奚永志
- 作品数:204 被引量:448H指数:11
- 供职机构:军事医学科学院附属医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 人类CD34^+造血干/祖细胞的分子生物学特性被引量:3
- 1995年
- 造血干/祖细胞(HSC/HPC)以有序的不同年龄等级结构状态存在于体内,它们的增殖、分化、成熟及程序死亡是一个连续的动态过程。CD34抗原是目前所能认识表达在HSC/HPC表面上的最早抗原分子,对其分子结构的研究使人们更加认识到CD34+HSC/HPC的不同功能亚群、表达范围及其它生物学特征,诸如细胞周期状态、光散射性、造血生长因子受体(HGFsR)P糖蛋白(Pgn)或多药耐药基因(MDR)的表达以及对活性染料的摄取等,从而完善并更新了现代HSC的概念及正常造血调控的基本模式。
- 奚永志
- 关键词:CD34抗原造血干祖细胞分子生物学特性
- 一种治疗类风湿性关节炎的DNA疫苗及其用途
- 本发明涉及一种重组核酸构建体,其含有与真核表达载体pcDNA3.1(+)有效连接的CCOL2A1基因(SEQ ID NO:1)。本发明还涉及含有与真核表达载体pcDNA3.1(+)有效连接的CCOL2A1基因组成的重组表...
- 奚永志宋新强
- 文献传递
- HL-60细胞中IL6基因的克隆及鉴定被引量:2
- 1999年
- 目的:为探索性构建重组人白细胞介素6-绿脓杆菌外毒素融合蛋白(IL6-PE40)以选择性杀伤高表达IL6受体(IL6R)的白血病细胞,本研究试图从人急性早幼粒细胞白血病细胞株(HL-60)中克隆N-末端缺失24个氨基酸的人IL6基因(IL6cDNA)并构建含此基因的重组质粒。方法:根据IL6基因序列设计合成可扩增IL6cDNA的特异性引物;利用基因重组技术,构建含IL6基因的重组质粒pUC-IL6。结果与结论:本文首次从HL-60中扩增出预期480bp的IL6cDNA,将其克隆至pUC18质粒中,命名为pUC-IL6,并经EcoRI/BamHI双酶切电泳及序列分析鉴定加以确证,为进一步构建重组人IL6-PE40奠定了坚实基础。
- 郑黎燕奚永志孔繁华鱼咏涛金荔陈兴国屠敏刘楠
- 关键词:白细胞介素6白血病HL-60细胞克隆融合蛋白
- 中国汉族人群人类白细胞抗原HLA不同基因座位间的基因重组被引量:7
- 2007年
- 人类白细胞抗原(human leucocyte antigen,HLA)复合体基因座位间的重组、重组热点、连锁不平衡与疾病易感性的关联性研究已成为免疫遗传学与人类后基因组学等研究领域的研究重点与焦点.本文报道了在中国汉族人群中发现的10例HLA复合体中的基因重组家系.采集重组家系的2~3代家庭成员的外周血标本,首先对其HLA-Ⅰ,Ⅱ类区域的5个经典基因位点进行PCR-SSP低、高分辨率基因分型及SBT分析,然后再进行遗传家系分析研究,确定HLA基因重组相关位点,并对重组家系的单体型进行了群体统计学分析.结果发现,在10例HLA重组家系中有8例重组发生在HLA-A/Cw位点之间,其中4例重组发生在A*02-Cw*03单体型中,2例重组发生在A*24-Cw*03单体型中;1例重组发生在HLA-B/DRB1位点之间,还有1例重组发生在HLA-B/Cw位点之间.群体统计学分析发现,A*02-Cw*03单体型呈一定程度的连锁不平衡但不是很强(?/δ(?)=3.0,?(r)=0.30);另有3个单体型虽呈强连锁不平衡却发生了重组事件,即A*33-Cw*03(?/δ(?)=7.22,?(r)=0.51),A*30-Cw*06(?/δ(?)=10.37,?(r)=0.93)和B*13-Cw*03(?/δ(?)=7.69,?(r)=0.38),这说明重组可能是打破旧的连锁不平衡来产生新的连锁不平衡的重要原因.本文绘制了每个重组家系成员的HLA单体型,并建立了中国汉族人群的HLA重组遗传图谱,初步定位重组发生的范围并分析了位点间重组与连锁不平衡的关系,这为更深入地研究HLA重组事件奠定了基础.
