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林万明: 作品数：46 被引量：106H指数：5; 供职机构：空军总医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>

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细菌ＤＮＡ探针诊断技术的进展: 林万明; 关键词：细菌脱氧核糖核酸分子杂交免疫诊断信使核糖核酸

酶谱法分型检测人疱疹病毒DNA方法的建立及应用: 1995年; 单纯疱疹病毒Ⅰ型、Ⅱ型(HSV-Ⅰ,HSV—Ⅱ)、Epstein-Barr病毒(EBV)和人巨细胞病毒(CMV)是引起中枢神经系统、生殖道感染及肿瘤等多种疾病的共同病原体。以往的实验室诊断方法,包括已建立的各种疱疹病毒的聚合酶链反应法(PCR)技术,一般只能检测一种病毒,易造成漏诊。笔者在上述4种病毒的高度同源序列DNA聚合酶基因中设计一对引物,能对4种病毒DNA进行扩增,继而用凝胶电泳和限制性内切酶BamHI或SmaⅠ酶切分析扩增产物进行鉴别,建立了能一次性分型检测上述4种病毒的PCR——酶谱法。敏感性和特异性试验表明,灵敏度可测到1 fg DNA,相当于6个病毒颗粒,且引物仅对4种疱疹病毒扩增,与临床常见的其它病原体无交叉反应。对影响PCR效果的因素如Mg^(2+)浓度、引物浓度及循环参数等进行了优化选择。用此法检测10例疱疹病毒性脑炎患者脑脊液和18例慢性宫颈炎患者宫颈分泌物中的疱疹病毒,结果分别有8例和15例出现DNA扩增区带,并经电泳和酶切能区分各型,本方法的建立为疱疹毒感染的临床早期诊断、药物疗效考核和流行病学研究提供了有效的手段。; 蔡庆林万明刘红巾陈友纯向培德姜建东; 关键词：疱疹病毒聚合酶链反应法诊断学; 全文增补中

毛细管PCR技术在传染病快速诊断上的初步应用被引量：4: 1997年; 常规ＰＣＲ反应需要２～６小时，而在毛细管ＰＣＲ反应中，由于采用毛细管作为反应容器，因此能在１５分钟完成３０个循环。对国产毛细管ＰＣＲ仪进行优化的结果表明：循环参数为９４℃０秒（即＜１秒），５０℃～５５℃０秒，７２℃２０秒，ＰＣＲ反应达到最佳。敏感性实验表明：常规ＰＣＲ可检测１．０ｆｇＨＢＶＤＮＡ，毛细管ＰＣＲ可检测０．１ｆｇＨＢＶＤＮＡ。用１１种引物从多种标本中成功地扩增了９种病原微生物相应基因片段。建立了ＫＩ－玻璃粉法快速制备ＰＣＲ模板的方法，几乎适合所有类型的临床标本。将毛细管ＰＣＲ用于检测血清中ＨＢＶＤＮＡ，结合快速热处理法制备ＰＣＲ模板，可在１．５小时内对２０例标本报告结果。毛细管ＰＣＲ技术的建立，为传染病的基因诊断向快速化发展开辟了新的途径。; 李建标谭津杨瑞馥李银太郭兆彪赖进祥林万明; 关键词：PCR 传染病

用聚合酶链反应检测咽拭子和痰液中的肺炎支原体被引量：1: 1996年; 采用聚合酶链反应（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）扩增肺炎支原体（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ，Ｍｐ）特异的１４４ｂｐＤＮＡ片段，并将ＰＣＲ扩增与常规培养或血清冷凝集素测定相比较。结果表明，该法的阳性率明显高于常规培养或冷凝集素测定。２５例患者标本常规培养阳性６例（２４．０％），ＰＣＲ扩增阳性１１例（４４．０％），５０例患儿咽拭子ＰＣＲ扩增阳性１５例（３０．０％），其中２７例同时进行了ＰＣＲ和血清冷凝集素测定，阳性率分别为４０．７％（１１／２７）和２５．９％（７／２７）。ＰＣＲ扩增阳性病例改用红霉素或四环素治疗均获显著疗效。本法具有快速、特异、灵敏度高等优点，可望成为早期诊断Ｍｐ感染的常规方法。; 黄庆华林万明蔡庆安冰; 关键词：聚合酶链反应凝集素支原体属枝原体属

