殷俊
- 作品数：32 被引量：138H指数：7
- 供职机构：扬州大学兽医学院更多>>
- 发文基金：江苏高校优势学科建设工程资助项目江苏省高校自然科学研究项目江苏省教育厅自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生文化科学生物学更多>>
- 犬瘟热病毒OP株囊膜糖蛋白H基因的克隆与表达被引量：9
- 2002年
- 根据发表的犬瘟热病毒OP_CDV毒株序列设计两对引物 ,以犬瘟热病毒OP_CDV株感染Vero细胞收获病毒提取的RNA为模板 ,做RT_PCR扩增出H基因的 5′端和 3′端大小为 94 5bp、90 4bp的两个片段 ,两片段部分重叠 ,覆盖了H基因的全部编码序列。将PCR产物按正确的阅读框架定向克隆进pGEX_6p_1载体中谷胱甘肽_S_转移酶 (GST)基因的下游 ,将重组质粒转化进宿主菌BL2 1中 ,在 37℃ 1.0mMIRTG诱导下 ,H基因分段获得了良好的表达 ,表达产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定 ,确定其表达的融合蛋白质大小分别为 5 9kDa、5 8kDa ,将表达产物回收后混合免疫小鼠。IFA显示免疫小鼠血清能与病毒感染细胞呈现特异反应 ,表明体外表达H基因保留了天然蛋白部分抗原性。
- 徐向明崔治中徐建生秦爱建殷俊杨玲陈璐宗卫峰李厚达
- 关键词：犬瘟热病毒间接免疫荧光基因克隆基因表达
- 犬细小病毒YZ分离株的鉴定被引量：10
- 2002年
- 对 1999年冬季江苏省实验动物Beagle犬基地暴发的以拉稀、便血、高死亡率的病犬作流行病学调查、病理和实验室诊断。粪样血凝价高达 2 14 以上 ,并用HI加以验证 ,初步诊断为犬细小病毒感染引起的出血性肠炎。用FK81细胞 (胎猫肾传代细胞 )分离病毒 ,细胞上清HA试验阳性 ;负染电镜观察到大小为 2 0nm左右的病毒粒子 ;接种病料的细胞IFA检测可见特异性的亮绿色荧光。在小肠的病理切片中见到典型的嗜酸性核内包涵体。以此确诊为犬细小病毒感染引起的出血性肠炎。利用双琼脂空斑技术克隆一株犬细小病毒 ,命名为CPV_YZ株 ,其核酸型是单链DNA ,对甲醛敏感 ,对氯仿、酸、胰蛋白酶不敏感 ,80℃ 6 0分钟失去活力 ,0 .1mlTCID50 是 10 -6.8,SDS_PAGE电泳两条清析的条带分别为 :76kD的VP1,6 4kD的VP2。
- 王彦红徐向明杨玲殷俊李厚达
- 关键词：犬细小病毒出血性肠炎
- 犬细小病毒分离株VP2基因的克隆与序列分析被引量：28
- 2002年
- 以犬细小病毒 (Canine parvovirus,CPV)扬州分离株病毒的 DNA为模板 ,根据基因库 CPV-d序列设计合成了VP2基因的 1对特异引物 ,进行聚合酶链式反应 ,扩增出约 1 .7kb的片段 ,按常规方法克隆进 p UC1 8载体 ,经 Eco R 和Sal 双酶切筛选到阳性质粒 ,进一步对该片段进行序列分析。结果表明 :所扩增基因片段长度为 1 740 bp,与美国参考株 CPV-d (type 2 )、CPV-1 5 (type 2 a)、CPV-3 9(type 2 b)相比较 ,核苷酸同源性分别高达 99.5 %、99.7%、99.7%。
- 杨玲徐向明殷俊宗卫峰陈璐李厚达
- 关键词：细小病毒分离株VP2基因克隆
- 动物组织学PBL教学实践的积极意义与具体措施被引量：1
- 2016年
- 阐述了开展PBL教学实践的积极意义,分析了动物组织学开展PBL教学实践教师须具备的素质及具体措施,同时强调了科学精神在PBL教学中的重要作用,以期为动物组织学PBL教学实践提供借鉴。
- 殷俊陈兵孙敬
- 关键词：动物组织学PBL教学实践
- 犬瘟热病毒中国分离株囊膜糖蛋白基因免疫小鼠诱发的抗体应答被引量：6
- 2003年
- 将CDV中国分离株 (YZ0 10 1)的两囊膜糖蛋白基因F和H与pGEM_Teasy载体构建的重组质粒分别采用EcoRI和KpnI、BamHI和KpnI双酶切后定向克隆进真核表达载体pcDNA3.1(一 )中 ,DNA测序和限制性酶切分析筛选阳性克隆pcDNA_H和pcDNA_F ,以重组质粒DNA和脂质体共转染COS_7细胞 ,用间接免疫荧光试验验证转染的COS_7细胞胞浆中分别表达了CDV的H和F蛋白。以聚乙烯胺 (PEI)为佐剂 ,将犬瘟热病毒F和H基因重组质粒pcDNA_H和pcDNA_F的DNA分别或混合肌注 6周龄BABL/c小鼠 ,同时设pcDNA原载体DNA对照。以 2周为间隔共免疫 4次。最后一次免疫后 3周 ,采血分离血清 ,酶联免疫吸附试验 (ELISA)和病毒中和试验 (SN)分析基因免疫在小鼠体内诱导的免疫应答。结果显示 :pcDNA_H和pcDNA_F试验组免疫 4次后分别激发了 10 2 .99+ 0 .13 4 、10 2 .93 + 0 .164滴度的ELISA抗体 ;两种质粒DNA混合免疫后产生了 1∶32～ 1∶12 8的抗CDV的中和抗体 ;而原载体DNA免疫后 ,用ELISA和SN未检测出特异的CDV抗体。表明犬瘟热病毒囊膜糖蛋白F和H基因免疫小鼠可诱发产生特异性的体液免疫。
