姜传涛
- 作品数：11 被引量：48H指数：5
- 供职机构：首都医科大学基础医学院神经科学研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划北京市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Nurrl可以维持成年多巴胺能神经元表型并可以通过基因治疗保护、挽救DA进一步变性
- ＜正＞ Nurr1对胚胎期中脑多巴胺能神经元的分化是必需的,成年期Nurr1持续表达说明其在维系DA表型上发挥作用。用Nurr1表达载体转染小鼠中脑多巴胺神经元细胞系MN-9D,western blotting检测,细胞...
- 杨秋慧姜传涛杨慧徐群渊
- 文献传递
- 干细胞的体外培养及对帕金森病实验治疗的研究
- 为了探讨对帕金森病（Parkinson's Disease,PD）进行细胞治疗的新途径,该实验在体外（in vitro）对神经干细胞（Neural Stem Cells,NSCs）和骨髓基质细胞（Marrow Strom...
- 姜传涛
- 关键词：帕金森病神经干细胞骨髓基质细胞酪氨酸羟化酶感染率
- 文献传递
- 骨髓基质细胞的分化潜能及对帕金森病治疗的应用前景
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- 杨慧鲁玲玲姜传涛徐群渊
- 文献传递
- 人碱性成纤维细胞生长因子基因在COS-7细胞中的表达及活性检测被引量：6
- 2000年
- 目的 获得人碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ），用于治疗神经系统疾病；克隆添加 Ｋｏｚａｋ序列的 ｂＦＧＦ ｃＤＮＡ序列，用于真核细胞表达。方法 提取国人脑胶质瘤细胞系 ＢＴ３２５总 ＲＮＡ，ＲＴ－ＰＣＲ法扩增 ｂＦＧＦ ＣＤＮＡ片段，重组于 ｐＧＥＭ－３ｚｆ（＋）载体，测序正确后构建表达载体，转染猴肾成纤维细胞系 ＣＯＳ－７，Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ检测表达，收集培养上清用 ＰＣ－１２进行活性检测。结果ＲＴ－ＰＣＲ扩增到４７３ｂｐ的带有Ｋｏｚａｋ序列的ｃＤＮＡ片段；成功构建了真核表达载体；在ＣＯＳ－７得到了表达，并有一定的生物活性。结论 由克隆到的ｂＦＧＦ ｃＤＮＡ片段构建的真核表达载体能在ＣＯＳ－７中表达、分泌．并具有生物活性。
- 于凤山段德义陈立南秦丽华徐群渊姜传涛
- 关键词：CDNA克隆BLOT
- 全文增补中
- Nurr1在MN9D细胞中的过表达及其对酪氨酸羟化酶的影响被引量：4
- 2003年
- 目的 :观察MN9D细胞中Nurr1的表达和分布及Nurr1过表达对酪氨酸羟化酶的影响。 方法 :应用高压液相色谱、免疫细胞化学、转基因、Westernblot和Northernblot等方法检测了MN9D细胞中多巴胺及其代谢物的水平和Nurr1蛋白在细胞中的分布 ,建立了过表达Nurr1的细胞株并观察了Nurr1过表达对TH基因的影响。结果 :MN9D细胞裂解液中含有大量多巴胺及其代谢物 ;Nurr1蛋白主要分布在MN9D细胞的胞质中 ,尤以核周最多 ;MN9D细胞中有Nurr1的mRNA存在和蛋白质的表达 ;过表达Nurr1的MN9D细胞A1株酪氨酸羟化酶表达增高。结论 :Nurr1与多巴胺能神经元发育有关 ,有可能用于帕金森病的基因治疗。
- 杨秋慧杨慧赵焕英姜传涛徐群渊
- 关键词：NURRL酪氨酸羟化酶帕金森病基因治疗
- 人胚胎海马神经干细胞体外培养方法的建立被引量：2
- 2004年
- 为建立人胚胎海马神经干细胞的体外培养方法 ,防止神经干细胞在培养过程中的分化 ,确立最佳的传代时机和方法 ,分离 1 6周人胚海马组织 ,采用无血清培养基对所分离的神经干细胞进行体外培养 ,比较不同培养条件与方法所获得的神经球数量的差异。结果 :建立了人胚胎海马神经干细胞体外培养的优化条件 ,确立了最佳传代方法与时机。提示 :人胚胎海马神经干细胞在体外抑制分化的条件下可以长期处于未分化状态增生 ,并且可多次传代。
- 赵春礼孙晓红鲁强刘玉军李敏姜传涛杨慧徐群渊
