尹永硕
- 作品数：15 被引量：42H指数：5
- 供职机构：东莞市人民医院更多>>
- 发文基金：广西省自然科学基金广西医疗卫生重点科研课题广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 转录因子E2F-1 mRNA在胃癌中的定量表达及临床意义
- 2008年
- 目的:探讨转录因子E2F-1 mRNA在胃癌组织中的表达及临床意义。方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测E2F-1 mRNA在胃癌组、癌旁组和正常对照组中的表达情况,并联系临床病理特征进行分析。结果:胃癌组中E2F-1 mRNA的阳性表达率为72·4%(42/58),癌旁组为50·0%(29/58),正常对照组为27·9%(12/43),组间比较差异有统计学意义(P<0·05);E2F-1 mRNA在不同的临床分期、病理类型和有无淋巴结转移之间阳性表达率大致接近,差异无统计学意义(P>0·05)。结论:E2F-1 mRNA在胃癌组织中具有较高的表达量,其转录表达量与各类临床病理特征之间没有必然联系,提示E2F-1 mRNA的高表达可能与胃癌的发生有关。
- 唐振勇肖强李雷王长青马玉林尹永硕
- 关键词：E2F-1实时荧光定量PCR胃癌
- 转录因子E2F-1 siRNA表达质粒的构建及对胃癌MGC803细胞的沉默效应被引量：1
- 2008年
- 目的:通过构建人E2F-1基因的小干扰RNA(siRNA)表达质粒,探讨其对胃癌MGC803细胞中E2F-1基因表达的影响。方法:将设计合成的具有短发夹结构的人E2F-1基因siRNA寡核苷酸链退火形成双链,连接入经BamHⅠ和HindⅢ双酶切后的pSilencer4·1-CMVneo表达质粒,并做酶切及测序鉴定。用脂质体把重组质粒转染至细胞,采用实时定量PCR(real-time quantitativePCR)及蛋白印迹(western blotting)技术分别检测E2F-1mRNA及蛋白表达。结果:经酶切及测序鉴定,成功构建了E2F-1 siRNA表达质粒;它可显著抑制MGC803细胞中E2F-1基因mRNA及蛋白表达,与未转染组及阴性对照组细胞比较,分别降低了86·4%、86·1%和81·5%、79·6%。结论:pSilencer4·1-E2F-1重组质粒能抑制人胃癌MGC803细胞E2F-1基因的表达,为进一步E2F-1基因的功能研究及胃癌治疗研究提供了实验基础。
- 尹永硕肖强谢玉波李雷王长青唐振勇马玉林崔建华
- 关键词：胃癌MGC803细胞E2F-1重组表达质粒
- 小分子干扰RNA对胃癌MGC803细胞E2F-1表达及其生物学行为的影响被引量：3
- 2009年
- 目的观察小分子干扰RNA（siRNA）对胃癌MGC803细胞E2F-1基因表达及其生物学行为的影响。方法将实验组（E2F-1-siRNA）和阴性对照组（negative control-siRNA）转染进MGC803细胞，48h后采用实时定量聚合酶链反应（PCR）及Western blot技术分别检测E2F-1mRNA及蛋白的表达，噻唑蓝（M3T）比色法检测MGC803细胞增殖的变化，流式细胞仪检测MGC803细胞周期变化。结果E2F-1-siRNA有效抑制胃癌细胞E2F-1mRNA和蛋白的表达并且影响MGC803细胞的增殖，与阴性对照组及未转染组细胞比较mRNA降低了84．8％和85．3％（F=14．35，P〈0．05），蛋白降低了77．2％和79．6％，MGC803细胞增殖分别抑制了69．0％和81．6％，差异有统计学意义（F=170．18，P〈0．05）；同时E2F-1-siRNA促使更多MGC803细胞DNA含量聚集于G2／M期附近，G2／M期DNA含量比例为（54．98±3．46）％，与阴性对照组（44．70±3．82）％和未转染组（31．47±2．12）％比较，差异有统计学意义（F=88．90，P〈0．05）。结论E2F-1-siRNA可以有效抑制人胃癌MGC803细胞E2F-1 mRNA及蛋白的表达，使G1期细胞的DNA含量下调，细胞分裂停滞在G2／M期附近，抑制胃癌细胞的增殖。
- 尹永硕李雷谢玉波王长青唐振勇马玉林肖强
- 关键词：胃癌小分子干扰RNA细胞周期增殖
- 转录因子E2F-1在胃癌中的表达及临床意义被引量：1
- 2009年
