基因敲低方法探讨
- 2015年
- 目的设计并筛选对足细胞血栓素A2受体(Tbxa2r)基因表达敲低效果最佳的siRNA序列。方法培养永生性小鼠足细胞(MPC5),取生长占培养板70%细胞用于实验。设计4条siRNA序列(Tbxa2r-mus-1150、Tbxa2r-mus-1309、Tbxa2r-mus-1677、Tbxa2r-mus-1884),经转染效率验证后转染足细胞。将细胞分为四组:干扰组(以筛选出的干扰序列转染细胞)、空白组(正常细胞样品)、模拟组(只加转染试剂的细胞样品)、阴性对照组(转染无序干扰系列的细胞样品)。Real-time PCR检测各组细胞Tbxa2r基因,Western blot法检测Tbxa2r蛋白。结果筛选出干扰效果最强的siRNA序列Tbxa2r-mus-1677,其转染24 h后对Tbxa2r基因表达干扰效果较小,而在转染48 h后足细胞Tbxa2r基因相对表达量最低。转染72 h后,细胞Tbxa2r蛋白相对表达量明显降低。结论采用Tbxa2r特异性siRNA技术成功敲低足细胞Tbxa2r基因表达,并筛选出敲低效果最佳的siRNA序列。
- 孔维信邓振兴张林孙怀鑫丁露露
- 关键词：足细胞
- 嘌呤霉素氨基核苷诱导的足细胞凋亡与COX-2表达及凋亡机制初步探讨被引量：6
- 2010年
- 目的研究嘌呤霉素氨基核苷(PA)诱导的足细胞凋亡及环氧合酶-2(COX-2)在足细胞中的表达情况,初步探讨足细胞凋亡的机制。方法条件永生性小鼠的足细胞,经诱导分化成熟后,采用PA诱导足细胞凋亡,分别在诱导后0、8、24和48h检测足细胞活性和凋亡水平,并检测足细胞凋亡过程中caspase-3的活性水平,同时运用Westernblot技术检测足细胞P53及COX-2的表达。结果随时间的延长,PA诱导的足细胞凋亡逐渐增多,在24h及48h较明显(P<0.05)。各组细胞caspase-3水平无明显差异。24h及48hPA组P53表达较正常对照组明显增多(P<0.05)。正常足细胞表达COX-2,用PA干预后,24h及48hCOX-2表达明显增加(P<0.05)。结论PA诱导的足细胞凋亡呈时间依赖性,随时间的延长,足细胞凋亡逐渐增多;PA诱导的足细胞凋亡过程中COX-2、P53表达明显增多;足细胞凋亡过程与caspase-3无关。
- 丁露露孔维信顾勇杨海春陈靖朱莉
- 关键词：足细胞凋亡嘌呤霉素氨基核苷环氧合酶-2
- 塞来昔布对嘌呤氨基核苷诱导的足细胞凋亡的影响被引量：3
- 2007年
- 以条件永生性小鼠足细胞株为研究对象,分为正常对照组(CON组)、嘌呤霉素氨基核苷组(PA组)、地塞米松组(DEX组)、塞来昔布组(CELE组)、地塞米松+嘌呤氨基核苷组(DEX+PA组)、塞来昔布+嘌呤氨基核苷组(CELE+PA组)。在0、8、24和48 h检测足细胞凋亡水平、caspase-3蛋白酶活性水平及凋亡过程中p53水平。结果显示,与CON组比较,CELE、DEX组凋亡率无明显变化,PA组凋亡率明显增高(P<0.01),而CELE+PA、DEX+PA组凋亡率较PA组明显下降(P均<0.05)。PA组24 h时,p53表达较CON组明显增多(P<0.01),用CELE、DEX干预后明显降低(P均<0.05)。认为塞来昔布可以抑制PA诱导的足细胞凋亡,且p53参与了PA诱导的足细胞凋亡过程。
- 朱莉孔维信丁浩丁露露
- 关键词：塞来昔布足细胞细胞凋亡P53
