潘海峰
- 作品数：11 被引量：25H指数：2
- 供职机构：浙江大学更多>>
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- 相关领域：化学工程轻工技术与工程生物学更多>>
- 一种生物转化合成六氢哒嗪-3-羧酸的方法
- 本发明公开了一种生物转化合成六氢哒嗪‑3‑羧酸的方法，属于生物技术领域。所述方法包括：(1)构建含有L‑鸟氨酸羟化酶编码基因和L‑哌嗪酸合成酶编码基因的重组质粒；(2)通过基因敲除构建鸟氨酸转氨甲酰酶编码基因argI缺失...
- 杜艺岭潘海峰
- 文献传递
- 新颖水解酶CESH的催化机制及其高效催化工艺研究
- 顺式环氧琥珀酸水解酶(cis-epoxysuccinate hydrolase, CESH),是一种水解酶,能催化顺式环氧琥珀酸水解为酒石酸。酒石酸广泛应用于食品、医药、化工、纺织、电镀等行业,其需求量正在逐年递增,目前...
- 潘海峰
- 关键词：顺式环氧琥珀酸水解酶BORDETELLA酒石酸响应面法定点突变
- 文献传递
- 一种漏电保护器重合闸方法
- 本发明涉及一种漏电保护器重合闸方法，该方法在发生漏电情况时，产生一个跳闸信号，使开关断开。在开关断开30秒后，自动产生一个合闸信号，使开关重新合上。此时对信号的稳定性进行检测：如果在5秒内没再有漏电信号，即表示电路已经稳...
- 韩雁郭行干潘海峰付文
- 文献传递
- 一种生物转化合成六氢哒嗪-3-羧酸的方法
- 本发明公开了一种生物转化合成六氢哒嗪‑3‑羧酸的方法，属于生物技术领域。所述方法包括：(1)构建含有L‑鸟氨酸羟化酶编码基因和L‑哌嗪酸合成酶编码基因的重组质粒；(2)通过基因敲除构建鸟氨酸转氨甲酰酶编码基因argI缺失...
- 杜艺岭潘海峰
- 文献传递
- 根瘤菌BK-20固定化细胞生产L(+)-酒石酸被引量：1
- 2014年
- 顺式环氧琥珀酸水解酶(CESH)是根瘤菌BK-20生产L(+)-酒石酸的关键酶。为提高其生产效率和生产稳定性,首先优化根瘤菌BK-20的产酶条件,然后利用固定化细胞连续生产L(+)-酒石酸。结果显示,优化后游离细胞酶活达(3 498.0±142.6)U/g,较优化前提高643%。固定化细胞酶活达(2 817.2±226.7)U/g,其最适包埋剂、菌体浓度和凝胶浓度分别为海藻酸钠,10%(W/V)和1.5%(W/V)。固定化细胞连续反应10批后,其形状和酶活均无明显改变,单批次转化率达98%以上,具有良好的生产稳定性。
- 兰翔鲍文娜潘海峰谢志鹏张建国
- 关键词：顺式环氧琥珀酸水解酶根瘤菌细胞固定化
- 产顺式环氧琥珀酸水解酶的博德特氏菌BK-52的筛选、鉴定及其产酶条件优化被引量：8
- 2008年
- 【目的】产顺式环氧琥珀酸水解酶(CESH)新型菌株的筛选、鉴定及其产酶条件优化。【方法】通过电镜、Biolog GN、(G+C)含量和16S rDNA序列研究,对筛选菌株进行分类鉴定。通过红外光谱、核磁共振氢谱和碳谱、质谱以及旋光度实验,鉴定纯化产物的结构并优化CESH产酶条件。【结果】本文筛选出一株产CESH的新型菌株,该菌株可将顺式琥珀酸盐转化为D(-)-酒石酸,属于博德特氏菌属,并将其命名为博德特氏菌BK-52。最佳发酵条件为:最佳温度30°C,最佳pH7.0,最佳发酵时间36h,最佳碳源蔗糖,最佳无机氮源硫酸铵,最佳酶诱导剂顺式环氧琥珀酸二钠。在此最佳条件下,CESH酶活最高达764U/g生物量。【结论】本文筛选的新菌株博德特氏菌BK-52为D(-)-酒石酸的生产提供了一种新的方法。
- 潘海峰谢志鹏鲍文娜张建国
- 关键词：顺式环氧琥珀酸水解酶
- 酒石酸高效生物合成关键技术及其应用
- 李永泉张建国谢志鹏潘海峰喻晓蔚吕龙贤
- 中国年产有机酸及其衍生物约1300万吨、产值逾千亿，占全球60%，但普遍存在生产效率低、能耗高、污染重等问题，因此利用生物技术提升有机酸产业水平和国际竞争力具有重要的战略意义。酒石酸是重要的有机酸产品，主要用作葡萄酒和饮...