- 目的探讨转录因子E2F-1在胃癌组织中的表达及临床意义。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术和免疫组化检测E2F-1在胃癌组、癌旁组和正常对照组中的表达情况,并联系临床病理特征进行分析。结果胃癌组中E2F-1 mRNA的阳性表达率为72.4%(42/58),癌旁组为50.0%(29/58),正常对照组为27.9%(12/43),组间比较差异有显著性(P<0.05);E2F-1 mRNA在不同的临床分期、病理类型和有无淋巴结转移之间阳性表达率大致接近,差异无显著性(P>0.05)。胃癌组中E2F-1蛋白的阳性表达率为65.5%(38/58),癌旁组为43.1%(25/58),正常对照组为23.3%(10/43),组间比较差异有显著性(P<0.05);E2F-1蛋白在不同的临床分期、病理类型和有无淋巴结转移之间阳性表达率大致接近,差异无显著性(P>0.05)。结论E2F-1 mRNA和E2F-1蛋白均在胃癌组织中具有较高的表达量,其转录表达量与各类临床病理特征之间没有必然联系,提示E2F-1的高表达可能与胃癌的发生有关。
- 刘春斌唐振勇肖强李雷王长青马玉林尹永硕
- 关键词：E2F-1实时荧光定量PCR免疫组化胃肿瘤
- 转录因子E2F-1 siRNA对胃癌MGC803细胞体外侵袭及增殖能力的影响被引量：7
- 2008年
- 背景与目的:转录因子E2F-1作为细胞周期进程中重要的调控因子,与肿瘤的发生有着密切的关系。本研究通过转染人E2F-1基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)表达质粒,探讨其对胃癌MGC803细胞中E2F-1表达及侵袭和增殖能力的影响。方法:用脂质体LipofectamineTM2000将具有短发夹结构的人E2F-1siRNA表达质粒转染至MGC803细胞,以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及蛋白印迹(Western blot)技术分别检测E2F-1mRNA及蛋白的表达;应用体外侵袭实验及克隆实验分别检测E2F-1 siRNA表达质粒对MGC803细胞侵袭力和增殖能力的影响。结果:成功转染E2F-1 siRNA表达质粒48h后,MGC803细胞中E2F-1基因mRNA表达的抑制率超过90%;与未转染组及阴性对照组细胞比较,E2F-1蛋白的表达分别降低81.5%和79.6%。转染pSilencer4.1-E2F-1质粒组的穿膜细胞数(18.0±2.6)与阴性对照组(48.0±4.6)和空白对照组(54.0±5.6)比较差异有统计学意义(P<0.05),其细胞集落形成数(46.0±2.0)与阴性对照组(122.3±1.5)和空白对照组(128.7±2.1)比较差异也有统计学意义(P<0.05)。结论:E2F-1siRNA表达质粒可显著下调E2F-1基因在胃癌MGC803细胞中的表达,在一定程度上抑制胃癌细胞的侵袭和增殖。
- 尹永硕肖强谢玉波李雷王长青马玉林唐振勇
- 关键词：E2F-1MGC803细胞增殖
- 同源盒基因CDX2mRNA在胃癌中的定量表达及临床意义被引量：4
- 2009年
- 目的探讨同源盒基因CDX2mRNA在胃癌组织中的表达及临床意义。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测CDX2mRNA在胃癌组、癌旁组和正常对照组中的表达情况,并联系临床病理特征进行分析。结果胃癌组中CDX2mRNA的阳性表达率为37.9%(22/58),癌旁组为63.8%(37/58),正常对照组不表达,组间比较差异有显著性(P<0.05);CDX2mRNA在不同的临床分期、病理类型和有无淋巴结转移之间阳性表达率差异有显著性(P<0.05)。结论CDX2mRNA在癌旁和胃癌组织中具有较高的表达量,其转录表达量与各类临床病理特征之间有密切的联系,提示CDX2mRNA的高表达可能与胃癌的发生有关。
- 唐振勇肖强李雷王长青马玉林尹永硕
- 关键词：CDX2实时荧光定量PCR胃肿瘤
- RNA干扰对胃癌MGC803细胞E2F-1基因表达及其生物学行为的研究
- 目的：探讨小分子干扰RNA(siRNA)对胃癌MGC803细胞E2F-1基因表达及其生物学行为的影响。
方法：用LipofectamineTM2000把E2F-1-siRNA(实验组)和negative con...
