任卫平
- 作品数：20 被引量：73H指数：5
- 供职机构：上海第二医科大学附属仁济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 重组人白细胞介素-2痘苗病毒的构建与鉴定
- 2001年
- 目的：构建表达人白细胞介素－２（ｈＩＬ－２）的重组痘苗病毒，为肿瘤免疫基因治疗作必要准备。方法：应用分子克隆基因重组技术构建重组ｈＩＬ－２痘苗病毒真核表达载体ＰＭＪ６０１（ＭＪ６０１ｈｌＬ－２）。在此基础上，应用分子病毒学同源重组技术构建能表达ｈＩＬ－２的重组痘苗病毒（ＶＭＪ６０１ｈＩＬ－２）。制备ｈＩＬ－２探针，用ＤＮＡ杂交技术鉴定ＶＭＪ６０１ｈＩＬ－２，并用聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）检测ＶＭＪ６０１ｈＩＬ－２的基因产物。结果：成功构建了ＭＪ６０１ｈＩＬ－２和ＶＭＪ６０１ｈＩＬ－２，ＶＭＪ６０１ｈＩＬ－２感染的ＳＧＣ７９０１胃癌细胞能分泌具有生物活性的ｈＩＬ－２蛋白。结论：ＶＭＪ６０１ｈＩＬ－２的构建与鉴定为进一步实施体内恶性肿瘤免疫基因治疗打下了坚实的基础。
- 郜恒骏童菊芳朱红音顾伟齐任卫平萧树东
- 关键词：白细胞介素2痘苗病毒免疫疗法胃癌
- 55例胃癌组织中组织蛋白酶B的观察研究被引量：5
- 1998年
- 组织蛋白酶B(CB）为一溶酶体酶，能降解许多细胞外基质成分。其与许多人类及啮齿类肿瘤的生长浸润有关。本文采用免疫组化技术使用特异的免抗人肝CB抗体来研究人胃癌组织中的CB表达情况。结果显示：与正常胃组织相比，胃癌组织中CB的表达明显增高，且肿瘤细胞中CB表达增加与浸润深度、生长类型及淋巴结有无转移有关，而与组织学类型无关，统计学上有显著性差异（P＜0.05）。提示CB在胃癌组织中的表达与肿瘤的生长浸润有关，CB在肿瘤的浸润过程中起一定的作用。
- 刘颐施尧任卫平萧树东
- 关键词：胃肿瘤组织蛋白酶B免疫组织化学
- 表达HSV-TK痘苗病毒真核表达载体pMJ601的构建与鉴定
- 2002年
- 目的：构建含自杀基因（ＨＳＶ－ＴＫ）的痘苗病毒真核表达载体ｐＭＪ６０１，为进一步实施胃癌的基因治疗作必要准 备。方法：利用目的基因与载体的连接、感受态细胞的制备及转化、质粒抽提、琼脂糖凝胶电泳、酶切等多种基因工 程技术将胶纯化回收的ＨＳＶ－ＴＫ与ｐＭＪ６０１进行连接、转化及鉴定。结果：克隆在Ｘ－ｐＰＮＴ质粒上的ＨＳＶ－ＴＫ ＤＮＡ 成功地被克隆到经ＢａｍＨⅠ－ＨｉｎｄⅢ双酶切的ｐＭＪ６０１载体上。结论：重组ＨＳＶ－ＴＫ痘苗病毒真核表达载体ｐＭＪ６０１ 的构建，为胃癌自杀基因的基因治疗打下坚实的基础。
- 郜恒骏朱红音顾伟齐搂屹任卫平萧树东
- 关键词：自杀基因基因治疗
- 组织蛋白酶B酶联免疫吸附测定方法的建立被引量：4
- 2002年
- 背景:组织蛋白酶B(CB)与恶性肿瘤的分期、转移和预后关系密切。目的:建立CB酶联免疫吸附测定(ELISA)方法,以便评价肿瘤患者血清CB含量与预后的关系。方法:将含有CB cDNA的重组痘苗病毒转染Hela细胞,表达目的蛋白重组CB;经Western blot分析和制备型电泳纯化后,免疫新西兰大白兔,获得CB多克隆抗体。纯化后的抗体一部分作为固化抗体,另一部分用辣根过氧化物酶标记:棋盘滴定法确定工作浓度。结果:痘苗病毒真核表达系统可以高效表达目的蛋白。制备型电泳能简单、有效地纯化蛋白。重组CB免疫动物后,可获得高效价的CB多克隆抗体,用以制备相应的固化抗体和酶标抗体检测CB。结论:用重组CB免疫动物后可获得相应抗体,以建立CB检测的ELISA方法。
- 蒯小玲萧树东刘文忠任卫平童菊芳
- 关键词：组织蛋白酶B酶联免疫吸附
- 原位杂交检测胃癌组织中组织蛋白酶B的表达被引量：7
- 1998年
- 原位杂交检测胃癌组织中组织蛋白酶Ｂ的表达刘颐，施尧，王利民，任卫平，萧树东组织蛋白酶Ｂ（ＣａｔｈｅｐｓｉｎＢ，ＣＢ）是一细胞溶酶体巯基蛋白酶，能降解许多细胞外基质成分。国外许多学者认为，其可能参与了肠癌、前列腺癌等肿瘤的浸润转移［１－２］．但对ＣＢ在...
