吕黎
- 作品数：8 被引量：23H指数：3
- 供职机构：河南师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省高校科技创新团队支持计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 日本沼虾血蓝蛋白基因cDNA全长克隆及表达分析被引量：8
- 2012年
- 目的克隆日本沼虾血蓝蛋白基因,进行生物信息学及时空表达分析。方法利用cDNA末端快速扩增技术(RACE)从肝胰腺中克隆血蓝蛋白基因cDNA全长序列,用生物学软件对其序列进行生物信息学分析,时空表达分析采用实时荧光定量PCR方法。结果日本沼虾血蓝蛋白基因cDNA全长2 151 bp,包含14 bp的5'UTR、148 bp的3'UTR和189 bp的开放阅读框(ORF)。ORF编码663个氨基酸,预测分子量为76.65kD,理论等电点为5.42,含有典型的3个血蓝蛋白结构域和2个保守的铜离子结合位点。与淡水螯虾、凡纳滨对虾血蓝蛋白相似性分别为70%和63%。该基因在肝胰腺中的相对表达量最高,肌肉和血细胞表达较弱,大颚器官、表皮和卵巢几乎不表达;肝胰腺血蓝蛋白基因的表达量在蜕皮间期最高,蜕皮后期和蜕皮前期较低;嗜水气单胞菌刺激后肝胰腺中的表达量显著增加。结论与其他甲壳动物相似,日本沼虾血蓝蛋白基因具有典型的结构域和保守的铜离子结合位点,在蜕皮间期的肝胰腺中呈高表达,是参与机体免疫防御反应的一种重要分子。
- 王文锋夏西超王雪参吕黎杨洪宁黔冀
- 关键词：血蓝蛋白CDNA末端快速扩增实时荧光定量PCR日本沼虾
- 咪唑类物质KK-42对日本沼虾α2-巨球蛋白基因表达的影响
- 2014年
- 为探讨KK-42提高感染嗜水气单孢菌的日本沼虾幼虾成活率的机制，实验首次克隆了012M部分序列，研究了α2M基因的时空表达以及KK-42对其表达和活力的影响。将体长3．5-5．0cm的日本沼虾幼虾随机分为2组，分别用1．95×10^-4mol／L的KK-42溶液和不含KK_42的溶液浸泡处理1min，12h后，每组再分为2个亚组，分别向虾腹部注射嗜水气单胞菌菌悬液（菌攻毒实验组和菌攻毒对照组）或生理盐水（实验组-1和对照组-1），于不同时间点测定幼虾的成活率、α2M基因表达水平和活力的变化。结果显示，KK42预处理可显著提高感染嗜水气单胞菌的日本沼虾幼虾成活率。经BLAST比对，克隆的α2M部分mRNA序列与罗氏沼虾α2M具有90％以上同源性。实时荧光定量PCR实验显示，α2M基因表达水平在血细胞中最高，且以蜕皮前期最为显著。KK-42处理的幼虾血细胞012M基因的表达无显著性差异；嗜水气单胞菌刺激使血细胞α2MmRNA水平在3h比0h提高了580％，其活力在24h增幅为47．5％；而菌攻毒实验组mRNA水平在6-48h明显高于菌攻毒对照组，尤其在12h，增幅为511％，其活力水平也呈同样的变化趋势。研究表明，KK-42预处理能上调感染嗜水气单胞菌的幼虾血细胞α2M基因的转录水平，诱导α2M活力增强，这可能增强了幼虾的免疫水平，从而提高成活率。
- 王佩吕黎张哲亮吕艳杰杨洪宁黔冀
- 关键词：日本沼虾嗜水气单胞菌基因表达
- 保幼激素拮抗物KK-42对凡纳滨对虾FAMeT时空表达的影响
- ＜正＞我们的前期研究证明,保幼激素拮抗物KK-42对凡纳滨对虾的生长具有显著的促进作用,已经在大塘养殖中得到推广应用,但其作用机制尚不清楚。为给今后科学合理地使用KK-42提供理论依据,本文研究了直接调节甲壳动物生长的重...
