江飞子
- 作品数：19 被引量：32H指数：5
- 供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人肿瘤浸润淋巴细胞的克隆化
- 1992年
- 肿瘤组织经机械剪切和酶消化分离肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)。TIL在含1000U/ml重组人白细胞介素-2(rhIL-2)的培养液中培养6d后,植入含1000U/ml rhIL-2的软琼脂半固体培养基中培养,7d后将形成的克隆转移到含rhIL-2的培养液中培养。^(51)Cr释放法测定结果表明,约30％的克隆对NK敏感的K562细胞和对NK不敏感的H7402肝癌细胞有细胞毒性,为具有杀瘤活性的TIL杀伤克隆(TIL-K)。60％以上TIL-K克隆在含IL-2的培养液中可持续地增殖2～3个月,其细胞数可扩增至10~8～10~9,并始终保持对肿瘤细胞的细胞毒性。TIL-K克隆的表型为CD3^+、CD4^-、CD8^+、CD16^-,有T细胞抗原受体β链基因的表达,说明其属T细胞系统。采用半固体-液体两步培养法可获取大量高纯度具有广谱杀瘤活性的TIL,本研究有助于TIL的深入研究和临床应用。
- 周生毛宁张明伟江飞子李秀森杜德林
- 关键词：肿瘤淋巴细胞克隆化
- 逆转录病毒载体介导IL－2导入MCF－7细胞基因表达及对LAK细胞杀伤的敏感性研究
- 1995年
- 用逆转录病毒载体介导人ＩＬ－２基因导入人乳腺癌细胞系ＭＣＦ－７并获得表达。原位杂交结果证实，转染的ＭＣＦ－７细胞中有ＩＬ－２ｍＲＮＡ的表达，用ＩＬ－２依赖细胞系ＣＴＬＬ－２以ＭＴＴ比色法测得ＭＣＦ－７细胞培养上清液中有ＩＬ－２活性，其活性平均为１０ＩＵ／１０￣６细胞。转导后的ＭＣＦ－７细胞对ＬＡＫ细胞的杀伤敏感性降低。
- 李秀森郭宁王利红施巍江飞子王嘉玺毛宁
- 关键词：杀伤细胞基因表达
- 逆转录病毒介导的人血小板生成素(TPO)在骨髓基质细胞中的表达
- 2000年
- 为探讨逆转录病毒介导的TPO基因在人骨髓基质细胞系HFCL中的表达,利用脂质体法将含TPO基因的逆转录病毒载体导入HF-CL细胞中,RT-PCR和基因组DNA PCR分析证实mRNA水平有表达,基因组中整合有Neo基因和TPO基因。TPO依赖细胞株TD-3检测生物学活性表明转染的骨髓基质细胞分泌TPO。上述结果为进一步研究转基因骨髓基质细胞对造血细胞的调控作用提供了必要的基础资料。
- 张毅唐佩弦李秀森江飞子毛宁
- 关键词：人血小板生成素骨髓基质细胞逆转录病毒
- C57BL/6小鼠来源的胚胎干细胞建系及体外定向造血分化的研究被引量：5
- 2003年
- 哺乳动物的胚胎造血表现为时间和空间的连续变化。既往研究表明 ,12 9小鼠来源的胚胎干细胞系(embryonicstemcells,ES细胞 )的体外分化能在一定程度上模拟胚胎造血。为研究C5 7BL 6小鼠来源的ES细胞系体外定向造血细胞分化的特点 ,分离C5 7BL 6小鼠 3.5天囊胚的内细胞团建立ES细胞系并采用常规方法鉴定 ,应用体外二步分化法形成拟胚体并进行集落培养 ,细胞化学染色和RT PCR鉴定造血前体细胞。结果表明 :所建ES细胞系MES 1符合建系标准 ,其体外分化后可在不同阶段的拟胚体中发现多种造血前体细胞的有序出现 ,包括原始红系前体细胞 ,永久红系前体细胞 ,混合集落形成细胞和粒单系集落形成细胞。RT PCR分析显示 ,拟胚体表达多种造血特异性的转录因子和造血标记。结论 :自C5 7BL 6小鼠建立的ES细胞系MES
- 刘兵苑春慧江飞子侯春梅孙圣坤毛宁
- 关键词：胚胎干细胞造血前体细胞造血分化
- 小鼠LAK细胞对红系祖细胞及多向造血祖细胞增殖的影响
- 1990年
- 小鼠脾细胞经重组人白细胞介素-2(rhIL-2)激活后对YAC-1,LP-3和WEHI-164等肿瘤细胞均有很强的杀伤活性。在CFU-E和BFU-E培养体系中,不同浓度LAK细胞与BMC直接加入或预温育4h后再培养,均能加强CFU-E和BFU-E增殖。低浓度LAK细胞(LAK/BMC为0.5)与BMC直接加入或预温育后再加入CFU-mix培养体系中,均能增强CFU-mix增殖,而高浓度LAK细胞和BMC(LAK/BMC=8.0)直接加入培养体系则抑制CFU-mix增殖;若共温育后再培养则非常明显地抑制CFU-mix增殖,CFU-mix仅为对照的17.6％。小鼠LAK细胞对造血祖细胞体外增殖具有调节作用,这种调节可能包括分泌某些细胞因子以及细胞间直接相互作用两种方式。