PCR快速检测临床标本中肺支原体的应用研究: 1994年; 肺炎支原体（ＭＰ）是引起呼吸道严重感染和造成地方性流行的常见传染病。该菌临床培养时间长，易受污染。我们用自行合成的引物，建立了ＰＣＲ直接检测临床标本中ＭＰ的方法，通过标本前处理，６８例病人标本ＰＣＲ直接检测的阳性率可达到３８．２％，并可在半天内报告结果，为人类原发性非典型肺炎的临床快速诊断提供了简便快速和特异敏感的检测手段，具有重要的临床应用价值。; 林万明黄庆华; 关键词：肺炎支原体聚合酶链反应

通用引物聚合酶链反应一次检测4种疱疹病毒DNA被引量：3: 1995年; 为了能一次性分型检测４种疱疹病毒ＤＮＡ，防止漏诊，故采用在疱疹病毒高度同源序列ＤＮＡ聚合酶基因中设计一对通用引物的方法，对４种疱疹病毒（单纯疱疹病毒Ⅰ型、Ⅱ型、爱泼斯坦巴尔病毒、人巨细胞病毒）ＤＮＡ进行扩增，继而用凝胶电泳和限制性内切酶ＢａｍＨＩ或ＳｍａＩ酶切扩增产物进行鉴别，建立了能一次性分型检测上述４种病毒的聚合酶链反应（ＰＣＲ）法。敏感性和特异性试验表明，灵敏度可测到１ｆｇＤＮＡ，相当于６个病毒颗粒，且引物仅对４种疱疹病毒扩增。用建立的ＰＣＲ法和酶切分型法检测病毒性脑炎患者脑脊液和慢性宫颈炎患者宫颈分泌物中的疱疹病毒，取得较好结果。该法的建立为疱疹病毒感染的临床早期准确诊断、判定药物疗效和流行病学研究等提供了有效的手段。; 蔡庆陈友纯刘红巾向培德姜建东林万明; 关键词：人疱疹病毒聚合酶链反应 DNA 引物; 全文增补中

热变性温度法测定细菌DNA中G+C的含量被引量：2: 1982年; 近年来,随着分子生物学的不断发展,为细菌分类鉴定开辟了许多新途径,提供了许多新技术,如细菌脱氧核糖核酸(DNA)碱基成份分析、核酸分子杂交等。测定细菌DNA中鸟嘌呤(G)和胞嘧啶(C)的克分子百分数(Mol%)的方法,在细菌分类鉴定中是一种新方法。; 林万明郭兆彪高树德; 关键词：细菌 TM DNA G+C

DNA探针检测痢疾杆菌和侵袭性大肠杆菌的研究——17kb和2.5kb探针及其与Sereny试验的比较: 1990年; 用^(32)P标记17kb和2.5kb两个侵袭基因小片段作探针、分别与168株痢疾杆菌、60株侵袭性大肠杆菌及300株沙门氏菌属等作菌落杂交。结果表明:两个探针均只与携带120—140Md侵袭性大质粒的菌株杂交,而未见与其它对照株产生非特异阳性,但17kb探针能与Is_1序列产生可见的杂交背景。Sereny试验表明,探针杂交阳性的菌株,并非都能引起豚鼠眼结膜炎;而Sereny试验阳性者,经传代保存也可转变为阴性。; 李银太林万明王津郭兆彪杨瑞馥; 关键词：痢疾杆菌 DNA探针

病原菌基因诊断技术的最新研究进展: 1992年; 为了解致病微生物基因探针检测技术的最新研究进展,我们把第6届微生物与免疫学快速和自动化检测方法国际学术会议中有关内容介绍如下。1 液相杂交法检测血清中的HBV DNA直接分析血清中HBV 基因是一种敏感可靠的方法,测量HBV DNA 水平在监测抗病毒治疗和临床评价慢性病毒携带者中很有价值。由此设计了一种快速检测血清中HBV DNA 的方法,先做液相杂交。; 林万明宋欣明徐健雄袁宝民; 关键词：病原菌基因诊断

人白血病抑制因子基因cDNA的克隆及分析被引量：2: 1993年; 白血病抑制因子(leukemia inhibitoryfactor,LIF)是80年代初发现的一种新的细胞因子。它能不可逆地抑制白血病细胞增殖、并诱导其分化,同时它还能在没有明显毒副作用的情况下在体内或体外直接刺激巨核血小板系统生成,增加外周血血小板数量。; 涂强王永俊李文谢宝树朱元晓阎玉河余竟源兰兰林万明; 关键词：白血病基因克隆

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