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尹小菲: 作品数：11 被引量：10H指数：2; 供职机构：成都医学院生物医学系更多>>; 发文基金：浙江省科技厅国际合作项目国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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筛选上调宿主ARGs表达的KSHV免疫调节基因: 目的：从KSHV的免疫调节基因中筛选能够激活宿主抗艾滋病基因表达的特异基因。方法：以KSHV基因组为模板,PCR扩增待筛选的18条基因的开放阅读框,通过T-A克隆的方法将其分别克隆至PIRES2-EGFP真核表达载体。重...; 尹小菲; 关键词：艾滋病病毒; 文献传递

卡波氏肉瘤相关病毒感染激活Jurkat细胞抗-HIV基因表达的研究被引量：2: 2010年; 目的:观察Jurkat细胞感染卡波氏肉瘤相关病毒(Kaposi's sarcoma-associated herpes virus,KSHV)后细胞内几条主要的抗HIV作用的基因(RANTES、APOBEC3G、APOBEC3F、MX1、MX2)表达情况。方法:首先用佛波酯(TPA)(20ng/ml)刺激BCBL-1细胞72小时,提取KSHV病毒滤液。然后把含KSHV滤液的RPMI-1640培养Jurkat细胞。24小时后,分别在感染后第3、5天收集细胞,提取细胞总RNA,通过实时定量PCR检测分析相关基因的表达情况。结果:通过对KSHV感染不同时期的细胞抗-HIV基因表达分析,结果显示:与未感染组相比,KSHV感染组的Jurkat细胞内的多条抗HIV-1基因表达上调。感染第3天,RANTES上调123倍,APOBEC3G上调3.12倍,A POBEC3F上调1.18倍,MIX1上调2.75倍,MIX2上调4.35倍,感染第5天RANTES上调11.91倍,MX1上调2.72倍,MIX2上调2.22倍。结论:KSHV感染在一定程度上激活Jurkat细胞抗HIV相关基因的表达。; 陈彬谭晓华王小波尹小菲杨磊; 关键词：KSHV HIV-1 抗HIV-1

FGF19调控肿瘤细胞增殖和自噬的生物学功能研究被引量：1: 2018年; 目的研究成纤维细胞因子19(FGF19)在调控肿瘤细胞增殖和自噬中的生物学功能。方法采用不同浓度的FGF19重组蛋白处理肿瘤细胞,观察细胞的形态及生长情况。CCK-8检测经FGF19重组蛋白处理后的细胞增殖情况。采用免疫印迹检测FGF19重组蛋白处理对肿瘤细胞内自噬体标志蛋白LC3以及自噬相关蛋白p62表达的影响。利用免疫荧光技术检测FGF19重组蛋白处理后细胞内自噬斑点的变化。结果 FGF19重组蛋白处理可以促进肿瘤细胞的增殖;免疫印迹结果显示,FGF19处理抑制肿瘤细胞内LC3-II的表达;免疫荧光结果显示,经过FGF19重组蛋白处理后的肿瘤细胞内LC3斑点比对照组明显减少。结论一定浓度的FGF19能促进肿瘤细胞的增殖,抑制其自噬。; 邓晓微杨婵王嘉宝尹小菲李静怡; 关键词：细胞增殖细胞自噬

抗HIV-1免疫基因的研究进展: 2012年; 人类免疫缺陷病毒1型(human immunodeficiency virus type 1,HIV-1)是艾滋病(Acquired Immune Deficiency Syndrome,AIDS)的病原体。HIV感染使人体免疫系统中最重要的CD4+T淋巴细胞减少,从而破坏人的免疫系统,最终使免疫系统崩溃,丧失对各种疾病的抵抗能力而并发多种感染和肿瘤最终导致死亡。宿主的一些抗艾滋病免疫基因如载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白3G、正常T细胞表达分泌的调节活化蛋白等在抑制HIV感染和延缓感染者疾病进展中都起着非常重要的作用。文章主要综述人体内抗HIV病毒的部分免疫基因及其作用机制。; 尹小菲谭晓华罗燕杨磊; 关键词：人类免疫缺陷病毒1型

miRNA与卡波氏肉瘤: 2010年; microRNA(miRNA)是一类长度约为21～25个核苷酸RNA,它在转录后水平调节靶基因表达。miRNA在物种进化中相当保守,其表达有组织特异性和时序特异性,其主要功能是负调控基因表达。有研究表明,miRNA在发育、细胞增殖、凋亡、脂类代谢、激素分泌及肿瘤发生等多种生理和病理过程中密切相关。本文着重介绍miRNA的产生,作用机制,与肿瘤的关系,以及在卡波氏肉瘤中的研究进展。; 王进唐永华尹小菲; 关键词：微小RNA 卡波氏肉瘤肿瘤

炎症性肠病治疗的新目标--黏膜愈合: 黏膜愈合(mucosal healing)是许多胃肠道疾病(例如消化性溃疡)的重要治疗目标之一.在对生物制剂用于治疗克罗恩病(Crohn disease,CD)的临床研究中观察到不少患者出现黏膜愈合,这一现象引起临床医生...; 陈旻湖尹小菲; 关键词：炎症性肠病黏膜愈合生物制剂

vMIP-Ⅰ激活Jurkat细胞抗-HIV基因表达的研究被引量：1: 2012年; 本研究通过构建真核表达载体pEGFP-N3-vMIP-Ⅰ,电穿孔法将其转染至Jurkat细胞,荧光定量PCR检测vMIP-Ⅰ基因对Jurkat细胞内CCL5、APOBEC3G、APOBEC3F、等抗-HIV基因表达水平的影响,从而探讨vMIP-Ⅰ抗HIV感染的机制。结果显示:成功构建了pEGFP-N3-vMIP-Ⅰ载体,电穿孔转染效率达到40%左右,与转染空载体组相比,vMIP-Ⅰ转染组的Jurkat细胞内CCL5、A3G、A3F和MX1分别上调7.37倍、1.58倍、2.42倍和2.06倍。研究结果表明:vMIP-Ⅰ基因可激活Jurkat细胞内一些抗HIV相关基因的表达,这可能是vMIP-Ⅰ基因抗HIV感染的机制之一。; 尹小菲陈彬谭晓华罗燕杨磊; 关键词：KSHV JURKAT

