杨光
- 作品数：7 被引量：47H指数：3
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院肿瘤研究所更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区科学研究与技术开发计划广西医学科学实验中心开放基金国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 卵巢癌自身抗体谱研究及应用被引量：1
- 2007年
- 目的肿瘤自身抗原可以诱导机体免疫反应,产生与肿瘤相关的自身抗体。因此,在肿瘤患者血清中存在肿瘤自身抗体谱。本研究拟寻找鉴定卵巢癌自身抗体谱,研究这些自身抗体作为卵巢癌诊断候选血清标志物的可能性;同时鉴定这些自身抗体的抗原,为卵巢癌的免疫治疗提供候选靶抗原。方法用卵巢癌组织建立了库容量达1.82×106pfu的cDNA表达文库,用卵巢癌患者血清进行了文库血清学分析(SEREX),筛选获了阳性抗原克隆,进一步分析了其中5个克隆与48例卵巢癌48例正常人血清的反应情况。结果获得的67个阳性克隆中,5个克隆与已知EST序列明显无同源性,另外49个克隆与已知基因高度同源。BHLHB2等5个抗原克隆与卵巢癌患者和正常人血清反应阳性率分别为41.6%(14.6%)、29.2%(6.25%)、29.2%(12.5%)、31%(18.7%)、31%(6.2%)。联合5个克隆诊断卵巢癌的敏感性为81%,特异性75%。结论本研究发现的45个卵巢癌抗原可能作为卵巢癌诊断新的候选血清学标志物和免疫治疗潜在分子靶点。BHLHB2等5个克隆与卵巢癌患者血清的反应阳性率明显高于正常人的血清,5个克隆联合诊断卵巢癌有较好的敏感性和特异性,其相关自身抗体可作为卵巢癌诊断的血清标志物。
- 冉宇靓胡海杨光遇珑孙立新杨治华
- 关键词：卵巢癌肿瘤抗原自身抗体CDNA表达文库血清标志物
- 卵巢癌相关抗原cDNA表达文库的筛选被引量：1
- 2008年
- 目的:从卵巢癌腹腔积液肿瘤细胞cDNA表达文库中筛选卵巢癌相关抗原。方法:采用SEREX方法从卵巢癌腹腔积液肿瘤细胞构建的cDNA表达文库中筛选阳性克隆。血清学筛选出的阳性克隆与SSH所得的差异表达基因探针进行杂交,最终得到特异性较高的阳性克隆。对这些克隆进行酶切鉴定、测序分析。结果:经二轮血清学筛选和DotBlot杂交,最终得到55个在血清中有相应IgG和(或)IgM自身抗体的卵巢癌差异表达的候选肿瘤抗原克隆。经核苷酸测序、序列分析和相似性比对,结果表明这55个EST片段代表45个基因,可分为6类:①3个与已知卵巢癌相关基因相似的基因,如BARD1等;②15个与其它肿瘤相关基因相似的基因,如TM4SF1等;③6个在一些特殊组织中表达的基因,如FXR1(fragileX-relatedgene1,脆性X染色体相关基因1)等;④8个与一些特殊功能蛋白基因相似的基因,如TIZ;⑤5个与胚胎来源的基因相似的基因,如PKHD1等;⑥8个在GenBank中无相似序列的新基因,如OV-189等。结论:SEREX方法与SSH方法相结合筛选肿瘤抗原的技术路线是一种行之有效的、能筛选具有较高特异性肿瘤抗原的策略。本研究为进一步研究这些抗原在卵巢癌的发生、发展及诊断方面的应用奠定了基础。
- 阳志军杨光蒋燕明冉宇靓杨治华张玮李力
- 关键词：卵巢癌相关抗原CDNA表达文库SEREXSSH
- 卵巢上皮性癌相关抗原cDNA表达文库的构建
- 2008年
- 目的:构建人卵巢上皮性癌cDNA表达文库。方法:提取卵巢上皮性癌患者腹腔积液肿瘤细胞mRNA,反转录合成双链cDNA,末端补平后连接EcoRI接头,末端磷酸化,XhoI消化,将双末端黏性化的双链cDNA经过凝胶层析柱,收集大于500bp的cDNA片段,加工后与Uni-ZAP XR Vector连接,经过体外包装,感染宿主菌XL1-blueMRF′,构建cDNA文库,检测文库容量和质量。结果:cDNA表达文库原始库容为1.82×106,扩增后文库的库容为7.5×109,重组效率约为90%,插入片段大小主要集中在1.0～2.0kb。结论:成功构建了一个卵巢上皮性癌cDNA表达文库,为下一步筛选、鉴定卵巢上皮性癌相关抗原奠定了基础。
- 阳志军杨光蒋燕明冉宇靓杨治华张玮李力
- 关键词：卵巢上皮性癌相关抗原CDNA表达文库
- 卵巢上皮性癌相关抗原的筛选和血清学检测被引量：19
- 2007年
