樊杰
- 作品数:12 被引量:25H指数:3
- 供职机构:甘肃农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金:甘肃省科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学更多>>
- 实时荧光定量PCR构建牛源粪肠球菌esp标准曲线
- 2019年
- 为了快速检测牛源粪肠球菌,本实验建立了粪肠球菌esp基因实时荧光定量PCR标准曲线。首先参照esp基因在Genbank中的序列进行引物的设计与合成,利用PCR扩增目的基因并将其连接到pMD18-T载体上,并转化进入大肠埃希菌TOP10感受态细胞,经测序鉴定成功后,提取重组质粒并以10倍系列稀释后作为标准模板,进行实时荧光定量PCR。成功建立了牛源粪肠球菌esp基因荧光定量PCR标准曲线及其直线回归方程,所得熔解曲线峰值单一,表明引物具有很好的特异性;标准曲线相关系数r^2=0.9998,说明线性关系良好,目的基因的荧光定量PCR的标准曲线构建成功。本研究为快速检测牛源粪肠球菌奠定了基础。
- 樊杰孙康永杰魏亚琴杨宇泽万学瑞丁巨财王川
- 关键词:粪肠球菌ESP实时荧光定量PCR
- 大肠杆菌O157喹诺酮类耐药相关机制的研究
- 大肠杆菌0157:H7是医学和兽医学临床感染中常见的病原菌之一,建立快速检测方法对食品安全和人类健康具有重要意义。大肠杆菌0157对多种抗菌药物耐药主要与菌体中存在的外输泵有关。一般认为AcrAB-AB-TolC外输泵是...
- 樊杰
- 关键词:大肠杆菌氟喹诺酮类药物基因突变
- 文献传递
- 牛源粪肠球菌人工感染BALB/c雌鼠肾脏组织过程中PRNP和PRND的表达变化研究被引量:3
- 2021年
- 为了研究牛源粪肠球菌感染对小鼠PRNP和PRND基因表达水平的影响,用牛源粪肠球菌感染小鼠,在1~7 d内解剖小鼠,制作病理组织革兰氏染色及石蜡切片HE染色,最后通过荧光定量PCR检测感染后1~7 d内PRNP和PRND的表达情况。结果表明:牛源粪肠球菌感染BALB/c雌鼠后,肾脏组织病变较明显,实时荧光定量检测确实对PRNP和PRND基因的表达量存在影响;球菌感染PRNP和PRND基因在每个时段的表达量均高于空白对照组。说明小鼠肾脏的PRNP和PRND基因的表达水平随着感染时间的改变而发生变化。
- 樊杰张钊杨宇泽魏亚琴孙康永杰俞海山万学瑞王川
- 关键词:荧光定量PCR
- O_(157)∶H_7型大肠杆菌荧光定量PCR检测方法的建立被引量:10
- 2008年
- 根据GenBank中登录的肠出血性大肠杆菌保守基因序列Stx1、Stx2设计合成荧光定量PCR引物和探针,对荧光定量PCR的反应条件进行优化,建立了TaqMan荧光定量PCR检测方法。用建立的检测方法对临床分离病料进行了检测,并与常规PCR方法的检测结果做了对比。结果显示,建立的TaqMan荧光定量PCR方法的灵敏度达7.06×103CFU/mL,比常规PCR方法的灵敏度高106倍。用该方法和常规PCR对8种样品进行了检测,证实,该方法与常规PCR的阳性符合率为100%,具有较好的重复性。
- 樊杰伏小平
- 关键词:肠出血性大肠杆菌荧光定量PCR
- 奶牛乳房炎病原菌耐药性及无乳链球菌抗原基因研究
- 奶牛乳房炎是损害奶业生产的重大疾病之一。虽然乳房炎的病原具有复杂性与多样性,但主要以细菌为主。本研究通过对甘肃地区奶牛乳房炎组织病理学观察、主要病原菌耐药性调查及无乳链球菌病致病基因分析,筛选具有疫苗价值的抗原基因,为奶...