- 关键词：神经干细胞体外培养
- 胎儿脑组织体外保存获取神经干细胞的时限被引量：16
- 2002年
- 目的 探讨人胎儿脑海马组织体外保存不同时限后培养获取神经干细胞的可行性。 方法 利用无血清培养 ,从死亡后孵育在 4℃Hank液 0h、4h、2 4h、4 8h、72h及 96h的胎儿海马分离细胞 ,在体外连续传代培养 ;采用免疫荧光细胞化学方法检测培养细胞的神经上皮干细胞蛋白 (nestin)表达、经BrdU孵育后的BrdU表达以及诱导分化后的神经元标记 (tubulin)或星型胶质细胞抗原 (GFAP)表达 ;比较不同时限的细胞在Nestin的表达、增殖能力和诱导分化后神经元及胶质细胞比例的差异。 结果 从保存在 4℃Hank液 72h以内的各组胎儿海马中均可获得具有连续增殖能力的神经球 ,培养出的细胞Nestin表达为阳性 ,通过BrdU的摄取表明细胞处于活跃的有丝分裂状态 ,在此期限内各组之间无明显差异 ;诱导分化后的神经元和胶质细胞比例在各组之间亦相似 ;但随着在Hank液中孵育时间的延长 ,所获得的神经球数量呈减少趋势 ;在 96h组则未能获得神经球。 结论 人胎儿海马组织在 4℃Hank液中孵育 72h内可培养出呈神经球样生长的神经干细胞 。
- 姜传涛杨秋慧苏玉金赵春礼杨慧徐群渊
- 关键词：胎儿脑组织体外保存神经干细胞无血清培养
- 胎儿海马神经干细胞的体外培养及神经元前体细胞的纯化被引量：7
- 2002年
- 目的 从人胎儿海马分离培养具有自我更新和多向分化能力的神经干细胞 ,并从中纯化神经元前体细胞。 方法 利用无血清培养从胚胎 4个月的胎儿海马区分离细胞 ,并在体外连续传代培养 ;采用免疫荧光细胞化学技术检测神经上皮干细胞蛋白 (nestin)的表达、经BrdU孵育后的BrdU表达 ;比较两种诱导分化方法所获得的神经元和胶质细胞的比例差异 ;利用单细胞克隆技术纯化神经元前体细胞。 结果 分离的细胞具有连续克隆能力 ,在体外培养了 16个月 ,传了 4 3代 ;细胞冻存、复苏后仍保持干细胞特性 ;培养的细胞呈Nestin阳性 ,在BrdU孵育后呈BrdU阳性 ,诱导分化后的细胞能够表达Tubulin、NeuN或GFAP ;利用无血清诱导所得到的分化细胞中神经元的比例约占 80 % ,而血清诱导的分化细胞中胶质细胞的比例则大于 90 %。利用单细胞克隆技术可从神经球中纯化的细胞表达Nestin ,并且全部分化成神经元。 结论 从胎儿海马区分离的细胞具有自我更新能力和多向分化潜能 ,属于神经干细胞 。
- 姜传涛赵春礼杨秋慧杨慧王元身鲁强徐群渊
- 关键词：胎儿海马神经干细胞体外培养神经元前体细胞纯化无血清培养
- 转基因骨髓基质细胞自体移植对帕金森病猴模型的治疗研究
- ＜正＞ 骨髓基质细胞（MSCs）是骨髓内一种具有多向分化潜能的干细胞类型。近年来的研究发现MSCs在体内外可分化成神经元和胶质细胞,并被用于帕金森病（PD）大鼠模型的细胞治疗和基因治疗研究。鉴于MSCs可从少量的骨髓中获...
- 鲁玲玲姜传涛刘玉军赵春礼杨慧徐群渊
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- 成年大鼠及猴骨髓基质细胞的体外培养及向神经元的分化诱导被引量：8
- 2003年
- 为了探讨成年动物骨髓基质细胞的体外培养和神经元诱导及其不同培养时程对外源基因的转染率,本实验采用直接和间接两种方法分离、培养成年大鼠和猴的骨髓基质细胞。在体外进行神经元诱导,用免疫细胞化学方法进行鉴定;用携带酪氨酸羟化酶基因的逆转录病毒载体转染体外培养第1～10代大鼠骨髓基质细胞,经免疫细胞化学鉴定并计算转染率。结果显示,成年大鼠和猴骨髓基质细胞以未分化状态至少可持续培养20余代,部分细胞表达干细胞的标志蛋白nestin,经BrdU孵育后呈BrdU抗体免疫阳性;经诱导后细胞具有典型的神经元形态,表达神经元的特异性蛋白NeuN;培养第3代至6代的骨髓基质细胞对外源性基因的转染效率较其他时程明显增高。实验结果说明,骨髓基质细胞可以在体外培养并被诱导成为神经元,它还可携带外源性治疗基因。
- 姜传涛杨秋慧刘玉军赵焕英杨慧徐群渊
- 关键词：成年大鼠骨髓基质细胞体外培养神经元转染率
