徐阳炎
- 作品数：18 被引量：41H指数：4
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 硫化修饰引物结合Pfu聚合酶PCR体系在窖蛋白CAV-1功能分析中的应用
- 杨慧龄徐阳炎郑兴方唯意何淑雅游咏庹勤慧谢红炬
- PCR技术是现代分子生物学重要研究手段，但常易出现的非特异性条带是妨碍此技术高通量运用的弊端。通过硫化修饰引物结合具有校正活性聚合酶建立的新型PCR体系，能够有效抑制引物3´末端与模板不严格匹配的非特异扩增，在没有降低P...
- 关键词：
- 关键词：荧光定量PCR
- 提高窖蛋白基因扩增特异性的逆转录聚合酶链方法被引量：6
- 2006年
- 目的建立一种可消除逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR)中非特异条带生成,提高逆转录聚合酶链反应精确度的PCR体系。方法最近作者报道了硫化修饰的引物结合具有校正活性聚合酶可提高PCR反应特异性,但其抑制非特异性扩增的效率有待进一步验证和精确测定。用小鼠窖蛋白1(caveolin-1,Cav1)中1对引物,ECV304细胞、HepG2细胞、小鼠肝、主动脉血管组织逆转录cDNA以及含人窖蛋白基因的倍比稀释质粒为模板,比较普通RT-PCR反应与硫化修饰引物结合不同校正活性聚合酶对非特异性扩增的抑制效率。结果引物3′末端硫化修饰结合具有校正活性的聚合酶可特异性关闭PCR反应中引物3′末端与模板非特异结合而引起的非特异性扩增,只允许引物3′末端与模板完全匹配的延伸反应得以进行。与普通PCR反应相比,能有效抑制50μL体系中,50ng约含2×104不匹配模板拷贝数的非特异扩增。结论引物3′端引入抗酶切的硫化修饰后,引物与模板非特异结合将由于校正活性聚合酶长期停留在试图纠正引物与模板不一致状态而得不到有效延伸,提高了PCR反应的特异性。
- 徐阳炎杨慧龄游咏覃丽涂剑
- 关键词：聚合酶链反应
- 5，4’-二-正辛烷氧基-7-二氟亚甲基异黄酮对人肺腺癌细胞及其裸鼠异种移植瘤生长的影响
- 2005年
- 摘要目的研究金雀异黄素(genistein)衍生物5，4'-二-正辛烷氧基-7-二氟亚甲基异黄酮(5，4’-Di-n-octoxyl-7-gem-difluoromethylenegenistein，DOdFMG)对人肺癌细胞系(A549)细胞生长的影响及其作用机制。方法MTT比色法测定5，4'-二-正辛烷氧基-7-二氟亚甲基异黄酮对A549和人胚肺二倍体成纤维细胞(KMB—17)增殖的影响；细胞记数法观察DOdFMG对A549细胞生长曲线的抑制作用；P1染色流式细胞术(FCM)分析DOdFMG对A549细胞凋亡和细胞周期的影响；人肺腺癌(A549)细胞裸鼠异种移植瘤模型治疗实验检测DOdFMG体内抗肺癌作用。结果MTT比色法测定结果显示，DOdFMG对A549细胞增殖有显著抑制作用，呈浓度依赖关系，半数抑制浓度(IC50值)是10．26μmol／L，对KMB-17细胞增殖抑制作用弱，IC50值为163．2μml/L，其对人肺腺癌细胞毒选择指数为15．91。细胞记数法测定结果表明，5，4'-二-正辛烷氧基-7-二氟亚甲基异黄酮对A549细胞生长具有抑制作用，在10．0／μmol/L浓度下，A549细胞群体倍增时间延长到52．7h(溶媒对照组倍增时间为31、4h)。PI染色FCM分析发现，5，4'-二-正辛烷氧基-7-二氟亚甲基异黄酮明显使A549细胞周期停滞于G1期(G1期细胞百分数由52．5％上升到74．7％，P<0．05)。裸鼠异种移植瘤治疗实验结果显示，5，4'-二-正辛烷氧基-7-二氟亚甲基异黄酮对人肺癌异种移植瘤生长具有显著抑制作用，其作用效价强度弱于羟基喜树碱(HCPT)，强于其母体化合物金雀异黄素。结论5，4'-二-正辛烷氧基-7-二氟亚甲基异黄酮具有体内外抗肺腺癌作用，其机制可能与细胞周期G1期阻滞有关。
