张常
- 作品数:11 被引量:30H指数:4
- 供职机构:太原理工大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金山西省青年科技研究基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学化学工程更多>>
- 舞毒蛾几丁质酶基因的真核表达与重组病毒的获得被引量:1
- 2013年
- 几丁质是昆虫外骨骼和围食膜的重要组成部分,鉴于几丁质酶在昆虫生长发育过程中发挥着举足轻重的作用,应用昆虫几丁质酶为探索新的生物防治害虫的方法提供了途径。本文分别根据苜蓿银纹夜蛾Autographa californica核型多角体病毒多角体蛋白基因序列和编码舞毒蛾Lymantria disparⅠ型几丁质酶基因的开放阅读框设计引物,使用聚合酶链反应扩增出以上两个基因,全长分别为783 bp和1 737 bp。构建重组质粒pFastBac-LdCht和pFastBac-AcPH-LdCht,转化大肠杆菌DH10Bac后获得重组穿梭载体,通过脂质体介导转染Sf9细胞产生重组杆状病毒AcMNPV-AcPH--LdCht和AcMNPV-LdCht,分别用于表达蛋白和获得重组病毒。细胞成功表达出有活性的舞毒蛾几丁质酶,并在棉铃虫体内扩增得到重组病毒。研究为深入了解昆虫几丁质酶性质提供依据,并为应用重组病毒奠定基础。
- 范晓军宋志芳仙笑笑任慧张常
- 关键词:舞毒蛾几丁质酶重组杆状病毒
- 金纹细蛾Ⅰ型几丁质酶的分离纯化及酶学性质研究
- 几丁质由N-乙酰氨基葡萄糖残基通过β-1,4糖苷键结合而成的直链多聚物,是昆虫外骨骼、肠道、气管及围食膜等的主要组成成分。昆虫几丁质酶是一种能够将几丁质水解成为寡聚物的内切酶,广泛存在于昆虫的中肠、蜕皮液及某些昆虫的毒腺...
- 仙笑笑宋志芳任慧张常范晓军
- 关键词:金纹细蛾酶学性质
- 几丁质酶的研究进展被引量:13
- 2015年
- 几丁质是自然界中含量仅次于纤维素的第二大类多糖,已从各种细菌、真菌、植物、哺乳动物和昆虫中分离并鉴定出来。随着近年来对几丁质及其衍生物的了解,发现此类多糖的物理化学特性在现实中有非常广泛的应用。几丁质酶是一类分解几丁质的酶,广泛分布于细菌、真菌、植物、哺乳动物、昆虫等物种中,并发挥着重要作用。近年来国内外工作者对这些不同来源的几丁质酶做了深入研究,为其在医学和农业上更广泛的应用提供理论基础。
- 糜艳霞任慧张常刘建红范晓军
- 关键词:几丁质几丁质酶
- Ⅰ型和Ⅱ型几丁质酶在舞毒蛾发育过程中的功能研究
- 几丁质由N-乙酰-D葡萄糖胺通过B-1,4-糖苷键聚合而成的直链多糖,是自然界一种重要的生物聚合物。它广泛存在于真菌、藻类、线虫、甲壳类动物及昆虫体内。在昆虫体内,几丁质是表皮和围食膜的关键组成部分。昆虫几丁质酶是一类由...
- 张常
- 关键词:舞毒蛾几丁质酶基因转录水平RNA干扰
- 文献传递
- 基于基因沉默技术的舞毒蛾几丁质酶基因及dsRNA
- 本发明提供一种昆虫几丁质酶5基因的基因片段及其dsRNA的应用,通过对舞毒蛾几丁质酶5基因的克隆和测序,得到核苷酸序列为SEQ ID NO:1的全长几丁质酶5基因,从中选出序列为SEQ ID NO:2的几丁质酶5基因片段...
- 范晓军张建栋赵秋勇张常刘建红糜艳霞
- 文献传递
- 基于基因沉默技术舞毒蛾几丁质酶10基因及dsRNA
- 本发明提供一种昆虫几丁质酶基因10的基因致死片段及其dsRNA的应用,通过对舞毒蛾几丁质酶10基因的克隆和测序,得到核苷酸序列为SEQIDNO:1的几丁质酶10基因,从中选出序列为SEQIDNO:2的几丁质酶基因片段,用...
- 范晓军赵秋勇刘建红张常糜艳霞
- 文献传递
- 舞毒蛾Ldcht10基因序列的克隆及其功能分析被引量:7
- 2015年
- 【目的】研究舞毒蛾Lymantria dispar几丁质酶基因的时空表达特性及其在蜕皮发育过程中的生物学功能,筛选在舞毒蛾发育过程中致死性的几丁质酶基因,为实现基于RNAi的舞毒蛾有效控制提供重要的基础数据。【方法】设计简并引物克隆舞毒蛾几丁质酶基因Ldcht10关键序列,通过使用实时荧光定量PCR方法检测该基因在舞毒蛾不同龄期与组织中的相对表达量,选取部分序列的双链RNA(ds RNA)研究该基因功能。【结果】本研究克隆了长度为2 057 bp的舞毒蛾几丁质酶基因Ldcht10序列;各组织与不同龄期RT-PCR结果表明Ldcht10的时空表达特性存在明显差异,Ldcht10在各个龄期均表达活跃且在前肠与后肠中的表达水平最高;Ldcht10的RNA干扰试验表明:注射Ldcht10 ds RNA后Ldcht10的表达受到极大抑制,该基因被沉默后24.3%的舞毒蛾幼虫因无法完成蜕皮或化蛹而死亡。【结论】舞毒蛾中几丁质酶基因Ldcht10在各个龄期与组织中的表达存在差异,且在舞毒蛾蜕皮过程中具有十分重要的生物学功能,该基因被沉默后部分舞毒蛾因无法完成蜕皮而导致死亡。
- 刘建红张常赵秋勇范晓军
- 关键词:舞毒蛾几丁质酶实时荧光定量PCRRNA干扰
- 舞毒蛾几丁质酶的研究进展
- 2012年
- 舞毒蛾是一种世界性林业害虫,在我国各省均有分布。舞毒蛾幼虫主要蚕食果树、柳树等树木的树叶,严重危害林业安全。文章介绍了舞毒蛾的危害、几丁质酶的相关知识及舞毒蛾几丁质酶的研究现状,并对应用几丁质酶防治舞毒蛾的前景进行了论述。
- 王绥冬宋志芳张常李瑶范晓军
- 关键词:舞毒蛾几丁质酶生物防治
- 基于基因沉默技术的舞毒蛾几丁质酶基因及dsRNA
- 本发明提供一种昆虫几丁质酶5基因的基因片段及其dsRNA的应用,通过对舞毒蛾几丁质酶5基因的克隆和测序,得到核苷酸序列为SEQIDNO:1的全长几丁质酶5基因,从中选出序列为SEQIDNO:2的几丁质酶5基因片段,用于d...
- 范晓军张建栋赵秋勇张常刘建红糜艳霞
- 文献传递
- 舞毒蛾Ⅰ型几丁质酶基因在昆虫细胞中的表达
- 舞毒蛾是一种世界性农林业害虫,在我国各省均有发现,严重危害农林业安全。几丁质是昆虫体壁、围食膜、气管、脂肪组织的重要结构成分,起到支撑身体和保护昆虫免受外界伤害的重要作用。昆虫几丁质酶是分解代谢昆虫体内几丁质的关键性生物...
- 宋志芳仙笑笑任慧张常范晓军
- 关键词:舞毒蛾生物防治几丁质酶重组杆状病毒