- 关键词：
- 关键词：酒石酸生物合成
- 5-酮基-D-葡萄糖酸发酵生产的工艺条件优化被引量：2
- 2014年
- 葡萄糖酸氧化杆菌可将葡萄糖转化为5-酮基-D-葡萄糖酸(5-KGA),而5-KGA是重要食品添加剂L(+)-酒石酸的合成前体。为提高5-KGA产量及其对葡萄糖的转化率,对5-KGA发酵生产的工艺条件进行优化。在摇瓶水平最适的培养基和培养条件下,5-KGA最高产量为19.7 g/L,较优化前提高43.8%。在5 L发酵罐上控制恒定pH值5.5、溶氧浓度15%条件下,5-KGA产量达到46.0 g/L,较摇瓶最高产量提高1.3倍,应用葡萄糖流加工艺,5-KGA最高产量达到75.5 g/L,转化率超过70%,与已见报道的最高水平相比提高了32.0%,为实现微生物发酵生产5-KGA、进而合成L(+)-酒石酸的工业化提供了切实有效的途径。
- 李博义潘海峰孙伟荣程永青谢志鹏张建国
- 一种用于漏电保护器的抗干扰方法
- 本发明涉及一种用于漏电保护器的抗干扰方法。现有方法容易出现误动作。本发明方法通过连续的脉宽检测、连续性检测和延时三重检测，可以使抗干扰效果达到最佳。该方法既能够有效地对干扰信号(如雷电冲击等)进行滤除，又可以实现延时功能...
- 韩雁郭行干潘海峰付文
- 文献传递
- 葡萄糖酸氧化杆菌木糖醇脱氢酶基因的克隆与表达(英文)被引量：1
- 2012年
- 【目的】获得葡萄糖酸氧化杆菌(Gluconobacter oxydans CGMCC 1.637)的木糖醇脱氢酶基因,研究其酶学性质及碳源特别是D-阿拉伯醇和木糖醇对该酶活性的影响。【方法】通过已报道序列的木糖醇脱氢酶的保守区设计引物,用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增获得目的基因片段。根据获得的片段序列设计引物克隆目的基因的5'和3'片段,将所获得的片段拼接,获得完整的木糖醇脱氢酶基因。通过构建工程菌获得重组蛋白,并利用氧化还原反应测定重组酶的活性。用含不同碳源的培养基培养G.oxydans CGMCC 1.637,并测定其破胞上清液木糖醇脱氢酶氧化木糖醇的活性;用不同碳源培养的G.oxydans CGMCC 1.637转化木酮糖,用高效液相色谱法测定木糖醇的产量。【结果】获得一个新的798bp的木糖醇脱氢酶基因,所编码的木糖醇脱氢酶含265个氨基酸,属于短链脱氢酶家族。酶学性质研究发现,该木糖醇脱氢酶催化木糖醇氧化的最适合条件为35℃、pH 10.0,最高活性为23.27 U/mg,催化木酮糖还原为木糖醇的最适条件为30℃、pH 6.0。最高活性为255.55 U/mg;该木糖醇脱氢酶的对木糖醇的Km和Vmax分别为78.97 mmol/L和40.17 U/mg。碳源诱导实验表明,d-山梨醇对G.oxydans CGMCC 1.637木糖醇脱氢酶的活性有明显的促进作用,而葡萄糖、果糖、木糖、木糖醇、D-阿拉伯醇对木糖醇脱氢酶活性有明显的抑制作用。而在转化实验中,用d-甘露糖培养的G.oxydans CGMCC 1.637的转化能力明显高于其他碳源培养的G.oxydans CGMCC 1.637的转化能力,其中,用阿拉伯醇培养的G.oxydans CGMCC 1.637的转化能力最低,仅为对照的35%。【结论】克隆自G.oxydans CGMCC 1.637的木糖醇脱氢酶基因是一个新的基因,用阿拉伯醇培养的G.oxydans CGMCC 1.637破胞液木糖醇脱氢酶活性低;且阿拉伯醇对G.oxydans CGMCC 1.637木酮糖的还原能力具有抑制作用。
- 林燕清谢志鹏张建国鲍文娜潘海峰李博义
- 关键词：木糖醇脱氢酶木糖醇克隆