- 尹永硕
- 关键词：胃癌小分子干扰RNA胃癌MGC803细胞重组表达质粒基因表达谱芯片差异表达基因
- 文献传递
- Cdx2对胃癌细胞生物学性状的影响被引量：3
- 2008年
- 目的观察Cdx2对人胃癌细胞MGC-803生物学性状的影响。方法利用脂质体将pCMV—Cdx2-HA和pCMV-HA质粒分别转染MGC-803细胞，应用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）和Western blot技术检测MGC-803细胞中Cdx2基因的表达；应用体外实验及流式细胞仪分别检测Cdx2对MGC-803的侵袭力、黏附力、增殖力、迁移力和凋亡率的影响。结果转染pCMV—Cdx2-HA质粒的MGC-803细胞中可以检测到高Cdx2的表达，其侵袭能力[穿膜细胞数：（64．33±11．94）个／视野下降到（23．93±8．95）个／视野]、黏附能力[（1．172±0．042）]、增殖力[（26．13±1．60）％]和迁移能力[（42．87±2．19）％]较对照组明显降低（P〈0．05），而且凋亡率升高，48h和72h的凋亡率分别为（11．40±0．36）％、（9．72±0．50）％（P〈0．05）。结论Cdx2高表达对MGC-803具有抑制其侵袭转移的作用，并促进肿瘤细胞的凋亡。
- 马玉林肖强谢玉波李雷唐振勇尹永硕
- 关键词：胃癌转染生物素
- 尾型同源盒基因2基因表达对胃癌细胞生长影响的研究被引量：6
- 2008年
- 目的观察尾型同源盒基因2（Cdx2）基因过表达对胃癌细胞生物学性状的影响。方法构建人Cdx2真核表达载体，并转染胃癌细胞MGC-803。实验分为四组：未转染组、转染pCMV-HA组、转染pCMV-GAPDH-HA组、转染pCMV-Cdx2-HA组。应用荧光定量PCR检测各组Cdx2基因的表达情况，Western blot法检测各组Cdx2蛋白的表达情况，MTT法观测细胞增殖，透射电镜观察转染细胞形态学的改变，流式细胞仪分析细胞周期和凋亡。结果成功构建了pCMV-Cdx2-HA真核表达载体，在瞬时转染pCMV-Cdx2-HA质粒48h的MGC-803细胞有较高水平的Cdx2基因mRNA和蛋白的表达；与未转染组、转染pCMV-HA组、转染pCMV-GAPDH-HA组比较，转染pCMV-Cdx2-HA组的胃癌细胞在转染72h时生长受到明显抑制，G0／C1期比例上升，S期比例下降，胃癌细胞的凋亡率也明显升高（P〈0．05）；转染pCMV-Cdx2-HA的胃癌细胞胞核消失，核染色质固缩、解体，内质网、高尔基复合体膨大成泡状。结论Cdx2基因可明显抑制胃癌细胞的生长，提示Cdx2参与了胃癌的生长调控。
- 李雷肖强谢玉波马玉林唐振勇尹永硕
- 关键词：胃肿瘤肿瘤生长
- 应用功能分类基因芯片筛选卵巢癌淋巴结定向高转移细胞系中差异性表达基因被引量：7
- 2008年
- 目的:在裸鼠体内建立以人卵巢浆液性乳头状腺癌细胞系SKOV3具有淋巴结定向高转移亚克隆第二代SKOV3-pm2、第三代SKOV3-pm3细胞系,应用基因芯片技术比较这3种具有不同淋巴结定向转移能力的细胞亚系中基因表达谱的差异,寻找卵巢癌侵袭转移相关基因。方法:采用Trizol一步法抽提SKOV3、SKOV3-pm2、SKOV3-pm33种细胞总RNA;取等量RNA逆转录合成cDNA用Ampolabeling-LPR(linear polymerase re-action,线性聚合酶反应)法标记的cDNA链做探针,混合后与功能分类基因芯片[OligoTumor Metastasis Microarray Catalog No.OHS-028(人)]杂交,计算机分析后比较3种细胞中差异性表达基因,并应用RT-PCR技术对其中3个表达差异明显的基因进行验证。结果:共筛选出表达差异性基因60个,其中表达上调基因47个(ratio>3),有21个基因在SKOV3-pm2、SKOV3-pm3中共同表达上调;表达下调基因13个(ratio<0.5),有1个基因在SKOV3-pm2、SKOV3-pm3细胞中共同表达下调。结论:基因表达芯片检测与肿瘤淋巴体外转移模型相结合,为肿瘤转移研究提供了新方法、新思路。
- 冠潇李力黎丹戎阮和云尹永硕张玮
- 关键词：卵巢肿瘤差异表达基因