- 江飞子毛宁张明伟唐佩弦
- 关键词：红系祖细胞LAK细胞
- 克隆的人LAK细胞对骨髓粒单系造血祖细胞体外增殖的抑制作用
- 1991年
- 本文应用琼脂半固体培养法观察了克隆化的人LAK细胞对骨髓粒单系造血细胞(CFU-GM)增殖的影响。LAK细胞对CFU-GM集落形成有抑制作用:2×10~5/mlLAK细胞与1×10~5/ml骨髓单个核细胞BMMNC预孵育0.5小时可使集落数减少43.8%(P<0.01),LAK与BMMNC预孵育4小时对CFUGM的抑制更为明显,0.5×10~5/ml LAK细胞即可使集落数减少58.8%(P<0.01),随LAK浓度加大抑制效应增强;当LAK与BMMNC在双层培养体系中不接触时,高浓度(4×10~5/ml)亦可表现集落抑制活性。抑制率28.8%(P<0.05)。自体LAK细胞对CFU-GM的抑制效应与异体相比无显著差异(P>0.20)。作者认为LAK细胞对CFU-GM的抑制作用为细胞直接作用与分泌可溶性因子介导的双重效应。
- 蒋承勇毛宁张明伟江飞子唐佩弦
- 关键词：克隆细胞LAK细胞造血祖细胞
- 应用IRES序列研究人FL与Tpo基因在转染HFCL细胞中的表达被引量：5
- 1999年
- 目的 探讨应用内部核糖体进入位点（ＩＲＥＳ）序列对逆转录病毒介导的人Ｆｌｔ３ 配基（ＦＬ）与血小板生成素（Ｔｐｏ） 基因在骨髓基质细胞系ＨＦＣＬ中的表达。方法 利用基因重组技术将ＩＲＥＳ序列与ＦＬ和Ｔｐｏ 基因构建到逆转录病毒载体中，脂质体法将重组质粒ｐＬＦＴＳＮ 和空载体ｐＬＸＳＮ转染ＰＡ３１７细胞，经Ｇ４１８ 筛选。用抗性克隆培养上清感染ＨＦＣＬ细胞，ＲＴＰＣＲ和基因组ＤＮＡＰＣＲ分析ｍＲＮＡ的表达及基因组整合情况，ＣＦＵＧＭ 集落法和Ｔｐｏ 依赖株法测定生物学活性。结果 成功构建出含ＩＲＥＳ序列的ＦＬ与Ｔｐｏ 基因逆转录病毒载体，ｍＲＮＡ水平及基因组中整合有ＦＬ与Ｔｐｏ 基因，生物学活性测定表明转染的骨髓基质细胞同时分泌ＦＬ与Ｔｐｏ。结论 ＩＲＥＳ序列调控ＦＬ与Ｔｐｏ 双基因在骨髓基质细胞中同时独立表达，为进一步研究转基因骨髓基质细胞对造血调控的影响奠定了基础。
- 张毅唐佩弦李秀森江飞子孙建民毛宁
- 关键词：细胞株PDGF
- IL－6／IL－2融合蛋白（CH925）在大肠杆菌中高效表达被引量：1
- 1994年
- 本文设计重组ＩＬ－６／ＩＬ－２的嵌合基因，选取合适的中间接头，并对ＩＬ－６及ＩＬ－２功能区基因进行修饰，运用ＰＣＲ拼接技术，克隆了中间接头与ＩＬ－２功能区基因。再与ＩＬ－６基因连接后转化Ｅ．ｃｏｌｉ，经序列分析证实获得ＩＬ－６／ＩＬ－２融合蛋白表达载体ＰＦＩＬ－６／２经诱导表达ＩＬ－６／ＩＬ－２（ＣＨ９２５）占菌体总蛋白３２％，融合蛋白分子量约为３７ｋＤ，分别以ＩＬ－６及ＩＬ－２依赖株测得融合蛋白具有双功能生物活性。
- 赵春华王嘉玺毛宁江飞子张明伟黄碧莲彭善云任蕴芳唐佩弦
- 关键词：融合蛋白白细胞介素大肠杆菌
- 小鼠LAK细胞对粒-单系祖细胞增殖的影响
- 1990年
- 在小鼠粒单系祖细胞(CFU-GM)集落培养体系中加入LAK细胞能显著增强CFU-GM增殖,LAK∶BMC为8时,CFU-GM数比对照增加194.4%。LAK细胞条件液也有类似co-CSF的活性,单独LAK细胞条件液不能刺激CFU-GM增殖。LAK细胞和BMC共孵育4小时后再进行CFU-GM培养,低浓度LAK细胞仍能增强CFU-GM增殖,而高浓度LAK细胞则显著抑制CFU-GM增殖,LAK∶BMC为8时,CFU-GM仅为对照的27.6%。作者认为小鼠LAK细胞能通过分泌某些co-CSF增强CSF的活力,而LAK细胞对CFU-GM又有接触杀伤的活性。
- 毛宁江飞子张明伟唐佩弦徐震逸孟晓波范晓波巴德年
- 关键词：杀伤细胞粒单系祖细胞增殖小鼠
- 克隆化LAK细胞及其培养上清对白血病细胞的细胞毒和分化诱导作用被引量：1
- 1994年
- 用半固体－液体两步法克隆的人ＬＡＫ细胞不仅表现对ＮＫ敏感的Ｋ５６２细胞和ＮＫ抵抗的ＨＬ－６０细胞强烈的细胞毒性，在二次杀瘤过程中表现同样高的活性，而且ＬＡＫ细胞培养上清对白血病细胞系ＨＬ－６０和新鲜白血病细胞具有增殖抑制和分化诱导作用。然而不同杀伤活性的ＬＡＫ细胞培养上清对新鲜白血病细胞增殖的影响不同。结果表明ＬＡＫ细胞在直接杀伤白血病细胞的同时，还通过分泌一些活性因子间接影响白血病细胞的增殖和促进其分化成熟，反映了ＬＡＫ细胞抗白血病作用的多向性。
- 李秀森江飞子张明伟毛宁杜德林
- 关键词：克隆化白血病细胞细胞毒
