王乐
- 作品数：17 被引量：62H指数：4
- 供职机构：天津医科大学总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市应用基础与前沿技术研究计划天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 微小RNA-218靶定SOX5对胶质瘤细胞生长和侵袭的影响被引量：2
- 2016年
- 目的观察微小RNA-218（miR-218）靶定SOX5对胶质瘤细胞生长和侵袭的影响。方法培养U87胶质瘤细胞株，将其分为对照组、无义序列组和miR-218转染组。取40例胶质瘤组织标本，35例正常脑组织。利用生物信息学方法、荧光素酶报告系统验证SOX5是miR-218的直接作用靶点。通过RT—PCR和Westernblot方法检测U87细胞、胶质瘤组织及其正常脑组织中miR-218对SOX5mRNA和蛋白表达的影响。在U87细胞中过表达miR．218后，利用MTT实验、Tanswell实验检测U87细胞表型的变化。利用RNA干扰技术沉默SOX5，利用MTY实验、Tanswell实验检测U87细胞表型的变化。结果与对照组、无义序列组比较，miRNA-218转染组的miRNA-218相对表达量升高42．2倍；MTT法结果显示，过表达miRNA-218后，胶质瘤细胞生长明显受到抑制，第5天细胞增殖率仅为49．2％；Transwell法结果显示，miRNA一218组穿过Transwell小室的细胞数为（13．0±2．1）个，低于对照组和无义序列组的（35．0±2．3）个和（32．0±3．1）个（均P〈0．05）。生物学信息预测SOX5是miR-218的靶基因之一，在SOX53’端非编码区含有miR-218的结合位点；双荧光素酶实验提示，SOX5为miR．218的直接作用靶点。过表达miR-218后，RT-PCR和Westernblot检测显示，miR-218转染组SOX5mRNA和蛋白的表达明显低于对照组和无义序列组，差异有统计学意义（P〈0．01）。与正常脑组织比较，胶质瘤组织中miRA-218mRNA的相对表达量降低，而SOX5mRNA相对表达量升高（P〈0．01）。沉默SOX5后，MTF法结果显示，细胞培养第5天，SOX5沉默[小干扰RNA（siRNA）-SOX5]组细胞增值率仅为siControl（无序列）组的51．0％；Transwell法分析显示，SOX5沉默组穿过Transwell小室的细胞数为（12．0±1．3）个，低于siControl组的（23．0±2．0）个（P〈0．05）。结论SOX5是miR-218的靶基因，并受其负向调控。miR-218可能通过靶定SOX5在胶
- 王乐南阳任炳成甄英伟郭红宝钟跃
- 关键词：神经胶质瘤微RNASU87细胞
- 春血安胶囊联合复方炔诺酮治疗功能失调性子宫出血的临床研究被引量：7
- 2021年
- 目的探讨春血安胶囊联合复方炔诺酮片治疗功能失调性子宫出血的临床疗效。方法选择2020年2月—2021年2月于天津医科大学总医院就诊的98例功能失调性子宫出血患者为研究对象,依据用药的差距分为治疗组和对照组,每组各49例。对照组口服复方炔诺酮片,于月经周期第5天开始用药,1片/d,连用22 d;治疗组在对照组的基础上口服春血安胶囊,2 g/次,3次/d。两组均治疗2个月经周期治疗。观察两组患者临床疗效,比较治疗前后两组患者临床症状改善时间、子宫内膜厚度、子宫平滑肌收缩幅,性激素促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)和雌二醇(E2)水平及血清血管内皮生长因子A(VEGFA)、血清抑制素B(INHB)、血管内皮生长因子受体-1(sFIt-1)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和前列腺素2α(PGF2α)水平。结果经治疗,治疗组总有效率显著高于对照组(97.96%vs 81.63%,P<0.05)。经治疗,治疗组症状改善时间明显早于对照组(P<0.05)。经治疗,两组子宫内膜厚度明显减小,子宫平滑肌收缩幅明显增加(P<0.05),且治疗组患者子宫内膜厚度和子宫平滑肌改善更明显(P<0.05)。经治疗,两组血清FSH、LH、E2水平均显著下降(P<0.05),且治疗组最明显(P<0.05)。经治疗,两组血清VEGFA、INHB、bFGF和PGF2α水平明显升高,而s FIt-1水平明显降低(P<0.05),且治疗组改善更显著(P<0.05)。结论春血安胶囊联合复方炔诺酮片治疗功能失调性子宫出血可有效改善患者临床症状,降低子宫内膜厚度,具有一定临床推广应用价值。
- 李波宋崟张科王乐
- 关键词：功能失调性子宫出血子宫内膜厚度性激素血清抑制素B
- SOX5在胶质瘤组织中的表达及对胶质瘤细胞株U87生物学行为的影响
- 2023年