- 彭波徐阳炎曹建国周虹李辉孙丽周建国董琳
- 关键词：裸鼠人胚肺二倍体成纤维细胞A549细胞增殖人肺癌细胞系细胞生长曲线半数抑制浓度
- 栗柄金粉蕨粗提物对家兔急性敌百虫中毒的解救作用被引量：4
- 2002年
- 目的 研究栗柄金粉蕨粗提物 (LM)对敌百虫中毒的解救作用。方法 用敌百虫灌胃家兔造成中毒模型 (共 2 0只 ) ,随机分为 4组 ,每组 5只 ,A组应用生理盐水 ,B组应用LM ,C组应用PAM -I,D组应用LM +PAM -I,上述 4组均耳缘静脉静注给药。观察兔死亡时间 (至用药后 2 6h)。结果 用药2 6h内 ,A组 5只全部死亡 ,B组存活 1只 ,C组、D组各存活 3只 ,C、D两组存活家兔发生反跳及反跳持续时间分别为 1h、2h及 3～ 6h、1～ 2h。结论 栗柄金粉蕨乙醇粗提物可明显解除肌颤 ,改善呼吸 ;与碘解磷定合用可大幅度减少反跳现象的发生并减轻其程度。
- 徐阳炎郑兴朱炳阳黄红林
- 关键词：碘解磷定动物模型
- 卡托普利对四氯化碳肝硬化大鼠治疗作用实验研究被引量：1
- 2002年
- 为探讨卡托普利对肝硬化的治疗作用，构建四氯化碳肝硬化大鼠模型（wistar雄性大鼠70只），构模成功38只，随机分为对照组，高、中、低剂量卡托普利治疗组（分别为10、10、9、9只），结果发现卡托普利对CCl4肝硬化大鼠体重增加有抑制作用，且能减轻肝脾湿重，但对其病理形态无明显影响，结果还显示卡托普利能消除CCl4肝硬化腹水，降低门脉压力，且成明显剂是依赖性（P＜0．01或P＜0．05）。卡托普利对CCl4肝硬化的血清生化、肝脏生化均有一定的作用。结果：卡托普利对CCl4肝硬化大鼠有一定的治疗作用，但尚须进一步探讨其作用机制和作用途径。
- 刘志文徐阳炎等
- 关键词：卡托普利四氯化碳肝硬化
- 8-硝基白杨素的合成及其抗肿瘤作用被引量：18
- 2004年
- 目的 探讨 8-硝基白杨素的抗肿瘤活性。方法 荷Lewis肺癌雄性小鼠 5 0只 ,随机分为5组 (NS对照组 ,环磷酰胺组 ,低、中、高剂量 8-硝基白杨素组 ) ,每组 1 0只 ,均采用腹腔注射给药。末次给药 2 4h后 ,颈椎脱位处死小鼠 ,观察各组瘤重减轻情况及转移结节数。结果 低、中、高剂量 8-硝基白杨素均能明显抑制肿瘤的生长和肿瘤转移结节的数 (阳性药对照组和各处理组与对照组相比 ,P均<0 .0 1 ) ,高剂量 ( 5 0mg kg) 8-硝基白杨素与 1 0 0mg kg的环磷酰胺的抗肿瘤作用相当 (P >0 .0 5 )。结论 8-硝基白杨素作为一种新黄酮衍生物 ,具有良好的抗肿瘤作用。
- 徐阳炎郑兴朱炳阳曹建国
- 关键词：8-硝基白杨素LEWIS肺癌
- 免疫调节介导特异乳酸杆菌抑制人结肠癌裸鼠异种移植瘤生长被引量：2
- 2006年
