刘一江
- 作品数：5 被引量：19H指数：2
- 供职机构：四川农业大学生命科学与理学院更多>>
- 发文基金：四川省教育厅科学研究项目四川省应用基础研究计划项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 仙人掌抗菌肽的筛选分离纯化及性质研究
- 采用硫酸铵梯度盐析法提取金手球、金晃、银世界、量天尺、金琥锦、黄金柱缀化6种仙人掌在不同饱和度硫酸铵下沉淀的蛋白质组分，并分别进行抑菌性试验，以筛选含具有抗菌效果的蛋白质组分的仙人掌品种。用Sephadex G75和Se...
- 刘一江
- 关键词：仙人掌抗菌肽分离纯化抗菌活性
- 文献传递
- 不同苦瓜品种MAP30基因的克隆及序列分析被引量：5
- 2007年
- 采用PCR法从精选白皮苦瓜（JX）、穗农牌早优苦瓜（ZY）、碧翠苦瓜（BC）、银田牌长白苦瓜（YT）和银田牌蓝山大白苦瓜（LAN）5个品种中克隆到5个长度均为861bp的MAP30基因JX—MAP30、ZY—MAP30、BC-MAP30（Genebank accession No：DQ643967）、YT—MAP30（No：DQ643968）和LAN-MAP03。序列分析表明，BC-MAP30和YT-MAP30与已报道的MAP30基因分别存在2个和3个碱基的不同，均编码263个氨基酸残基组成的成熟蛋白，与其他葫芦科植物的Ⅰ型核糖体失活蛋白类以及天花粉毒蛋白、多花白树毒蛋白、肥皂草毒素的同源性分别为68．90％、82．75％、71．25％和66．45％，其90～220位氨基酸序列较为保守。二级结构预测表明，BC—MAP30和YT—MAP30编码的成熟肚在N端均有一个延伸的6个β片层。
- 杨洲平黄乾明刘一江陈平
- 关键词：核糖体失活蛋白苦瓜克隆
- 粗毛栓菌诱变菌株SAH-12漆酶的分离纯化及酶学性质研究被引量：10
- 2007年
- 粗毛栓菌Trametes gallica诱变菌株SAH-12是通过紫外诱变选育所得的漆酶高产菌株,Active-PAGE分析表明SAH-12在高氮低碳无机盐培养液(LM3)中至少分泌3种漆酶同工酶(Lac1、Lac2、Lac3)。采用硫酸铵盐析、透析和Sephadex-G75分子筛层析从其培养液中分离纯化得到电泳纯的Lac1,纯化倍数6.54,酶活性回收59.7%。Lac1经SDS-PAGE验证为一条带,其表观分子量为61.5kDa。Lac1为一种糖蛋白,含糖量11.6%,等电点pI4.40,催化氧化底物ABTS的最适反应温度为60℃,最适pH为2.6,Km值为25μmol/L。Lac1在40℃(pH4.0)以下和pH1.5～5.0(28℃)范围内稳定。金属离子Fe2+、Ag+、Hg2+和Cr3+与抑制剂DTT、SDS、EDTA和DMSO对Lac1有抑制作用,其中Fe2+和DTT完全抑制酶活,而Cu2+对酶有明显激活作用,Mn2+、Zn2+对酶活影响不大。Lac1不仅可使一些合成染料明显脱色,而且对苹果汁多酚祛除也有较好效果。40℃用该酶(1U/mL)处理苹果汁5h,其多酚含量可降低40%。
- 黄乾明杨婉身陈华萍张寒飞刘一江谢君
- 关键词：合成染料苹果汁
- 苦瓜核糖体失活蛋白MAP30基因的克隆及原核表达被引量：1
- 2007年
- 以载有银田牌长白苦瓜MAP30基因(YT-MAP30,Genebank accession No:DQ643968)的质粒DNA(pMD-YT-MAP30)为模板,PCR扩增其成熟肽编码区YTm-MAP30,与原核表达载体pET-30a(+)连接构建重组表达质粒pET-YTm-MAP30,酶切和测序鉴定后转化大肠杆菌BL21(DE3)PlysS感受态细胞,菌落PCR筛选鉴定阳性菌落。30℃培养阳性菌落,IPTG诱导表达不同时间,其表达产物用SDS-PAGE检测并进行可溶性分析。DNA测序结果表明重组质粒pET-YTm-MAP30中YTm-MAP30的序列和插入位点正确。SDS-PAGE分析结果显示IPTG诱导4 h后在35 kD处出现一条增加的表达蛋白条带,且以可溶形式表达。为应用原核表达系统生产MAP30蛋白提供了实验依据。
- 杨洲平黄乾明刘一江陈平杨菲王晗光
- 关键词：分子克隆基因表达PCR大肠杆菌
- 仙人掌抗菌肽的筛选、分离纯化及性质研究被引量：2
- 2007年
- 目的：研究仙人掌植物是否具有起抑菌作用的抗菌肽，并对其进行分离纯化和部分性质研究。方法：采用梯度盐析的方法提取6种仙人掌不同饱和梯度硫酸铵沉淀的蛋白质组分进行抑菌性试验，筛选蛋白质组分具有抗菌效果的仙人掌品种。用Sephadex G-75和Sephadex G-25柱层析对抗菌效果最为显著的蛋白质组分进一步分离纯化，并对纯化到的具有抗菌活性的多肽物质进行分子量、理化性质和抗菌活性检测。结果：发现4种仙人掌中存在对金黄色葡萄球菌有抗菌作用的小分子量蛋白质成分。其中金手球所含蛋白质组分的抗菌效果最为显著，并从中分离纯化得到具有抗菌活性的多肽物质，命名为MH—AMP—I。MH—AMP—I的分子量（Mr）约为8511Da，在pH2．5～7．5的乙酸铵缓冲液中抗菌活性强，且具有一定的热稳定性，对检测的病原菌具有广谱抗菌活性。
- 刘一江黄乾明杨洲平陈平杨菲
- 关键词：仙人掌抗菌肽分离纯化