- 目的:探究SBY-BOX转录因子5(SOX5)基因在胶质瘤组织中的表达及对胶质瘤细胞株U87增殖活性和侵袭能力的影响。方法:胶质瘤和正常脑组织标本各取10例,采用实时定量荧光PCR(RT-PCR)、蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测SOX5基因的表达,培养胶质瘤细胞株U87,将其分为对照组、无义序列组和siRNASOX5转染组。利用CCK8实验和Transell实验检测胶质瘤细胞株U87增殖活性及侵袭能力。利用Western印迹检测敲低SOX5表达后对基质金属蛋白酶(MMP-2)、MMP-9以及细胞周期蛋白D1(CyclinD1)表达的影响。结果:与正常脑组织相比,胶质瘤组织中SOX5蛋白和mRNA水平均明显升高(t=23.38、18.36,均P<0.01)。siRNASOX5可有效敲低SOX5基因的表达,与对照组、无义序列组比较,siRNASOX5转染组SOX5蛋白和mRNA水平均明显降低(F=89.31、123.34,均P<0.01);CCK8实验结果显示,敲低SOX5表达后,胶质瘤细胞的增殖活性受抑制,第120小时胶质瘤细胞增殖活性仅为对照组的31.8%(F=553.62,P<0.05);Traswell实验结果显示,siRNA SOX5转染组穿过小室膜细胞数为9.22±0.91,与对照组(19.62±1.10)、无义序列组(18.56±1.21)相比明显降低,仅为对照组的46%(F=89.36,P<0.01)。与对照组和无义序列组相比,siRNA SOX5转染组MMP-2、MMP-9以及CyclinD1基因表达均明显下降(F=853.21、602.30、311.46,均P<0.01)。结论:SOX5在胶质瘤组织中表达异常升高,敲低SOX5表达后能明显抑制胶质瘤细胞的增殖活性和侵袭能力,SOX5在胶质瘤中可能通过调控MMP-2、MMP-9以及CyclinD1基因表达发挥促癌基因的作用。
- 钟天佑南阳王乐
- 关键词：U87细胞MMP-2CYCLIND1
- 阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征的治疗进展被引量：16
- 2021年
- 阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)是一种临床常见的睡眠呼吸紊乱疾病,以睡眠中呼吸暂停和(或)低通气为特征,主要表现为夜间睡眠打鼾,白天嗜睡、疲乏无力等。OSAHS常引发多种合并症,涉及心脑血管、神经、内分泌、泌尿生殖、消化、血液等多个系统。OSAHS治疗方法包括一般疗法、持续气道正压通气治疗、手术治疗、口腔矫治器治疗、上气道刺激疗法及药物治疗等。OSAHS的病因和病变部位复杂,尚无一种治疗方法能治疗所有OSAHS患者。对于每例OSAHS患者,临床医生均应综合评估,选择一种或几种使患者受益最大的治疗方法。
- 周伟王乐张静曹洁陈宝元
- 关键词：阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征持续气道正压通气治疗手术治疗
- 微小RNA-451对人脑U87胶质瘤细胞株增殖和侵袭影响机制的研究被引量：3
- 2015年
- 目的 探讨微小RNA-451（miRNA-451）通过靶标钙结合蛋白39（CAB39）调控缺氧诱导因子1 α（HIF-1α）的表达对人U87胶质瘤细胞株增殖和侵袭的影响.方法 培养人脑U87胶质瘤细胞,将其分为空白对照组、无义序列组及miRNA-451 mimics处理组（简称miRNA-451组）;将合成的寡核苷酸miRNA-451拟似物（miRNA-451 mimics）转染至U87胶质瘤细胞.实时定量PCR法检测转染后胶质瘤细胞miRNA-451的表达,Western blot法检测CAB39、肝激酶B1（LKBl）、HIF-lα蛋白的表达,应用流式细胞术检测细胞周期的变化,噻唑兰比色分析法（MTT）检测细胞增殖能力,Transwell 实验检测细胞侵袭能力的变化.结果 空白对照组、无义序列组、miRNA-451组的miRNA-451相对表达量分别为13.08 ±0.48、12.91±0.66、9.94 ±0.29,CAB39的相对表达量分别为2.85±0.05、2.40±0.04,0.41±0.02,LKB1的相对表达量为1.05±0.04、0.95±0.04、0.28±0.02,HIF-1α的相对表达量为0.60±0.02、0.54±0.03、0.14±0.05,差异均有统计学意义（P＜0.05）;细胞周期分析表明,空白对照组、无义序列组及miRNA-451组细胞G0/G1期DNA含量分别为60.48％、58.70％、75.58％,差异有统计学意义（P ＜0.05）;MTT法分析显示,miRNA-451组细胞生长明显受到抑制,第6天细胞增殖率仅为41.48％;Transwell法分析显示,miRNA-451组穿过Transwell小室的细胞数明显减少,仅为24个,低于空白对照组和无义序列组的51个和45个,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 miRNA-451通过降低靶标CAB39的表达调控HIF-1α的表达,抑制人脑胶质瘤细胞的增殖和侵袭能力.