- 骆媛袁方孙玉英金荔梁飞刘楠宋新强刘曙光刘金锋王丹薛红孔繁华奚永志
- 关键词:基因重组家系研究
- 参照链介导的构象分析策略在人类白细胞抗原-A基因位点分型中的临床应用被引量:5
- 2003年
- 目的 建立并稳定人类白细胞抗原 (HLA)分型新策略—参照链介导的构象分析 (RSCA)系统 ;以HLA A位点为靶标 ,鉴定RSCA分型策略的优劣。方法 采用国际RSCA协作组提供的 2 0例标准分型DNA首先确定RSCA系统的稳定性、准确性及可复性。然后分别提取 84例拟进行造血干细胞移植病人及家系成员的外周血DNA ,采用RSCA和序列特异性引物体外基因扩增 (PCR SSP)法平行对照对HLA A基因位点进行分型。结果 对 2 0例标准分型DNA的分型结果显示 ,所获分型结果与国际RSCA协作组的完全一致 ,准确性及重复率均为 10 0 %。在全部 84例移植病人及家系成员标本中 ,有 82 /84例 ( 97.6 %)标本可明确判定结果 ,其中有 33/84例 ( 39%)可直接指定等位基因型别 ;此外 ,还有 2 /84例 ( 2 .4%)标本因PCR扩增结果太弱 ,致使RSCA法未能获得分型结果。随机选择 2 0例移植标本进行RSCA重复性实验表明 ,前后结果完全一致 ,然而在PCR SSP分型中 ,约有 10 %的标本需要重复 1~ 3次方能判定结果。结论 RSCA与PCR SSP分型结果相比 ,具有灵敏、特异、分辨率高、重复性好、可发现变异基因及新的等位基因、高通量和低成本的优点 ,非常适合于对拟进行非血缘异基因造血干细胞移植供 受体进行HLA分型。
- 赵丹丹孙玉英奚永志金荔刘楠梁飞
- 关键词:人类白细胞抗原-A基因位点造血干细胞移植
- 重组IL-6与IL-3或/和GM-CSF合用对正常BN大鼠粒单系体外造血的调控效应
- 1994年
- 本研究探讨了重组人IL-6与大鼠IL-3和/或小鼠GM-CSF结合对正常BN大鼠粒单系体外造血的调控效应。结果表明,IL-6在1000-4000U/ml呈剂量依赖性刺激粒系造血祖细胞集落形成及骨髓细胞的DNA合成,集落以GM型为主,其刺激活性低于IL-3或CM-CSF。lL-6与IL-3和/或GM-CSF的结合对粒单系集落形成及DNA合成无协同或相加作用,甚至出现拮抗效应,但却显著增大集落。提示IL-6可能具有双向调控作用,促进早期造血细胞的增殖,拮抗其它因子对晚期粒单系造血的刺激作用;具有重叠生物效应的这3种细胞因子在调控造血时,它们之间的相互作用应是顺序的而不是同时的。
- 奚永志唐佩弦
- 关键词:粒单系集落刺激因子造血细胞
- 造血干细胞移植配型中HLA分型方法的研究进展被引量:4
- 2005年
- 刘金锋孙玉英奚永志
- 关键词:造血干细胞移植移植排斥反应
- 重组人G-CSF双体分子的构建表达及生物活性和结构特性分析
- 2003年
- 研究目的是分子设计并构建较G-CSF单体分子具有半衰期更长、生物活性更高的新型重组人G-CSF/G-CSF双体分子(简称G-G),并在原核系统进行高效表达。分别构建pET32/G-G和pET32/G原核表达载体,实现G-G双体融合蛋白在大肠杆菌中的高效表达,利用亲和层析等方法进行蛋白纯化;对该融合蛋白的结构特征诸如等电点、柔性、抗原性及亲水性进行模拟分析;采用MTT法对G-G双体融合蛋白的生物学活性进行测定。结果首次构建成功了G-G双体分子融合蛋白高效表达载体,表达量高于40%,一步亲和层析所获融合蛋白的纯度为80%左右。该融合蛋白的结构特征模拟分析的结果显示,G-CSF双体分子的等电点、柔性、抗原性及亲水性均未显著改变。活性测定表明,所构建表达的重组人G-G双体分子能有效刺激G-CSF依赖细胞株NFS-60的增殖,但其刺激效应低于G-CSF的单体和标准品。结果表明,所构建表达的G-CSF的单体和G-G双体分子均可在大肠杆菌中获得高效表达,但G-G双体分子的比活性不及G-CSF单体分子,与预期设想的有差别,其原因正在研究之中。
- 郭斯启奚永志赵丹丹孙玉英崔建武刘楠梁飞
- 关键词:大肠杆菌
- GM-CSF/GM-CSFR系统介导靶向杀伤治疗白血病的新策略被引量:2
- 2001年
- 奚永志
- 关键词:GM-CSF白血病介入治疗
- 毒素蛋白PE40的基因克隆及序列分析被引量:5
- 1999年
- 细胞因子-受体介导的靶向杀伤作为导向治疗白血病与肿瘤的第二代新策略,是现代分子导向药物研究的最新领域之一。它是利用细胞因子与其受体的特异性结合来导向传递重组细胞因子-细菌外毒素融合蛋白以达到特异性杀伤高表达相应细胞因子受体的白血病及肿瘤细胞〔1~3〕...
- 郑黎燕奚永志孔繁华金荔陈兴国屠敏
- 关键词:白血病基因治疗基因克隆