- 刘颐施尧王利民任卫平任卫平
- 关键词：胃癌组织蛋白酶B原位杂交
- 胃癌组织中组织蛋白酶B的表达研究被引量：6
- 1998年
- 组织蛋白酶Ｂ（ＣａｔｈｅｐｓｉｎＢ，简称ＣＢ）是细胞溶酶体巯基蛋白酶，可降解Ｌａｍｉｎｉｎ、Ｆｉｂｒｏｎｅｃｔｉｎ、Ⅳ型胶原等细胞外基质成分，继而破坏一系列组织屏障，参与肿瘤的浸润转移［１］。国外对肠癌、乳腺癌、前列腺癌中ＣＢ作用研究较多，而对胃癌中...
- 刘颐施尧王利民任卫平萧树东
- 关键词：组织蛋白酶B胃肿瘤原位杂交
- 组织蛋白酶B在胃癌组织中mRNA的变化被引量：1
- 1998年
- 运用地高辛自由引物法标记1020bp CB cDNA 探针行斑点印迹杂交,检测胃癌手术标本中CBmRNA 含量。结果表明:胃癌组织中 CBmRNA 含量非常显著地高于非癌组织(P<0.01。提示 CB 在胃癌组织中的表达增高可能与胃癌的进展有关。
- 刘颐施尧王利民任卫平任卫平
- 关键词：胃肿瘤MRNA组织蛋白酶B斑点印迹
- 重组人白细胞介素-2基因痘苗病毒真核表达载体的构建与鉴定被引量：2
- 2000年
- 目的：构建含人白细胞介素－２（ｈＩＬ－２）基因的痘菌病毒真核表达载体ｐＭＪ６０１，为进一步实施胃癌的基因治疗作必要准备。方法：利用质粒抽提、琼脂糖凝胶电泳、酶切、目的基因与载体的连接、感受态细胞的制备及转化和ＤＮＡ序列分析等多种基因工程技术，将纯化回收的ｈＩＬ－２基因分别与质粒ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡＳＫ＋／－及ｐＭＪ６０１进行连接、转化并签定。结果：克隆有ｈＩＬ－２基因的ｐＬＸＳＮ经ＥｃｏＲＩ－ＢａｍＨＩ酶切后，ｈＩＬ－２基因被成功地连接到质粒ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡＳＫ＋／－上，再经Ｓａｉｌ－ＢａｍＨＩ酶切后，ｈＩＬ－２基因又被克隆到ｐＭＪ６０１真核表达载体上。结论：重组ｈＩＬ－２基因痘苗病毒真核表达载体ｐＭＪ６０１的构建为胃癌的免疫基因治疗打下了坚实的基础。
- 郜恒骏朱红音顾伟齐楼屹任卫平萧树东
- 关键词：重组人白细胞介素2痘苗病毒真核表达载体胃癌基因治疗
- 实验性肝纤维化组织中细胞间粘附分子-1表达的研究
- 1997年
- 目的：探讨细胞间粘附分子-1(ICAM-I)的表达在实验性肝纤维化发生中的作用。方法：分别建立高脂饮食、低脂酒精饮食、高脂酒精饮食、四氯化碳大鼠实验性肝纤维化模型，用免疫组化方法观察造模肝组织中ICAM-I的表达。结果；ICAM-1表达于肝细胞膜上，其阳性细胞多分布于门管区、炎症区和灶性坏死区，其表达强度和肝脏炎症及纤维化程度相一致。在不同模型组中，ICAM-1表达强度依次以高脂饮食、低脂酒精饮食、高脂酒精饮食，四氯化碳次序而增强，且以四氯化碳组最为明显(P<0．05)，但前三组间无差异(P>0．05)。结论：在实验性肝纤维组织中，ICAM-1表达增加可能与肝脏炎性损伤和肝纤维化的发生有关。
- 陆伦根曾民德范建高李继强刘颐任卫平戴宁
- 关键词：实验性肝纤维化细胞间粘附分子-1肝脏炎症免疫组化方法纤维化程度
- 重组组织蛋白酶B的表达和纯化被引量：4
- 2002年
- 背景:研究表明组织蛋白酶B（CB）与肿瘤转移相关。目的:用基因工程技术生产大量重组CB,为研究CB的生物学特性和制备CB抗体供临床检测作准备。方法:用重组痘苗病毒转染真核细胞,采用真核表达目的蛋白CB,用聚丙烯酚胺凝胶电泳和免疫印迹法鉴定目的蛋白。根据CB的分子量和等电点,用制备型电泳纯化蛋白。结果:痘苗病毒真核表达系统可以高效表达目的蛋白,产量为0.12mg/10_8 细胞。重组CB的分子量（31kDa和25kDa）、等电点（4552～5.588）和免疫原性与天然CB一致。制备型电泳能简单、有效地纯化蛋白。结论:运用痘苗病毒真核表达系统可以高效表达CB。
- 蒯小玲萧树东任卫平童菊芳刘文忠
- 关键词：组织蛋白酶B痘苗病毒蛋白纯化基因工程免疫印迹法