- 郭红宝南阳甄英伟郭丽云王乐张亚辉俞凯黄强钟跃
- 关键词：微RNAS神经胶质瘤细胞增殖肿瘤侵袭
- 不同水平血嗜酸性粒细胞的慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者临床特征及预后比较被引量：5
- 2022年
- 目的分析不同水平血嗜酸性粒细胞的慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)急性加重期患者临床表现、激素治疗反应性并随访其预后。方法收集2020年1-12月在天津医科大学总医院呼吸与危重症学科住院的124例COPD患者,以入院24 h内血嗜酸粒细胞绝对值计数为基线水平将患者分为3组,组Ⅰ为低EOS组(EOS#<100细胞/μL)(52例),组Ⅱ为中EOS组(100细胞/μL≤EOS#≤300细胞/μL)(51例),组Ⅲ为高EOS组(EOS#>300细胞/μL)(21例),并分析相关数据。结果低水平血嗜酸性粒细胞(EOS#<100/μL)患者病情更危重;中、高水平血嗜酸性粒细胞(EOS#≥100/μL)患者对糖皮质激素应答好,长期ICS治疗可减少EOS#>300细胞/μL患者再发重度急性加重风险。结论血嗜酸性粒细胞对评价慢阻肺急性加重期患者的病情严重程度、ICS获益及临床预后有重要的参考价值。
- 魏东晖李津娜周宁王乐张静曹洁
- 关键词：嗜酸性粒细胞慢性阻塞性肺疾病急性加重期糖皮质激素预后
- 整夜睡眠血氧饱和度低于90%时间占总监测时间的百分比与阻塞性睡眠呼吸暂停低通气常见合并症的关系被引量：15
- 2020年
- 阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea hypopnea syndrome,OSAHS)是一种常见的睡眠呼吸疾病,其睡眠中发生的慢性间歇低氧(chronic intermittent hypoxia,CIH)常对全身多个系统造成损害。T90%是PSG数据中的常见指标,指整夜睡眠过程中血氧饱和度(SpO2)<90%的时间占总监测时间的百分比,与呼吸暂停低通气指数(apnea hypopnea index,AHI)和最低血氧饱和度(minSpO2)相比,能更准确、更直观地反映OSAHS患者整个睡眠期低氧的情况。多项研究表明T90%与OSAHS相关合并症密切相关。本文就T90%与OSAHS常见相关合并症的关系加以综述,有助于全面而准确地评估OSAHS患者病情的严重程度,对OSAHS合并症做到早期发现、早期诊断、早期治疗,降低合并症的风险、减少合并症的危害。
- 王乐张静王彦呙恒娟曹洁陈宝元
- 关键词：呼吸暂停低通气指数常见合并症慢性间歇低氧血氧饱和度睡眠期
- 敲低亮氨酰-tRNA合成酶抑制人胶质瘤细胞U251增殖和迁移的体外研究被引量：1
- 2014年
- 目的探究敲低亮氨酰-tRNA合成酶（LARS）表达对U251细胞增殖和迁移能力的影响。方法采用脂质体转染LARS小干扰RNA（LARSsiRNA）于U251。PCR、Westernblot检测LARS表达；MTr法、平板克隆检测细胞增殖能力、流式细胞术检测细胞周期及Transwell法检测细胞迁移能力。结果较对照组和无义序列组，转染LARSsiRNA后LARSmRNA和蛋白水平明显降低，自转染48h后细胞增殖率明显下降（P〈0．05），且克隆形成率分别较对照组和无义序列组降低了51．69％和50．45％，G0／G1期比例分别增高了38．34％和31．93％，穿膜细胞数分别减少了81．78％和81．45％，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论敲低LARS表达可明显抑制U251生长增殖和迁移能力。LARS基因有望成为人脑胶质瘤基因治疗的侯选靶点。
- 谭富强张安玲南阳王乐叶敏华王广秀贾志凡康春生钟跃
- 关键词：亮氨酰-TRNA合成酶神经胶质瘤小干扰RNA
- 联合靶向第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因/磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路抑制胶质瘤细胞增殖和侵袭的机制被引量：2
- 2016年