- 目的构建卵巢上皮性癌(卵巢癌)腹水肿瘤细胞的 cDNA 文库,从中筛选能用于卵巢癌早期诊断和免疫治疗靶点的卵巢癌相关抗原。方法用3例卵巢浆液性囊腺癌、1例卵巢黏液性囊腺癌、1例卵巢子宫内膜样癌患者的腹水肿瘤细胞构建 cDNA 文库,采用改良的重组克隆表达抗原的血清学鉴定(SEREX)技术与抑制性消减杂交(SSH)方法相结合的策略从文库中筛选卵巢癌相关抗原基因,并对其进行酶切鉴定、核苷酸测序分析。采用重组肿瘤抗原的微型血清学检测(SMARTA)法检测筛选出的卵巢癌相关抗原与96例卵巢癌患者和96例正常妇女的血清中相应自身抗体的阳性反应情况。结果经两轮血清学筛选和核苷酸测序分析,最终得到55个候选的卵巢癌相关抗原基因片段,代表45个基因,分为6类:(1)与已知的卵巢癌相关基因同源的基因,如 BARD1基因等;(2)与其他肿瘤相关基因同源的基因,如 TM4SF1基因等;(3)在一些特殊组织中表达的基因,如 ILF3、FXR1基因等;(4)与一些特殊功能蛋白基因同源的基因,如 TIZ、C1D 基因等;(5)与胚胎来源的基因同源的基因,如 PKHD1基因等;(6)其余为在基因库 GenBank 中无同源序列可比对的未知基因,如 OV-189基因等。TMdSF1、C1D、BARD1、FXR1、OV-189基因的噬菌体重组融合抗原与卵巢癌患者血清中相应IgG 型自身抗体反应的阳性率分别为28%、21%、23%、25%、31%,与正常妇女血清反应的阳性率分别为9%、6%、5%、8%、13%,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.01);TIZ、FXR1、OV-189基因的重组抗原与卵巢癌患者血清中相应 IgM 型自身抗体反应的阳性率分别为26%、28%、18%,与正常妇女血清反应的阳性率分别为8%、11%、7%,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。FXR1、OV-189基因的重组抗原与Ⅰ～Ⅱ期卵巢癌患者血清中相应 IgG 型自身抗体反应的阳性率(分别为34%、46%)高于Ⅲ～Ⅳ期者(分别为16%、23%),两者�
- 阳志军杨光蒋燕明冉宇靓杨治华张玮张洁清潘忠勉李力
- 关键词：CA-125抗原双杂交系统技术基因文库血清学试验
- 抗人P185^(erbB_2)单克隆抗体的制备及特性分析被引量：2
- 2000年
- 目的制备可特异识别 P185 erb B2 胞外区的单抗 ,选出亲和力较高并具有抑瘤作用的克隆。方法以高表达 erb B2 的人乳腺癌细胞系 SKBR3免疫 BABL / c小鼠 ,用纯化的重组 DNA表达的 P185胞外区蛋白作为抗原 ,以间接 EL ISA方法筛选阳性克隆。结果获得 10株稳定分泌抗 P185胞外区单抗的杂交瘤细胞株。 4株为 Ig G1、1株为 Ig G3、5株为 Ig M,分别可识别 P185胞外区 3个不同表位 ,且只与天然形式的 P185胞外区特异结合。其中 4株 Ig G1类抗体可明显抑制 SKBR3及 SKOV3细胞增殖。免疫组化实验可使 SKBR3及 SKOV3细胞膜特异性染色 ,且可检出乳腺癌、卵巢癌等石蜡切片标本中 erb B2 高表达的阳性细胞。结论所获单抗可特异识别 P185胞外区抗原 ,具有肿瘤诊断、判断预后及人源化改造后用于治疗的应用潜力。
- 杨光杨治华孙立新刘军陈凤
- 关键词：ERBB2P185单克隆抗体
- 血清中肿瘤相关抗原自身抗体谱与CA125联合检测在卵巢恶性肿瘤诊断及病情监测中的价值被引量：10
- 2011年
- 目的评价血清中肿瘤相关抗原自身抗体谱与CA125联合检测在卵巢恶性肿瘤诊断及病情监测中的价值。方法选择2003年8月23日至2006年3月28日间广西医科大学附属肿瘤医院收治的卵巢恶性肿瘤患者126例（均为治疗前）、卵巢良性肿瘤患者42例，以及2003年至2006年在本院进行健康体检证实无肿瘤及免疫性和炎症性疾病的健康妇女142例，用间接ELISA法检测其血清中肿瘤相关抗原（即TM4SF1、C1D、TIZ、OV-142、FXR1、OV-189）的IgG、IgM型自身抗体，用二分类logistic回归法分析由上述自身抗体组成的自身抗体谱与CA。联合检测在卵巢恶性肿瘤诊断中的价值。另选择同期收治的24例卵巢恶性肿瘤患者，检测其治疗前、后肿瘤相关抗原自身抗体谱的变化，验证并分析自身抗体谱在卵巢恶性肿瘤病情监测中的价值。结果卵巢恶性肿瘤患者（126例）血清中肿瘤相关抗原IgG型自身抗体的阳性率为34．1％～47．6％，非卵巢恶性肿瘤患者（184例，包括卵巢良性肿瘤患者42例和健康妇女142例）为13．0％～19．0％，两者比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；卵巢恶性肿瘤患者血清中肿瘤相关抗原IgM型自身抗体的阳性率为39．7％～53．2％，非卵巢恶性肿瘤患者为12．0％～33．2％，两者比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。FXR1抗原IgG型自身抗体及TIZ、FXR1、OV-189抗原IgM型自身抗体在早期（Ⅰ～Ⅱ期）卵巢恶性肿瘤患者血清中的阳性率（分别为55．3％、63．8％、61．7％、66．0％）明显高于晚期（Ⅲ～Ⅳ期）患者（分别为34．2％、39．2％、26．6％、45．6％），差异有统计学意义（P〈0．05）。由TM4SF1、C1D、FXR1抗原IgG型自身抗体及TM4SF1、TIZ抗原IgM型自身抗体组成的自身抗体谱，该抗体谱检测的敏感度为75．4％、特异度为78．3％、准确率为77．1％，与CA125单独检测（分别为61．1％、88．
- 阳志军杨光蒋燕明冉宇靓杨治华张玮张洁清潘忠勉李力
- 关键词：自身抗体CA-125抗原