- 徐向明崔治中殷俊杨玲吴宝金薛整风李厚达
- 关键词：中国分离株F基因H基因DNA免疫抗体
- 含砷鸡粪施肥后对青菜和番茄植株中砷富集的影响被引量：4
- 2011年
- 利用给鸡饲喂50mg·kg-1和80mg·kg-1洛克沙生得到的鸡粪进行盆栽试验,研究两种含砷鸡粪对青菜和番茄中砷含量、砷富集因子的影响。结果表明,含砷鸡粪施肥后青菜和番茄植株中砷含量均明显提高;青菜砷含量、砷富集因子高于番茄植株,青菜有明显的砷富集作用;番茄植株中砷含量与其生物量呈负相关、未表现出对砷的富集作用。不同种属蔬菜在含砷鸡粪施肥后对砷有不同的摄入,青菜对砷有明显的富集现象,提示青菜在含砷鸡粪施肥后砷水平有较大影响,存在着砷超标风险。
- 张雨梅殷俊胡成云崔卫波刘学
- 关键词：青菜番茄洛克沙生
- 已烯雌酚致新生鼠肺肿瘤模型的建立被引量：2
- 2006年
- 背景与目的:研究已烯雌酚(diethylstilbestrol,DES)对新生ICR小鼠的致肿瘤作用,寻求建立DES致肺肿瘤模型经济有效的方法。材料与方法:ICR新生鼠,分设DES、乌拉坦(urethan,U)和U+DES组。U在14d以500mg/kg腹腔注射(intraperitoneal,ip);DES分别在1d、8d、15d ip,共3次,分别以注射日龄LD50的1/7、2/7、4/7为DES低(L)、DES中(M)、DES高(H)组。至26周时剖检,观察肿瘤发生情况。计算主要脏器系数、肺肿瘤发生率和平均肿瘤结节数。结果:新生鼠DES、U+DES及U各组均有明显的肺肿瘤发生。DES(L,M,H)各组的肺肿瘤发生率分别为16.7%、22.4%、43.1%;U+DES(L,M,H)各组分别为70.4%、90.9%、70.8%,U组为53.1%。U+DES(L,M)组肺肿瘤平均结节数高于DES(L,M)组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:DES与U联合作用可致新生鼠肺肿瘤高发,可作为肺肿瘤模型建立的有效方法。
- 张雨梅孙侠殷俊潘金春
- 关键词：已烯雌酚新生鼠肿瘤模型肺肿瘤
- 肝螺杆菌感染对葡聚糖硫酸钠诱导小鼠慢性结肠炎模型的影响被引量：1
- 2021年
- 目的探讨肝螺杆菌(Helicobacbter hepaticus,Hh)感染对葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodi um,DSS)诱导的小鼠慢性结肠炎的影响。方法40只雄性IL-10^(-/-)小鼠随机分为4组,分别为对照组、H.h组、DSS组和H.h+DSS组,H.h组和H.h+DSS组经灌胃感染H.h。H.h感染5 d后,DSS组和H.h+DSS组小鼠连续饮用2%DSS水7 d,然后恢复正常饮水5 d,再连续饮用2%DSS水7 d;其余组正常饮水。实验结束后处死各组小鼠,取结肠并测量其长度,然后分为3份,分别用于组织病理学检查、细胞因子mRNA转录水平检测和蛋白表达水平检测。结果病理学检查结果显示,与DSS组相比,H.h+DSS组小鼠的淋巴细胞浸润增多,上皮缺失严重,纤维化程度加重,隐窝萎缩明显,同时炎性细胞因子白细胞介素6和肿瘤坏死因子α转录水平上调,信号转导和转录激活因子3蛋白表达水平升高。结论H.h感染会加剧DSS诱导的小鼠结肠炎。
- 吴志浩沈宸殷俊朱立麒张泉
- 关键词：肝螺杆菌慢性结肠炎葡聚糖硫酸钠小鼠
- 以激发学习兴趣为导向的动物组织学与胚胎学双语教学实践被引量：3
- 2018年
- 开展双语教学是培养国际化人才、实现我国高等教育与国际接轨的重要措施。文章结合'动物组织学与胚胎学'课程特点和笔者多年的教学体会,从教材选择、教学设计、评价机制等角度阐明:培养学生的学习兴趣是克服双语教学困难、提高双语教学质量的有效途径。
- 殷俊
- 关键词：双语教学教学实践
- 莱克多巴胺单克隆抗体的研制被引量：11
- 2004年
- 莱克多巴胺(Ractopamine)与戊二酸酐、氯甲酸异丁酯反应后,与牛血清白蛋白偶联,免疫BALB/c小鼠,用杂交瘤技术获得2株稳定分泌抗莱克多巴胺单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并制备腹水,间接ELISA方法测定腹水抗体效价为1∶3.2×107。该抗体与克仑特罗交叉反应率为0.3%,体外传代培养和冻存复苏后抗体分泌稳定。获得的单克隆抗体可用于肉品中莱克多巴胺残留检测和莱克多巴胺残留检测试剂盒的开发。
- 张雨梅殷俊徐向明潘金春孙侠
- 关键词：莱克多巴胺Β-肾上腺素能兴奋剂单克隆抗体
