王卫东
- 作品数：4 被引量：38H指数：2
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- 溶血磷脂酸对体外血脑屏障模型通透性的影响被引量：1
- 2008年
- 目的探讨溶血磷脂酸（LPA）对血脑屏障通透性影响及其可能机制。方法将体外建立的血脑屏障模型随机分为空白对照组、LPA组和蛋白激酶C抑制剂（Ro31-8220）＋LPA组。γ计数仪检测模型对125^I-BSA的通过率；流式细胞仪检测PKC-α表达阳性的微血管内皮细胞（BMEC）比例；类鬼笔环肽染色观察BMEC的F-肌动蛋白变化；电子显微镜观察血脑屏障-紧密连接（BBB—TJ）改变；Western印迹法检测BBB-TJ内闭合蛋白5表达。结果LPA组125^I-BSA通过率（364cmp±15cmp）和PKC-α阳性细胞率（77％±7％）均高于空白对照组和Ro31-8220＋LPA组（184cmp±10cmp、223cmp±9cmp，42％±4％、52％±3％，均P〈0．01）；闭合蛋白5表达则低于空白对照组和Ro31-8220＋LPA组（0．353±0．04、1．00±0．03、0．574±0．07，均P〈0．01），同时LPA使BBB-TJ开放、F-肌动蛋白重组。结论LPA可促使BBB-TJ开放，增加血脑屏障通透性，其机制可能与PKC-α信号途径激活进而促使闭合蛋白5表达下调以及F-肌动蛋白重组有关。
- 甘娜尹飞彭镜王卫东
- 关键词：血脑屏障溶血磷脂酸蛋白激酶类
- 缺氧缺血对体外血脑屏障通透性的影响及其机制的研究
- 目的:探讨血脑屏障紧密连接(blood-brain barrier-tight junction,BBB-TJ)蛋白和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)在缺氧缺血诱导的...
- 王卫东尹飞
- 文献传递
- 紧密连接蛋白ZO-1、occludin和actin参与缺氧缺血诱导的血脑屏障通透性增加被引量：28
- 2008年
- 目的探讨血脑屏障紧密连接(blood-brain barrier-tight junction,BBB-TJ)蛋白ZO-1、occludin和ac-tin在缺氧缺血诱导的血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)通透性增加中的变化及其机制。方法利用人脐静脉内皮细胞系ECV304与星形胶质细胞(astrocytes,AS)共培养建立体外BBB模型,模型随机分为正常对照组和缺氧缺血两组。透射电镜观察两组间BBB-TJ的变化,直接免疫荧光观察细胞骨架蛋白actin分布的改变。γ计数仪检测大分子物质125I-牛血清白蛋白(125I-BSA)通透曲线观察BBB通透性的改变,Western blot检测细胞骨架蛋白actin,胞浆附着蛋白ZO-1,跨膜蛋白occludin的表达量的改变。结果透射电镜观察培养第10天的体外BBB模型,可见内皮细胞连接紧密,细胞间形成光滑、连续、较高密度的紧密连接。缺氧缺血后5 h,内皮细胞间连接开放,形成裂隙。直接免疫荧光下检测可见周边Actin丝带模糊,部分断裂,形成细胞间裂隙。缺氧缺血组125I-BSA的通透量增加,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。同时ZO-1的表达量显著减少,而occludin和actin的表达量无明显改变。结论缺氧缺血诱导occludin的位置分布改变和ZO-1的表达量减少进而促使actin蛋白发生重排,是导致缺氧缺血后BBB通透性增加的可能机制之一。
- 吴丽文尹飞彭镜王卫东甘娜
- 关键词：血脑屏障紧密连接蛋白ACTINZO-1OCCLUDIN通透性
- MMP-9和细胞骨架肌动蛋白参与缺氧缺血诱导的体外血脑屏障模型通透性增加被引量：10
- 2008年
- 目的:探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和细胞骨架肌动蛋白(actin)在体外模拟缺氧缺血诱导的血脑屏障(BBB)模型通透性增高中的变化及其机制。方法:利用人脐静脉内皮细胞系ECV304与星型胶质细胞(AS)共培养建立体外大鼠BBB模型,模型随机分为正常对照组、缺氧缺血组、BB-1101预处理组。通过γ计数仪检测大分子物质[125I]-牛血清白蛋白([125I]-BSA)通透曲线观察BBB通透性的改变,直接免疫荧光和Western印迹法检测actin表达量及分布的改变,并利用金属蛋白酶抑制剂BB-1101探讨MMP-9是否参与缺氧缺血诱导的BBB通透性增加。结果:缺氧缺血刺激后5h,缺氧缺血组[125I]-BSA的通透量增加、MMP-9表达增加,与对照组比较有显著差异(P<0.01)。直接免疫荧光下观察周边actin丝带模糊,细胞间连接松散,出现裂隙,但表达总量没有变化。BB-1101预处理可以减轻缺氧缺血所致的MMP-9表达增加和对actin连接的破坏,[125I]-BSA通透量低于缺氧缺血组(P<0.01)。结论:缺氧缺血诱导MMP-9表达增加进而促使actin蛋白重组,是导致BBB通透性增加的机制之一。
- 甘娜尹飞彭镜王卫东
- 关键词：血脑屏障肌动蛋白基质金属蛋白酶9通透性