- 目的研究特异乳酸杆菌（laetobacilus fermentum，Lb-f）对人结肠癌裸鼠异种移植瘤生长抑制作用及抗肿瘤机制。方法用人结肠癌细胞裸鼠异种移植瘸模型治疗实验，观察Lb—f抗人结肠癌作用；碳粒廓清法、足跖厚度增加法和小鼠抗绵羊红细胞凝集素抗体滴度测定，观察Lb-f对昆明种小鼠细胞免疫及体液免疫功能的调节作用。结果Lb-f（180、360、720mg/kg）对人结肠癌裸鼠皮下移植瘸的生长抑制率分别为63％，79％，83％，瘸重抑制率分别为44％，49％和71％；Lb—f（180、360、720mg/kg）分别作用昆明种小鼠，校正碳粒廓清指数α值分别为：2．3928±0．3941，3．4092±0．1711，4．5036±0．215VSl．9350±0．8839．P〈0．05；足跖肿差分别为：1．01±0．07innl，1．37±0．09mm，2．01±0．14mm和0．45±0．05mm，P〈0．001；小鼠抗绵羊红细胞抗体滴度增加，分别为：336±176，544±154，832±309VS100±43。P〈0．01。结论Lb-f对人结肠癌（HT—29）细胞裸鼠异种移植瘤生长抑制作用与提高机体免疫功能相关。
- 唐三元徐阳炎曹建国刘华清李辉孙丽
- 关键词：结肠肿瘤免疫调节
- 金粉蕨素抑制人胃腺癌细胞增殖作用被引量：5
- 2002年
- 目的：观察金粉蕨素（Onychin）对人胃腺癌MGC－803细胞增殖及克隆形成能力的抑制作用。方法：采用MTT比色分析法测定MGC－803细胞增殖。应用琼脂扩散盒法和平皿琼脂培养克隆形成法检测MGC－803细胞体内外克隆形成能力。结果：金粉蕨素（1．25－20．00μg/ml)对MGC－803细胞增殖有明显抑制作用，IC50值是3．24μg/ml；2．50－20．00μg/ml的金粉蕨素具有显著抑制MGC－803细胞体外克隆形成能力作用，IC50值为4．98μg/ml；2．50－20．00mg/kg的金粉蕨素对MGC－803细胞体内克隆形成能力具抑制作用，呈浓度相关性（P＜0．01）。结论：金粉蕨素对MGC－803细胞增殖及克隆形成能力具有抑制作用。
- 周建国徐阳炎等
- 关键词：金粉蕨素胃腺癌细胞增殖MTT比色法
- 7-二氟亚甲基-5-取代烷氧基黄酮类化合物的合成及其对人胃癌细胞增殖的抑制作用被引量：3
- 2006年
- 目的设计和合成系列7-二氟亚甲基-5-取代烷氧基黄酮类化合物，观察其对人胃癌细胞增殖抑制作用。方法以白杨素（chrysin，5，7-二羟基黄酮，CbR）为先导化合物，先选择性地用二氟亚甲基取代ChR的7-羟基，合成化合物chR-1，再将一系列烷氧基取代chR-1的5-羟基，依次合成化合物ChR-2…chR-10。采用MTT比色法测定白杨素及白杨素衍生物对人胃癌SGC-7901细胞增殖抑制作用。结果合成10种7-二氟亚甲基-5-取代烷氧基黄酮类化合物，并分别进行波谱鉴定，其结构与设计相符；白杨素及白杨素衍生物对人胃癌细胞株SGC-7901具有不同程度的增殖抑制作用，其中ChR的IC50值为5．83μmoL，在ChR的C-7住引入二氟亚甲基合成的ChR-1的IC50值为3．98μmoL，表明其抑制人胃癌细胞增殖作用增强；进一步在ChR-1的C-5位引入烯丙氧基合成的ChR-10的IC50值为2．18μmoL，其IC50值为所有合成的7-二氟亚甲基-5-取代烷氧基黄酮类化合物中最低，表明其抑制SGC-7901细胞增殖作用最强。结论二氟亚甲基的C-7位取代获得白杨素衍生物的抑制人胃癌细胞增殖活性增强；在此基础上烯丙氧基的C-5住取代获得的7-二氟亚甲基-5-烯丙基白杨素具有更强的抑制人胃癌细胞增殖活性。
- 康颖郑兴徐阳炎曹建国董琳周建国
- 关键词：胃肿瘤白杨素增殖抑制
- 一种可消除非特异性条带的PCR方法
- 本发明公开了一种可消除非特异性条带、一步法精确获得目的基因的PCR方法。具体是指：在PCR(RT-PCR、PCR)目的基因的引物设计时，引物3’末端一个或多个碱基采用硫代磷酸化修饰；延伸反应所用的聚合酶为具有Pfu高保真...
- 杨惠龄廖端芳徐阳炎罗迪贤李凯
- 文献传递