- 目的 观察LY294002联合重组腺病毒Ad-第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因（PTEN）对胶质瘤LN229细胞株增殖和侵袭的影响.方法 应用噻唑蓝（MTT）法、流式细胞术、划痕实验和Transwell细胞侵袭实验评价LY294002联合Ad-PTEN对LN229细胞增殖、侵袭的抑制作用;Western blot检测PTEN/磷酸肌醇3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路中蛋白表达的变化.结果 与二甲基亚砜（DMSO）组、空载组和LY294002组比较,联合组细胞生长明显受到抑制,第6天细胞增殖率仅为38.68％;细胞周期分析结果表明,联合组细胞G0/G1期比例为75.49％,高于DMSO组、空载组和LY294002组的51.62％、50.31％、66.35％,差异有统计学意义（P＜0.05）;Transwell法分析结果显示,联合组穿过小室的细胞数明显减少,仅为（15.58±1.45）个,低于DMSO组、空载组和LY294002组的（27.63±4.36）、（46.67 ±3.61）、（49.28±5.37）个,差异有统计学意义（P＜0.05）.Western blot检测DMSO组、空载组、LY294002组和联合组PTEN蛋白相对表达量分别为0.13 ±0.04、0.26±0.03、0.52±0.07和0.83±0.16,磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）蛋白相对表达量分别为1.30±0.07、1.73±0.07、0.87 ±0.17和0.35±0.08,增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白相对表达量为2.72±0.02、3.13±0.06、0.63 ±0.13和0.38±0.09,细胞周期素D1（Cyclin D1）蛋白相对表达量为1.72±0.09、1.18 ±0.15、0.49±0.11和0.18 ±0.14,磷酸化黏着斑激酶（p-FAK）蛋白相对表达量为0.95±0.14、1.09 ±0.16、1.29±0.08和0.65 ±0.11,基质金属蛋白酶-2（MMP-2）蛋白相对表达量为0.73 ±0.19、0.87±0.12、0.61±0.10和0.23±0.08,表明联合组PTEN蛋白表达显著上调,p-Akt、PCNA、Cyclin D1、MMP-2、p-FAK表达显著下调,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 LY294002联合Ad-PTEN通过调控PI3K/Akt信号通路对胶质瘤LN229细胞株的增殖和侵袭具有联合抑制作用。
- 南阳宋云朋甄英伟郭丽云郭红宝王乐郭连梅俞凯黄强钟跃
- 关键词：胶质瘤小分子抑制剂信号传导
- TrxR1基因在脑胶质瘤组织中的表达及其对胶质瘤细胞株U87生物学特征的影响
- 2022年
- 目的探究硫氧还蛋白还原酶1(TrxR1)基因在脑胶质瘤组织中的表达情况以及对胶质瘤细胞株U87生物学特征的影响.方法回顾性分析中国脑胶质瘤基因组图谱计划(CGGA)数据库中325例脑胶质瘤患者的胶质瘤样本的转录组数据和临床资料,并利用蛋白质免疫印迹(WB)、实时荧光定量PCR(RT-PCR)和免疫组织化学技术进一步检测TrxR1在正常脑组织及胶质瘤组织中的表达情况.组织标本取自于2010年9月至2018年11月于天津医科大学总医院神经外科行手术治疗的脑胶质瘤和自发性脑出血患者,其中胶质瘤组织标本12例和正常脑组织标本12例.培养胶质瘤细胞株U87,将其分为对照组、无义序列组和siRNA TrxR1转染组(每组n=3).采用RT-PCR、WB和免疫组织化学染色方法检测TrxR1基因的表达情况.采用MTT、Transwell及细胞成球实验检测胶质瘤细胞株U87的增殖活性、侵袭能力及胶质瘤干细胞的致瘤性.采用WB检测敲低TrxR1表达水平后对STAT3表达的影响,以及对STAT3信号通路下游基因表达的影响.结果对CGGA数据库分析显示,TrxR1 mRNA的表达水平随着胶质瘤病理级别的升高而升高(P<0.01),并且高表达组患者的总生存期低于低表达组(P=0.019).WB、RT-PCR和免疫组织化学检测显示,与正常脑组织比较,TrxR1在胶质瘤组织中的表达水平均明显升高(均P<0.01).siRNA TrxR1可有效敲低TrxR1基因的表达,与对照组、无义序列组比较,siRNA TrxR1转染组的TrxR1表达水平在蛋白和mRNA水平中均明显降低(均P<0.05).MTI检测结果显示,敲低TrxR1的表达后,胶质瘤细胞生长明显受到抑制,培养第4天的细胞增殖率仅为对照组的39.3%.Transwell实验结果显示,siRNA TrxR1转染组穿过小室膜的细胞数低于对照组和无义序列组(均P<0.01),仅为对照组的47.0%.细胞成球实验结果显示,与对照组、无义序列组比较,TrxR1 siRNA转染组的成球率均明显降低(均P<0.01).WB检测结果显示,与对照
- 王乐钟天佑南阳任炳成范志娟赵立文钟跃
- 关键词：神经胶质瘤肿瘤侵润信号转导和转录激活因子3
