刘涛
- 作品数：6 被引量：82H指数：6
- 供职机构：中国科学院过程工程研究所更多>>
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- 相关领域：生物学医药卫生化学工程更多>>
- 高效液相色谱/质谱法识别不同明胶酶解产物中特征多肽被引量：22
- 2008年
- 在不同动物胶原蛋白序列比对基础上,利用高效液相色谱/质谱联用技术(HPLC/MS)建立一种通过特征多肽进行明胶鉴别的方法。实验以牛明胶和猪明胶为对象,序列比对结果表明,牛和猪的Ⅰ型胶原蛋白α1链和α2链均存在氨基酸序列差异。利用胰蛋白酶将牛明胶和猪明胶降解,通过HPLC/MS分析了两种明胶酶解产物中的多肽片段。结果表明:牛明胶和猪明胶酶解产物中均可检测出存在序列差异的特征性多肽,其氨基酸序列差异与两种胶原蛋白序列比对结果中的序列差异一致;酶解产物中特征多肽上的脯氨酸存在不同程度的羟基化修饰,特征多肽的相对含量主要受明胶分子量范围影响。利用HPLC/MS检测明胶酶解产物中的特征多肽是一种鉴别牛明胶和猪明胶的有效方法。
- 张贵锋刘涛王前雷建都马光辉苏志国
- 关键词：明胶酶解
- 中药阿胶的质量控制方法研究被引量：26
- 2009年
- 使用胰蛋白酶将阿胶、牛皮胶和猪皮胶进行了酶切处理,利用高效液相色谱质谱联用技术比较了3种胶酶解产物中多肽组成的差异。结果表明阿胶、牛皮胶和猪皮胶的酶解产物中存在有氨基酸序列差异的特征多肽,通过检测样品胶中特征多肽的序列可鉴别样品胶的种类。实验使用该方法检测了16种不同产地的阿胶样品,其中2种样品中检测出猪皮胶的特征多肽,1种胶中检测出牛皮胶的特征多肽。实验对阿胶预处理、酶解方法以及质谱分析过程中影响多肽识别的因素进行了研究。结果表明通过特征多肽追溯样品胶的动物来源是一种阿胶质量控制的有效方法。
- 张贵锋刘涛王前罗坚秦玉峰尤金花田守生余蓉苏志国
- 关键词：阿胶酶解
- 凝胶过滤色谱-多角度激光散射法测定琥珀酰明胶自由氨基修饰度被引量：15
- 2007年
- 琥珀酰明胶作为血浆代用品的临床疗效与其分子量分布和修饰度密切相关。本研究利用高效凝胶过滤色谱-多角度激光散射法(HPSEC-MALLS)并结合2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)衍生法,探索建立一种测定琥珀酰明胶修饰度的方法。实验利用TNBS将琥珀酰明胶衍生,通过HPSEC-MALLS测定琥珀酰明胶的分子量变化,计算出琥珀酰明胶的修饰度。实验以人血清白蛋白为模型进行了方法验证,结果表明:该方法能较好地表征人血清白蛋白在TNBS衍生过程中的分子量变化,实验值与根据其氨基酸组成计算值一致。实验在HPSEC-MALLS测定琥珀酰明胶及TNBS衍生后琥珀酰明胶分子量及分布的基础上,利用凝胶过滤色谱分子量-保留时间拟合曲线,计算得到琥珀酰明胶的自由氨基修饰度为38%。结果表明利用高效凝胶过滤色谱-多角度激光散射法结合2,4,6-三硝基苯磺酸衍生法测定琥珀酰明胶的修饰度是可行的。
- 刘涛张贵锋周卫斌苏志国
- 关键词：琥珀酰明胶凝胶过滤色谱三硝基苯磺酸
- 基于串联质谱的鱼皮明胶鉴别研究被引量：6
- 2009年
- 在胶原蛋白序列比对基础上,以虹鳟鱼明胶、猪明胶和牛明胶为模型,利用高效液相色谱-串联质谱技术(HPLC-MS/MS)研究了3种明胶降解多肽组成的差异。使用胰蛋白酶将鱼皮明胶进行了酶解处理,使用HPLC-MS/MS对酶解产物中的多肽组成进行了分析,并与猪和牛明胶酶解产物中的多肽进行了比较。结果表明鱼明胶酶解产物中存在特征多肽,通过特征多肽的种类可区别鱼明胶与猪和牛明胶,研究了明胶多肽中脯氨酸羟基化修饰、明胶分子量范围和脱酰胺化对特征多肽识别的影响。研究表明利用HPLC-MS/MS技术通过识别明胶酶解产物中的特征多肽进行鱼皮明胶鉴别具有可行性。
- 王前张贵锋刘涛刘永东马润宇苏志国
- 关键词：酶解
- 阿胶生产工艺中胶原蛋白降解过程研究被引量：13
- 2009年
- 目的:研究阿胶生产工艺中胶原蛋白的降解过程以及关键单元操作。方法:在阿胶生产过程中取样并分析其氨基酸组成和相对分子质量范围,利用高效液相色谱质谱技术分析其多肽组成。结果:阿胶生产工艺中原料胶中甘氨酸含量提高了16.8%,表明原料胶中胶原蛋白含量逐渐升高;凝胶过滤色谱分析结果表明原料胶相对分子质量逐渐降低,胶原蛋白的降解过程主要集中在常压浓缩阶段;质谱分析结果表明原料胶内除胶原蛋白外还存在细胞外基质蛋白和部分细胞骨架蛋白的降解物,在常压浓缩过程中以泡沫形式被去除的物质主要为非胶原类蛋白的降解物。结论:阿胶生产工艺中胶原蛋白的降解过程主要集中在常压浓缩阶段,常压浓缩过程是影响阿胶产品组成的关键单元操作。
- 张贵锋刘涛王前罗坚解茹秦玉锋尤金花田守生苏志国
- 关键词：阿胶生产工艺胶原蛋白降解
- 液相色谱/质谱联用法分析不同年龄鼠皮肤中I型、III型胶原蛋白相对含量被引量：20
- 2007年
- 哺乳动物皮肤中真皮内的胶原蛋白含量约占70%,主要是I型、III型和少量V型胶原蛋白。利用稀酸溶解和酶法提取了大鼠皮肤中的总胶原蛋白,将胶原蛋白粗提品在60℃变性后用胰蛋白酶进行降解,液相色谱/质谱联用法分析两种胶原蛋白的特征多肽,并研究不同生长期大鼠皮肤中I型和III型胶原蛋白相对含量。结果表明,大鼠皮肤中的III型胶原蛋白的相对含量随生长期延长逐渐降低,而I型胶原蛋白的相对含量逐渐升高,8周后两种胶原蛋白的比例趋于稳定。表明使用高效液相色谱/质谱联用法分析组织中的胶原蛋白类型及其动态变化具有可行性,为更好的临床应用提供实验基础。
- 崔琳张贵锋刘涛闭静秀马润宇苏志国
- 关键词：胶原蛋白酶解高效液相色谱质谱
