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红外荧光素Alexa Fluor 647标记的2型腺相关病毒保持天然的感染活性被引量：3: 2008年; 近年来红外荧光素的研发及相应的标记技术的进展在生物医学领域的研究中备受关注,通过与尖端仪器的结合在一系列生物样本的检测中得到广泛的应用.然而,红外荧光标记技术在病毒感染生物学研究中的应用却少见报道.本文建立了Alexa Fluor 647(AF647)红外荧光素标记重组2型腺相关病毒(AAV2)的方法,并通过凝胶电泳的银染、红外荧光成像和透射电镜分析等手段,对标记病毒的结构和形态与未标记的病毒进行了细致的比较,同时进一步鉴定了其感染293T细胞后的转导活性.结果发现,AAV2在标记后的理化性质和感染活性均未发生改变.应用狭缝印迹和激光共聚焦显微成像技术,分别对标记病毒的细胞摄取效率和在宿主细胞内的分布进行描述,为红外标记AAV2在研究中的应用提供了范例.AF647标记的AAV2为腺相关病毒的感染动力学研究提供了新的手段,具有敏感度高、抗荧光漂白和低非特异干扰等优点,并且对直接有效地结合形态学分析和生化分子生物学检测,具有重要的应用价值.; 贾书勤张凤兰丁卫; 关键词：腺相关病毒荧光标记 ALEXA FLUOR 红外成像

小肠黏膜下层作为组织工程支架材料的性能研究被引量：6: 2006年; 目的:对小肠黏膜下层(small intestinal submucosa,SIS)的理化性能进行检测,探讨其作为组织工程支架材料的可行性。方法:通过电镜观察、SIS浸提液的pH值测定、皮肤致敏试验、热原试验等方法,对SIS的理化性能进行评价。结果:电镜观察结果显示,SIS具有光滑面和粗糙面两个面,孔隙率可达60%左右;浸提液的pH值接近中性,热原试验及皮肤致敏试验表明SIS无致热性、无抗原性,致敏反应轻微。结论:SIS具有作为组织工程支架材料的良好生物理化性能,是一种较好的生物支架材料。; 张凤兰李华徐力群张陈平; 关键词：小肠黏膜下层理化性能

小肠粘膜下层组织工程支架材料的生物相容性研究被引量：7: 2006年; 目的观察小肠粘膜下层(SIS)的生物相容性和作为组织工程支架材料的可行性。方法参照国际标准ISO10993-1制定的医疗器械生物学评价的相关方法和标准,通过细胞毒性试验、热原试验、溶血试验、致敏试验、肌肉刺激试验等体内外生物学实验相结合的方法评价SIS的生物相容性及免疫原性。结果实验证明小肠粘膜下层细胞相容性良好,不溶血,无致热、致敏反应,肌肉刺激试验的组织学检查见SIS周围无明显炎症及排斥反应,材料部分降解并见大量结缔组织生长。结论SIS具有良好的生物相容性和免疫原性,可作为组织工程的支架材料。; 张凤兰李华徐立群张陈平; 关键词：小肠粘膜下层组织工程支架材料生物相容性 SUBMUCOSA 致敏反应热原试验

小肠黏膜下层作为组织工程支架材料的免疫原性研究被引量：1: 2008年; 目的检测小肠黏膜下层(small intestinal submucosa,SIS)的免疫原性,探讨其作为组织工程支架材料的可行性。方法取SIS材料制备成体积为10mm×4mm×3mm的组织块,埋植于新西兰大白兔背部一侧骶脊肌内,以术前情况作自身对照,以新鲜SIS组作为阳性对照。分别于SIS材料植入前及植入后1、4、8周从兔耳缘静脉取血,用流式细胞仪检测家兔外周血中CD4+T和CD8+T细胞亚群的动态变化。结果流式细胞仪检测结果显示,脱抗原处理后的SIS植入兔体内后,其外周血CD4+T和CD8+T细胞较术前均有不同程度升高,术后一周达最高峰,与术前相比差异有统计学意义(P<0.05)。术后逐渐回落,至第4周时基本恢复正常。而植入新鲜SIS组的兔外周血CD4+T和CD8+T细胞较术前升高明显,与术前及实验组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论SIS植入后T细胞亚群反应初始结果显示SIS有较低的免疫原性,提示其具有作为组织工程支架材料的可行性和可能性。; 李华张凤兰冯永堂; 关键词：小肠黏膜下层免疫原性

腺相关病毒基因治疗载体的改良与应用被引量：9: 2009年; 腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)的非致病特性使得以其为基础的重组病毒载体具有卓越的安全性,成为在基因治疗中最富吸引力的候选载体之一,并且在多种疾病的临床治疗中广泛应用。在过去的十余年中,随着分子病毒学领域对AAV基础研究的进展,研究者不断地为重组腺相关病毒的生产和改良提供新的思路和方案,以改善其对宿主或靶向细胞的感染选择性和转导效率,其中相当部分已逐渐向临床试验阶段过渡。本综述将在介绍AAV基本生物学特征的同时,结合一些实验室研究的成功案例,重点讨论AAV的改良策略、实施方案与应用特点,并对当前以AAV为载体的基因治疗的全球现状及其所面临的挑战与前景进行分析和探讨。; 张凤兰文朝阳丁卫; 关键词：腺相关病毒基因治疗

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张凤兰