樊军
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
- 供职机构：中国人民解放军总医院第一附属医院更多>>
- 发文基金：首都医学发展科研基金国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 严重烧伤患者血清对人脐带MSCs生物学特性的影响被引量：5
- 2013年
- 目的通过观察严重烧伤患者血清对体外培养的人脐带MSCs(human umbilical cord MSCs,hUCMSCs)生物学行为的影响,探讨hUCMSCs移植治疗严重烧伤的可行性。方法取足月剖腹产手术的健康胎儿脐带组织分离培养hUCMSCs,将第3代hUCMSCs用于实验。根据培养血清不同将实验分为3组,分别为10%FBS组(A组)、10%正常血清组(B组)和10%烧伤血清组(C组)。于培养24 h、72 h和6 d,采用倒置显微镜观察各组细胞形态及融合情况,MTT法测定细胞增殖;培养后第6天采用碘化丙啶染色、流式细胞仪检测细胞周期,吖啶橙/溴化乙锭染色法检测细胞凋亡,β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,β-gal)染色检测细胞衰老,ELISA法测定B、C组血清中TNF-α、IL-1、PDGF及IGF-1含量。结果各时间点各组细胞形态均呈长梭形,部分呈多角形;但C组细胞融合速度显著快于A、B组。细胞增殖曲线显示,培养2～6 d,C组增殖细胞数高于A、B组,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪检测示,培养6 d A、B、C组hUCMSCs增殖期(S期)比例分别为9.21%±1.02%、11.79%±1.87%和20.54%±2.03%,C组显著高于A、B组(P<0.05)。各时间点各组细胞形态和结构正常,未见细胞核着橘红色荧光的凋亡细胞或死亡细胞。培养6 d A、B、C组β-gal染色阳性细胞百分率分别为4.8%±0.2%、3.8%±0.4%和2.6%±0.1%,C组显著低于A、B组(P<0.05)。ELISA法检测C组血清中TNF-α、IL-1、PDGF及IGF-1含量显著高于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论严重烧伤患者血清中含有较高水平的TNF-α、IL-1、PDGF和IGF-1等细胞因子,可显著刺激hUCMSCs快速增殖,不引起细胞凋亡,能减少细胞衰老,将hUCMSCs移植治疗严重烧伤可行。
- 刘玲英柴家科侯玉森段红杰郁永辉尹会男胡泉樊军杜俊东
- 关键词：细胞衰老细胞治疗
- 烧伤对小鼠棕色脂肪组织影响的实验研究
- 2014年
- 目的探讨烧伤对小鼠棕色脂肪组织（brown adipose tissue，BAT）的影响。 方法取3～4月龄雄性BALB/c小鼠40只，体重（20 ± 3）g，随机分为实验组和对照组（n=20）。实验组小鼠将背部置于90℃热水9 s制备30%总体表面积Ⅲ度烫伤模型，对照组小鼠背部置于37℃热水中9 s，作为对照。造模前后检测小鼠空腹体重、体温；造模后7 d取BAT及白色脂肪组织（white adipose tissue，WAT）称重并行大体、组织学及透射电镜观察，实时定量PCR及免疫组织化学染色检测脂肪组织解偶联蛋白1（uncoupling protein 1，UCP-1） 基因及蛋白表达水平。 结果造模前两组小鼠空腹体重、体温比较，差异均无统计学意义（P 〉 0.05）；造模后1、2、3、4周实验组小鼠空腹体重显著低于对照组（P 〈 0.05），1、2、3、7 d实验组体温显著高于对照组（P 〈 0.05）。造模后7 d，与对照组相比，实验组WAT重量明显降低、BAT重量增加（P 〈 0.05），WAT及BAT细胞均变小，细胞数增多，细胞质及线粒体较紧密；实验组BAT及WAT中UCP-1基因相对表达量及蛋白表达均显著高于对照组（P 〈 0.05）。 结论小鼠烧伤后BAT参与了机体的高代谢反应。
- 庄淑波柴家科郁永辉尹回男刘玲英樊军王一贺侯玉森
- 关键词：烧伤高代谢反应棕色脂肪组织小鼠
- 烧伤血清对3T3-L1前脂肪细胞增殖活性和成脂分化能力的影响
- 2014年
- 目的通过观察大鼠烧伤血清对3T3-L1前脂肪细胞增殖活性和成脂分化能力的影响,探索烧伤对脂肪代谢的影响。方法选择成年雄性SD大鼠48只,随机分为假伤组及烧伤1、4、7、14、21 d组,每组8只。各烧伤组大鼠背部制备30%总体表面积的Ⅲ度烫伤模型,分别于对应时间点收集血清;假伤组不作处理,取血清作为正常对照。采用各组血清培养3T3-Ll前脂肪细胞,MTT法检测细胞增殖活性,选择增殖能力最低组血清作为后续刺激血清。取3T3-Ll前脂肪细胞分别采用假伤血清(A组)、烧伤血清(B组)、假伤血清成脂诱导(C组)、烧伤血清成脂诱导(D组)培养。倒置显微镜下观察细胞生长情况,诱导培养7 d后行油红O染色,进行脂肪细胞计数并测量吸光度(A)值,实时定量PCR及Western blot检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(preoxisome proliferator-activated receptorγ,PPAR-γ)和脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase,LPL)基因及蛋白表达。结果 MTT检测示,与其余各组比较,烧伤4、7 d组细胞增殖能力显著降低(P<0.05),其中7 d组最低(P<0.05),取烧伤7 d组大鼠血清作为后续刺激血清。倒置显微镜观察示,培养后A、B组细胞形态无明显变化;诱导培养后C、D组细胞呈脂肪细胞样变,其中C组最显著。油红O染色示,C组细胞染色呈阳性,D组为弱阳性,余均为阴性;脂肪细胞计数以及A值比较示,A组高于B组、C组高于D组,差异均有统计学意义(P<0.05)。实时定量PCR及Western blot检测示,B组PPAR-γ基因相对表达量明显低于A组(P<0.05),但LPL基因相对表达量差异无统计学意义(P>0.05);PPAR-γ、LPL蛋白表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。D组PPAR-γ、LPL基因及蛋白表达量均显著优于C组(P<0.05)。结论大鼠烧伤7 d血清可致3T3-Ll前脂肪细胞成脂分化能力下降。
- 庄淑波柴家科郁永辉段红杰刘玲英樊军侯玉森王一贺
- 关键词：烧伤血清成脂分化