三磷酸腺苷结合盒转运体A1蛋白第二跨膜结构域缺失突变体的构建及其抗砷性研究被引量：3: 2012年; 目的检测三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)蛋白第2跨膜结构域(the second transmembrane domain,TMD2)中关键的抗砷结构域。方法采用重叠区扩增基因拼接法构建三磷酸腺苷结合盒转运体A1基因TMD2的一系列缺失突变体,分别转染至HeLa细胞,激光共聚焦观察其定位,Cell Counting Kit-8检测48 h急性砷中毒后生存率的变化,原子荧光吸收光谱法检测细胞内的总砷含量。结果激光共聚焦证实各突变体的编码蛋白均定位在HeLa细胞的细胞膜上。CCK-8结果显示,转染胞外第4、5环,胞内第4、5环缺失突变体的HeLa细胞IC50分别为33.18、32.84、33.45、34.29μmol.L-1,与转染野生型三磷酸腺苷结合盒转运体A1质粒的HeLa细胞(IC50为33.96μmol.L-1)无显著差异,均高于空载体转染对照组(IC50为19.01μmol.L-1)。转染胞外第6环缺失突变体HeLa细胞的IC50为19.95μmol.L-1,与空载体对照组无显著差异,显著低于野生型三磷酸腺苷结合盒转运体A1质粒转染组。原子荧光分光光度法结果显示,转染胞外第6环缺失三磷酸腺苷结合盒转运体A1的HeLa细胞内砷含量与转染空载体接近,而转染其他突变体的结果与转染野生型三磷酸腺苷结合盒转运体A1的结果基本一致。结论成功构建了5个三磷酸腺苷结合盒转运体A1蛋白第2跨膜结构域的缺失突变体,且其表达的蛋白仍然正确定位于HeLa细胞的细胞膜上。突变体(除胞外第6环外)仍然具有一定的抗砷性,提示三磷酸腺苷结合盒转运体A1胞外第6环可能是关键抗砷结构域。; 罗燕程建兵谭晓华尹小菲杨磊; 关键词：三磷酸腺苷结合盒转运体A1 突变体重叠区扩增基因拼接法

细胞穿膜肽融合蛋白PEP1-vMIP-Ⅱ促进血管增生研究被引量：1: 2011年; 目的构建细胞穿膜肽PEP-1与vMIP-Ⅱ融合基因的表达质粒,原核表达、纯化并鉴定PEP1-vMIP-Ⅱ融合蛋白,鉴定该蛋白的穿膜功能,研究其对血管增生相关基因表达的影响。方法将化学合成的细胞穿膜肽PEP1和vMIP-Ⅱ基因克隆到原核表达载体pET15b,构建pET15b-pep-1-vMIP-Ⅱ质粒。表达纯化后,Western-blot鉴定蛋白,荧光共聚焦显微镜观察融合蛋白的穿膜功能。Real time PCR检测该蛋白作用对HMEC-1细胞内血管增生相关基因表达的改变。结果 DNA测序和酶切结果鉴定了pET15b-PEP1-vMIP-Ⅱ载体构建正确,Western blot鉴定纯化的融合蛋白PEP1-vMIP-Ⅱ与所预测相对分子质量相符。激光共聚焦显微镜检测到该蛋白能够进入细胞,在HMEC-1细胞内上调了促血管增生基因VEGFA和VEGFC的表达。结论成功构建了pET15b-PEP1-vMIP-Ⅱ载体,表达纯化的PEP1-vMIP-Ⅱ融合蛋白具有穿透细胞膜的功能,且能显著上调促进血管增生基因VEGFA和VEGFC的表达。; 狄春红罗燕杨磊尹小菲陈佳红谭晓华; 关键词：血管增生基因

vFLIP激活Jurkat细胞表达HIV抑制因子的研究: 2015年; 目的:检测KSHV编码的vFLIP蛋白对Jurkat细胞HIV抑制因子表达的影响。方法:本研究首先构建真核表达载体pIRES2-EGFP-vFLIP,再将其电穿孔至Jurkat细胞,然后使用实时荧光定量PCR技术检测Jurkat细胞中A3G、A3F、CCL5等HIV抑制因子的表达水平,从而探讨vFLIP抗HIV/AIDS的作用及机制。结果:成功构建了真核表达载体pIRES2-EGFP-vFLIP,电转染效率达到40%左右。与对照载体转染组相比,vFLIP转染组内Jurkat细胞中CCL5、A3G、A3F及Mx2基因的表达分别上调了6.71、2.20、1.52及14.47倍。结论:vFLIP蛋白可以激活Jurkat细胞内某些HIV抑制因子的表达,提示其具有一定的抗HIV/AIDS作用。; 尹小菲谭晓华李靖何敏杨磊; 关键词：KSHV JURKAT

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