- 樊杰
- 关键词:奶牛乳房炎耐药性无乳链球菌SIP
- 牛源粪肠球菌esp基因的表达及生物信息学分析被引量:2
- 2018年
- 为了研究粪肠球菌表面蛋白基因(esp)对奶牛乳房炎致病性的影响,应用PCR技术扩增了部分牛源粪肠球菌表面蛋白基因(esp),构建了原核表达载体p ET-28a::esp,并在大肠埃希氏菌BL21中表达esp;利用生物信息学软件分析其编码氨基酸的基本理化性质。结果显示:实验成功构建了原核表达载体p ET-28a::esp,并在大肠埃希氏菌BL21中得到了高效表达,选取的部分esp编码的蛋白分子质量大小为110 ku左右,主要以可溶性形式存在;生物信息学分析得出选取的部分CDS长度为3 795 bp,编码1 207个氨基酸,其中含有108个潜在的磷酸化位点,存在抗原表位,跨膜结构可能存在区域为1~200位aa,不存在信号肽,有6个肽糖基化位点;预测其蛋白质二级空间结构以α-螺旋、无规则卷曲、β-折叠为主,而且比较发现esp在粪肠球菌中的无规则卷曲和β-折叠比在表皮葡萄球菌略多一些;esp编码的蛋白为酸性亲水性蛋白,等电点为9.67,脂肪系数为82.34,总平均亲水性为-0.713,不稳定指数为43.99,总共包括19 799个原子,分子式为C_(6132)H_(10027)N_(1741)O_(1848)S_(51),说明esp是一种抗原指数较高的亲水性蛋白,在原核系统能高效表达。
- 高昇杨宇泽马倩樊杰
- 关键词:原核表达生物信息学分析
- 兔豆状囊尾蚴病重组亚单位疫苗及ELISA检测试剂盒的研制
- 孙晓林范希萍尚清炎陈智华樊杰马小军薛慧文
- ①课题来源与背景:该课题是甘肃省科技支撑计划项目。兔豆状囊尾蚴病呈世界性分布,严重威胁着养兔业的发展,对该病的研究有重要的兽医公共卫生学意义。中国兔的存栏约3亿只,是居世界首位的养兔和兔肉出口大国。随着养兔业的不断发展以...
- 关键词:
- 关键词:养兔豆状囊尾蚴病重组亚单位疫苗检测试剂盒
- 一种家畜养殖用灭蚊装置
- 本实用新型公开了一种家畜养殖用灭蚊装置,包括装置本体、以及设置在装置本体上的清理装置和驱动装置;本实用新型在使用该装置时,通过水泵的工作使得液箱内的驱蚊液通过出水管流到连接盘内,经过喷头喷出,在驱蚊液经过出水管时将会带动...
- 魏衍全张勇成述儒魏彦明樊杰
- 金黄色葡萄球菌ATCC25923人工感染BALB/c雌鼠肾脏组织PRNP和PRND的表达变化研究被引量:2
- 2020年
- 目的为了研究细胞型朊蛋白和Doppel蛋白在金黄色葡萄球菌感染中的作用。方法本实验用金黄色葡萄球菌ATCC25923感染BALB/c雌鼠后,分别在1~7 d内解剖小鼠,进行组织抹片革兰氏染色和石蜡切片制作,最后采用荧光定量PCR检测PRNP和PRND在1~7 d中的相对表达量。结果金黄色葡萄球菌最先出现在肾脏,且对肾脏组织有损伤作用;PRNP和PRND基因在每个时段的表达量都高于空白对照组,其中PRNP在第1 d的表达量最高,为空白对照组的6.1倍,PRND在第2 d的表达量最高,为空白对照组的13.1倍。结论小鼠肾脏的PRNP和PRND的mRNA表达水平随着金黄色葡萄球菌感染的时间发生变化。
- 孙康永杰魏亚琴杨宇泽万学瑞樊杰赵波赵云海郭容霞王川
- 关键词:荧光定量PCR
- 羊脑多头蚴重组亚单位疫苗的研制与应用
- 孙晓林尚清炎范希萍陈智华苟惠天樊杰薛慧文李璇张小宇韩进欢张倩
- 中国是养羊大国,2011~2013连续三年的饲养量均在2.8亿只以上,脑多头蚴病的流行造成巨大了经济损失。免疫预防是中国动物疫病防控的基本国策,动物群体免疫水平的高低是确保其在疫病流行时抗病能力具体体现。为了实现上述基本...
- 关键词:
- 关键词:基因工程