- 夏西超王雪参李昕吕黎宁黔冀
- 关键词：凡纳滨对虾
- 文献传递
- 日本沼虾cytMnSOD和mtMnSOD基因全长cDNA克隆及表达被引量：1
- 2012年
- 利用RACE技术从日本沼虾肝胰腺中克隆了cytMnSOD和mtMnSOD基因cDNA全长序列。cytMnSOD基因cDNA全长1 233 bp,开放阅读框为858 bp,编码286个氨基酸,N端含有60个氨基酸残基组成的延伸区;mtMnSOD基因cDNA全长1 113 bp,开放阅读框为654 bp,编码218个氨基酸,N端含有20个氨基酸残基组成的信号肽;cytMnSOD和mtMnSOD预测蛋白分子量及等电点分别为31.33、24.05 ku和5.62、7.12。日本沼虾cytMnSOD推导的氨基酸序列与其mtMnSOD的相似性为40%,二者均含有MnSOD的特征肽段(DVWEHAYY)、4个Mn2+结合位点和2个N-糖基化位点。Real-time PCR结果表明,cytMnSOD和mtMnSOD在日本沼虾肝胰腺、肌肉、血细胞、大颚器官、卵巢和鳃等组织均有表达,其中肝胰腺表达量最高;肝胰腺cytMnSOD和mtMnSOD基因的表达量在蜕皮间期最高,蜕皮后期和蜕皮前期较低。嗜水气单胞菌刺激后3 h,肝胰腺cytMnSOD和mtMnSOD的表达量显著增加,推测MnSOD是参与机体免疫防御反应的一种重要分子。
- 王文锋关建义吕黎刘方杨洪宁黔冀
- 关键词：日本沼虾克隆
- KK-42对凡纳滨对虾物质储备相关酶类基因表达的影响被引量：4
- 2013年
- 甲壳动物生长发育总是与蜕皮联系在一起的[1]。为了完成蜕皮,顺利实现生长,甲壳动物在蜕皮间期进行快速大量取食,临近蜕皮前取食逐渐减少,直至蜕皮时停止,待蜕皮后动物具备了坚硬外壳,又开始缓慢取食[2 3]。
- 夏西超杨洪宁黔冀吕黎吕艳杰
- 关键词：凡纳滨对虾基因表达
- 保幼激素拮抗物KK-42对凡纳滨对虾FAMeT时空表达的影响
- 2011年
- 保幼激素拮抗物KK-42对凡纳滨对虾(Penaeus schmitti)的生长具有显著的促进作用,并已在大塘养殖中得到推广应用,但其作用机制尚不清楚。为给今后科学合理地使用KK-42提供理论依据,本研究对直接调节甲壳动物生长的重要激素甲基法呢酯(MF)合成的关键酶——法呢酸O-甲基转移酶(FAMeT)的时空表达以及KK-42对其表达的影响进行探讨。将体长3.5～5.0cm凡纳滨对虾幼虾随机分为2组,分别用1.95×10-4mol/L的KK-42溶液或不含KK-42的溶液浸泡处理1min,之后在相同条件下常规饲养。不同组织中FAMeT mRNA水平定量分析采用real-timePCR,血淋巴中MF滴度测定采用正相高效液相色谱法。结果显示,对照组FAMeT在眼柄、肌肉组织中的表达模式与大颚器官明显不同:在实验观察期间,前者组织中 mRNA水平相对较低且变化较小,而在大颚器官则出现明显的波动,第2天、6天、7天、8天FAMeT mRNA含量比第0天均增加1倍以上(P<0.01)。实验期间血淋巴中MF滴度逐渐升高。KK-42处理后,上述3个组织中FAMeT表达均出现不同程度下调,尤以大颚器官最为显著,mRNA水平降低19.7%～63.4%(第8天除外);KK-42处理也导致MF滴度下降。研究表明,KK-42可显著抑制凡纳滨对虾眼柄、肌肉、特别是大颚器官FAMeT转录,降低血淋巴MF滴度,这可能是其促生长的机制之一。
- 夏西超王雪参李昕吕黎宁黔冀
- 关键词：凡纳滨对虾
- 咪唑类物质KK-42对日本沼虾几丁质酶基因表达的影响被引量：2
- 2014年
- 为探讨咪唑类物质KK-42提高感染嗜水气单孢菌的日本沼虾幼虾成活率的机制,首次克隆了日本沼虾几丁质酶基因-3部分序列,研究了其时空表达及酶活力的变化。将体长3.5~5.0cm的日本沼虾幼虾随机分为两组,分别用1.95×10-4 mol/L的咪唑类物质KK-42溶液（试验组1）或不含咪唑类物质KK-42的溶液（对照组1）浸泡处理1min,12h后,分别注射嗜水气单胞菌菌悬液（菌攻毒试验组和菌攻毒对照组）或生理盐溶液（试验组2和对照组2）,不同时间测定幼虾的成活率,分析几丁质酶基因-3mRNA水平及其酶活力的变化。结果显示,12-48h时,菌攻毒试验组的成活率比菌攻毒对照组增加133%以上。克隆的日本沼虾几丁质酶基因-3部分mRNA序列与其他甲壳类具有90%以上同源性。几丁质酶基因-3表达水平在肝胰腺中最高,以蜕皮前期最为显著。与对照组1相比,在12h,试验组1几丁质酶基因-3mRNA水平和酶活力分别增高了150%和75%;菌攻毒试验组mRNA水平在12~48h明显高于菌攻毒对照组,尤其在24h,增幅高达304%,酶活力在24h比菌攻毒对照组增高48%。咪唑类物质KK-42预处理能显著上调感染嗜水气单胞菌的日本沼虾幼虾肝胰腺几丁质酶基因-3的转录、诱导酶活力增强,这可能是咪唑类物质KK-42提高幼虾成活率的机制之一。
- 王佩吕艳杰吕黎杨洪宁黔冀
- 关键词：日本沼虾嗜水气单胞菌基因表达
- 甲壳动物几丁质酶基因结构与功能的研究进展被引量：10
- 2011年
- 甲壳动物几丁质酶不仅参与蜕皮过程,也参与几丁质类食物的消化和抵御病原体的侵染,近年来受到了越来越多的关注。本文对甲壳动物几丁质酶基因的分子结构及其功能的最新进展作一综述。
- 吕黎宁黔冀
- 关键词：甲壳动物几丁质酶基因
